2 . 近年来，细胞工程领域成果迭出，方兴未艾。回答下列问题。
1．紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的苜蓿新品种，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图1（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）。

   

(1)图1中，在制备两种植物原生质体时，常用___________处理原材料。诱导融合的原生质体中只有异源融合体才能存活和具有再生能力，推测其原因可能是___________。
(2)从步骤②到步骤③需要更换新的培养基，其主要原因是培养物在不同的培养阶段所需的___________不同。利用图示技术进行育种的优点是___________。
Ⅱ．癌症的免疫疗法是指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程，如图1所示；双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理，如图2所示。

      

(3)双特异性抗体PSMA×CD28制备时，应先将___________（物质X）分别注射到小鼠体内再分离出B淋巴细胞。将B淋巴细胞分别与小鼠的骨髓瘤细胞融合时，与图1中的①过程相比其特有的诱导方法是___________。
(4)抗体都是由两条H链和两条L链组成的4条肽链对称结构。据图2分析，杂交瘤细胞A×B会产生多种抗体，原因可能是___________。双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是___________。

3 . 紫杉醇是红豆杉细胞中产生的一种高效抗癌物质，在植物体中含量极低。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式，可通过植物组织培养和细胞培养技术来获取，其过程为获取红豆杉外植体→消毒→诱导愈伤组织→细胞培养→提取紫杉醇。回答下列问题：
(1)外植体是指______。如表为四种不同外植体在相同培养条件下诱导形成愈伤组织的实验结果，由表中结果可知较适宜诱导愈伤组织的两种外植体分别是______。

外植体	愈伤组织体积	诱导率/%
不带叶茎段	很大	99.5
带叶茎段	很小	90
叶片	很小	20
成熟胚	较大	90

注：诱导率（%）=（形成的愈伤组织数量/接种的外植体数量）×100%
(2)紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种________代谢物。据图分析培养液中2，4-D对细胞生长、紫杉醇合成的作用分别是_____，为获得最大紫杉醇总产量，最适合的培养液中2，4-D浓度应为______（填“0.5”“1.0”或“2.0”）mg·L-1.

注：细胞生长速率指每天每升培养基中增加的细胞干重数。
(3)与从天然植株中提取紫杉醇相比，利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是_____。

4 . 紫杉醇是红豆杉细胞中产生的一种高效抗癌物质，在植物体中含量极低。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式，可通过植物组织培养和细胞培养技术来获取，其过程为：获取红豆杉外植体-消毒-诱导愈伤组织-细胞培养-提取紫杉醇。回答下列问题：
(1)获取的外植体首先要通过_____过程培养出愈伤组织。下表为四种不同外植体在相同培养条件下诱导愈伤组织的实验结果，由表中结果可知诱导愈伤组织较适宜的两种外植体分别是_____ 。

(2)将愈伤组织接种到适宜培养液中进行细胞培养，细胞培养的过程____（填“体现”或“未体现”）细胞的全能性，理由是______。据下图分析2，4-D对细胞生长和紫杉醇合成的作用分别是 ____，为获得最大紫杉醇总产量，最适合的2，4-D浓度应为 ____（ 填“0.5”、“1.0”或“2.0”）mg/L。

(3)与从天然植株中提取相比，利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是____（答出两点）。

5 . 紫杉醇是红豆杉细胞中产生的一种高效抗癌物质，在植物体中含量极低。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式，可通过植物组织培养和细胞培养技术来获取，其过程为获取红豆杉外植体→消毒→诱导愈伤组织→细胞培养→提取紫杉醇。回答下列问题:
(1)外植体是指___________________。如表为四种不同外植体在相同培养条件下诱导形成愈伤组织的实验结果，由表中结果可知较适宜诱导愈伤组织的两种外植体分别是________________________

外植体	愈伤组织体积	诱导率/%
不带叶茎段	很大	99.5
带叶茎段	很小	90
叶片	很小	20
成熟胚	较大	90

注:诱导率(%)=(形成的愈伤组织数量/接种的外植体数量)×100%
(2)据图分析培养液中2，4-D对细胞生长、紫杉醇合成的作用分别是_______，为获得最大紫杉醇总产量，最适合的培养液中2，4-D浓度应为______(填“0.5”“1.0”或“2.0”)mg·L-1。

注：细胞生长速率指每天每升培养基中增加的细胞干重数。
(3)与从天然植株中提取紫杉醇相比，利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是______________________（答出两点）。

6 . DHA对脑神经发育至关重要。以A、B两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。

亲本藻	优势代谢 类型	生长速率（g/L 天）	固体培养基上菌落直径	DHA 含量（％。）
A藻	自养	0．06	小	0．7
B藻	异养	0．14	大	无

据表回答：
（1）选育的融合藻应具有A藻______________与B藻 ______________的优点。
（2）诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得______________。
（3）通过以下a、b、c三步筛选融合藻，步骤______________可淘汰B藻，步骤______________可淘汰生长速成率较慢的藻落，再通过步骤______________获取生产所需的融合藻。
步骤a:观察藻落的大小
步骤b:用不含有机碳源（碳源——生物生长的碳素来源）的培养基进行光照培养
步骤c:测定DHA含量
（4）以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。

与甲、丙两组相比，乙组融合藻生长速率较快，原因是在该培养条件下______________。
甲、乙两组DHA产量均较高，但实际生产中往往采用甲组的培养条件，其原因是____________。

8 . 菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程，请据图回答：

注：卡那霉素抗性基因(Kan^r)作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感。
(1)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用__________处理土壤农杆菌，使其处于感受态。
(2)将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够_________________________的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的________________上，最终形成转基因植株。
(3)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。
(4)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据____________________的核苷酸序列设计特异引物，以____________________为模板进行第一轮扩增。
(5)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示。

①对照组应饲喂等量的_____________________________。
②据表分析，________________________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。

9 . 植物组织培养是植物细胞工程中的基本技术，请回答下列有关问题：
(1)进行组织培养需配制培养基，诱导愈伤组织的培养基中______________（应该、不应该）添加蔗糖等有机物，原因是_____________。
(2)某兴趣小组想通过实验确定适合诱导生根的培养基，配置培养基，进行实验，部分配方如下：

编号	培养基配方
1	MS+6-BA（10-8mol/L）+NAA（10-9mol/L）
2	MS+6-BA（10-9mol/L）+NAA（10-10mol/L）
3	MS+6-BA（10-10mol/L）+NAA（10-9mol/L）
4	MS+6-BA（10-9mol/L）+NAA（10-8mol/L）
5	MS+6-BA（10-10mol/L）+NAA（10-10mol/L）

注：表中MS是植物组织培养常用的培养基，IAA（吲哚乙酸）、6-BA（细胞分裂素）、NAA（萘乙酸）为常用植物激素或类似物。
①准备好若干种要尝试的培养基，每种培养基3瓶。
②在超净台上，将长势相当的愈伤组织切成大小相同的小块，分别接入各培养基中，所有接种好的培养瓶放在温度相同且______________条件下培养。
观察各种培养基中生长情况并做记录，若要确定哪种培养基是最适合诱导生根的培养基，观察的指标一般是根的长度。
结果预测：若从记录表格中发现______________，则说明这种培养基是这些培养基中最适合诱导根的培养基。猜测最适合诱导生根的培养基一定不是____________（填表中编号），原因是_______________。
(3)用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，被称作植物的快速繁殖，也叫微型繁殖。该技术除了可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖，还有_______________的优点。除此之外，植物组织培养还可用于作物脱毒，操作方法是_____________。

10 . 紫杉醇是红豆杉细胞中产生的一种高效抗癌物质，在植物体中含量极低。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式，可通过植物组织培养和细胞培养技术来获取，其过程为：获取红豆杉外植体-消毒-诱导愈伤组织-细胞培养-提取紫杉醇。据下图表回答下列问题：

外植体	愈伤组织体积	诱导率(%)
不带叶茎段	很大	99.5
带叶茎段	很小	90
2叶片	很小	20
成熟胚	较大	92

注:诱导率(%) = (形成的愈伤组织数量/接种的外植体数量) ×小100%

(1)获取的外植体首先要通过______过程培养出愈伤组织。表为四种不同外植体在相同培养条件下诱导愈伤组织的实验结果，由表中结果可知诱导愈伤组织较适宜的两种外植体分别是____________________。
(2)将愈伤组织接种到适宜培养液中进行细胞培养，细胞培养的过程______（填“体现”或“未体现”）细胞的全能性，理由是______。据图分析2，4—D对细胞生长和紫杉醇合成的作用分别是______，为获得最大紫杉醇总产量，最适合的2，4—D浓度应为______（填“0.5”、“1.0”或“2.0”）mg/L。
(3)与从天然植株中提取相比，利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是______（答出两点）。