1 . 新冠病毒（SARS-CoV-2）S蛋白的受体结合结构域（RBD）是引导病毒进入宿主细胞的关键结构。我国科研人员将GP67基因（指导合成一段信号肽，引导新合成的蛋白分泌到细胞外）与RBD基因融合，构建融合基因，大量生产RBD蛋白，用于制备疫苗，流程见下图。下列相关叙述错误的是（       ）

A．过程①的理论基础是DNA具有相同的结构

B．过程②必须将融合基因与载体连接形成基因表达载体才能注射到受精卵内

C．过程③需用PCR技术检测融合基因是否成功表达

D．过程④可直接从培养液获得RBD，无需裂解细胞

2 . 《本草纲目》记载：“菠菜甘、冷、滑、无毒。主通血脉，开胸膈，下气调中，止渴润燥，根尤良。”此外，菠菜还富含类胡萝卜素、维生素C、维生素K等多种营养。下图1为菠菜叶肉细胞光合作用部分过程的示意图。其中，PSⅠ、PSⅡ是蛋白质和光合色素组成的复合物，PQ与电子传递有关，字母A~F 表示物质，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示反应场所。

(1)图1中PSⅠ、PSⅡ中光合色素的作用是___________；能为暗反应提供能量的物质有___________（填字母）；在光照条件下，叶绿体内发生的能量转换途径是光能→___________→___________。
(2)菠菜叶绿体类囊体腔内建立了高浓度的H⁺，这些H⁺来源于___________的分解和___________的传递。
(3)利用基因工程将某一抗冻基因导入菠菜后获得的转基因菠菜具有较高的抗冻能力。为了研究其机理，某同学用不同温度处理非转基因菠菜和转基因菠菜，3天后测得相关指标如图2、图3。

注：表观电子传递率是光合作用中光能转化最大效率的一种度量方式，可以反映光合作用中光反应阶段的强度
①该实验的自变量是___________。
②与非转基因菠菜相比，低温处理对转基因菠菜的表观电子传递效率的影响较___________（填“大”或“小”）。
③由图2和图3的数据变化可得出结论，低温不仅影响光合作用的光反应阶段，还影响别的方面。请写出依据：___________。
④综上所述，请写出转基因菠菜抗寒能力高的原因：___________。

4 . CRISPR-Cas9技术是一种应用广泛的基因编辑技术，通过人工设计的sgRNA（guideRNA）来识别目的基因组序列，并引导Cas9蛋白酶进行有效切割DNA双链，形成双链断裂，损伤后修复会造成基因敲除或敲入等，最终达到对基因组DNA进行修饰的目的。科学家利用CRISPR-Cas9技术将抑癌基因△Np63a定点插入小鼠胰腺癌细胞中，以研究其在胰腺癌细胞中的作用。图1为构建的Cas9—sgRNA质粒，将其导入胰腺癌细胞并表达（图2）；携带△Np63a基因的供体质粒与断裂DNA的高度同源序列（同源臂）发生互换，从而将△Np63a基因定点插入胰腺癌细胞基因组中（如图3所示）。请回答下列问题：

   

(1)Cas9蛋白可对特定的DNA序列切割，在功能上最接近于________酶；一次切割过程中会产生__________个游离的磷酸基团；将Cas9-sgRNA质粒和供体质粒导入胰腺癌细胞的方法是_________。
(2)若已知靶序列5'-GCATCG…GGTCCC-3'，根据该靶序列设计的sgRNA中的相应序列是5'-__________-3'。若要将靶序列从目标DNA上切除下来，则需要设计________种不同的sgRNA。
(3)CRISPR-Cas9系统有时存在结合出错而出现“脱靶”现象，分析其可能原因是_________。
(4)若要检测△Np63a基因是否已导入成功，可使用__________技术。被△Np63a基因成功转化的胰腺癌细胞体外培养时，在细胞水平上可能发生的变化有________。
(5)在上述基因编辑过程中，下列核酸序列中应已知碱基序列的有_____________。

A．sgRNA识别序列	B．同源臂1
C．同源臂2	D．CMV启动子

6 . 玉米是雌雄同株异花植物，得到雄性不育植株对育种具有巨大的应用价值，当前关键问题是如何有效地保持该品系和繁殖雄性不育植株。
(1)我国科学家采用太空诱变、辐射诱变等途径，得到了一批玉米雄性不育突变体。为研究某雄性不育的遗传机制，研究人员利用该突变体进行了杂交实验，过程如图所示。由实验结果可知，雄性不育是____性状，是由位于细胞核中____（1对或2对）基因控制。

(2)科研人员将同一段DNA 分子的三个基因A、B、D导入上述杂交实验F₂代雄性不育植株的受精卵中（说明：A 基因可使雄性不育个体恢复育性； B 基因可使含 B的花粉自我降解； D 基因为红色荧光基因），由该受精卵发育获得转基因植株后再使其自交，实验过程及结果如图所示。

①F₂代雄性不育植株的受精卵中只有一条染色体转入了一段含A、B、D基因的DNA片段，自交后代出现比例近似相等的无荧光植株与红色荧光植物。请用图解和简要文字解释该实验结果产生的原因____。（说明：转基因植物可表示为 ）
②自交后代中____（选填“有”或“无”）荧光植株表现为雄性不育。
③若将此转基因植株做父本继续与野生型玉米杂交，A、B、D基因____（“会”或“不会”）扩散到野生型植株中。
(3)雄性不育突变体无法通过有性生殖将“雄性不育”的特性持续传递给后代，而科研人员构建的该转基因植株却能通过自交使后代具有____优势，很好地解决了困扰多年的难题。

9 . 发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。下图是生产青霉素的发酵工程流程，据图分析下列说法错误的是（       ）

A．图示生产青霉素的过程中，对菌种进行分离纯化采用了稀释涂布平板法

B．青霉素的发酵生产多采用深层通气液体发酵技术来提高产量

C．选育出高产青霉素的菌种是本发酵工程的中心环节

D．主发酵罐中发酵液的pH应调至酸性

10 . 人类P基因启动子上游的调控序列中含有UFB蛋白（由肝细胞合成）的结合位点，该位点结合UFB蛋白后，能诱导P基因的表达，从而诱发一种肝细胞疾病。科研人员为确定UFB蛋白结合位点的具体位置，进行了构建重组载体和荧光检测等相关研究。相关信息如图所示。

限制酶识别序列及切割位点：NotI：5'GC↓GGCCGC3'   XhoI：5'C↓TCGAG3'   EcoRI：5'G↓AATTC3'   MunI：5'C↓AATTG3'
(1)为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增___片段，为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，结合图1和图2分析，需要在引物的___（填“3'端”或“5'端”）添加限制酶的识别序列，其中在F₁或F₂的末端添加Xhol限制酶的识别序列，在引物R的末端添加___限制酶识别序列。
(2)将扩增的片段分别插入用___限制酶和___限制酶处理的载体中，构建其与荧光蛋白基因融合的载体，以便进一步转化和荧光检测。
(3)将构建的表达载体导入含UFB蛋白受体细胞继续培养，进行荧光检测。根据研究结果推测，UFB蛋白结合的具体位点位于引物F₁与F₂在调控序列上所对应序列之间的区段上。为了进一步验证该推测，研究者依据相关序列制备了野生型和缺失特定碱基序列的突变型探针，分别与肝细胞核蛋白提取物（UFB）混合，实验分组及结果如图3。

据实验结果分析推测：
①肝细胞核蛋白提取物中含有的UFB与探针中的___结合，阻滞了探针的迁移。
②100倍非标记的野生型探针所起的作用是___。
③推测第5组结果产生的原因是___。
(4)根据以上研究尝试提出预防或治疗该肝脏疾病的思路___（答出两点即可）。