1 . 某二倍体雌雄同株植物果肉颜色有黄果肉（A）和白果肉（a），茎的颜色有红皮茎（b₁）、紫皮茎（b₂）和白皮茎（b₃），某小组为研究这两对相对性状的遗传机制进行了杂交实验，实验结果如下表所示（“-”表示无）：

亲本组合	F1植株
	黄果肉	白果肉	红皮茎	紫皮茎	白皮茎
组合一：黄果肉红皮茎×黄果肉红皮茎	240	77	238	-	79
组合二：黄果肉红皮茎×白果肉紫皮茎	134	136	133	137	-
组合三：白果肉紫皮茎×黄果肉红皮茎	408	-	101	208	99
组合四：黄果肉紫皮茎×白果肉白皮茎	124	125	-	248	1

请回答下列问题：
(1)根据结果推测，控制该植物茎颜色的基因b₁、b₂、b₃的显隐性关系为______（显隐性大小用“>”表示）。
(2)由上表统计结果无法推测控制该植物果肉颜色与茎颜色的基因的遗传是否遵循自由组合定律，其判断依据是______。取组合一F₁中的所有黄果肉红皮茎与组合二F₁中的黄果肉紫皮茎杂交，若子代出现______，则说明题述两对等位基因的遗传遵循自由组合定律。
(3)在不考虑基因突变的情况下，组合四的F₁出现白皮茎植株（性状可遗传给后代）可能的原因是______（答出2点）。快速检测该植株产生原因的方法是______。
(4)该植株在农业生产中采用无性繁殖的方式进行繁殖，它们感染的病毒很容易传给后代。病毒在作物体内逐年积累，导致产量降低、品质变差。请从植物细胞工程角度给出解决这一问题的措施：______。

2 . 研究人员为了制备烟草（四倍体，4n=48）的叶片细胞与紫罗兰（二倍体，2n=14）的紫色花瓣细胞的原生质体，并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株，进行了如下实验：
一、原生质体的制备：酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号                  项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	0	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0．5	0．5	0．5
果胶酶液（mL）	0	0	0	0．5	0	0
蜗牛酶液（mL）	0	0	0	0	0．5	0
纤维素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0．5
实验结果（绿色深浅程度）	一	一	—	++＋	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）。
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是_____________________________，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有_________等多种酶。该实验中____________是空白对照组，其设置意义是___________________。
（3）如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验，其检验的方法可以是_________________________________________________________________________。
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液：
三、原生质体融合：将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后，离心10min，将分离得到的融合成团的，原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后，凝固形成很薄的平板。．再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析：
（4）步骤三中，若所有的原生质体均两两融合，则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是____________________________。
（5）只利用显微镜观察，不借助其他手段_________（能，不能）鉴别出杂种融合的原生质体，你所依据的观察现象是____________________________。
四、制取紫罗兰烟草的人工种子：
（6）制备人工种子时，用人工薄膜包裹__________若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株，杂种植株为___________倍体。

3 . 研究人员为了制备烟草（四倍体，4n=48）的叶片细胞与紫罗兰（二倍体，2n=14）的紫色花瓣细胞的原生质体，并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株，进行了如下实验：
一、原生质体的制备
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号 项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	0	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液（mL）	0	0	0	0.5	0	0
蜗牛酶液（mL）	0	0	0	0	0.5	0
纤维素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0.5
实验结果（绿色深浅程度）	—	—	—	+ + +	+ + + +	+ +

（注：“+”越多表示绿色越深，“—”表示颜色无显著变化）
(1)实验过程中，需要轻摇试管，其目的是______________________________，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有____________等多种酶。该实验中_____________是空白对照组，其设置意义是_________________。
(3)如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验，其检验的方法可以是___________________________________________。
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液
三、原生质体融合
将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后，离心10min，将分离得到的融合成团的原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后，凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析：
(4)步骤三中，若所有的原生质体均两两融合，则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是____________________________。
(5)只利微镜观察，不借助其他手段____（能，不能）鉴别出杂种融合的原生质体，你所依据的观用显察现象是_________________________。
四、制取紫罗兰烟草的人工种子
(6)如下图2中，包埋形成人工种子过程中，先适当加热使海藻酸钠溶化，然后将溶化的海藻酸钠溶液_________，再加入__________充分搅拌混合均匀。 若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株，杂种植株为_________倍体。

4 . 近年来，植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。植物组织培养可以分为四个阶段：
一、建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织。
二、进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的。
三、将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根。
四、试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。
据此回答下列问题。
（1）植物组织培养基的成分含有有机营养、无机营养、________。题中指出的生根培养基与之前使用的培养基是否一致，并请说明理由。________，________________
（2）通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮（人工薄膜）包装得到人工种子，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。与传统的种子生产相比，人工种子具有的优点是________________________（请少答出2点）。
（3）用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的________进行组织培养。
（4）建立无菌体系时，需要用到70%的酒精溶液，酒精进入细胞的方式为________，幼嫩的材料易在酒精溶液中失绿，所以浸泡时间要短，而且酒精处理后马上要用________冲洗。获得愈伤组织属于植物组织培养技术过程中的________阶段。

6 . 葡萄酒酵母（C1)具有良好的发酵性能，但分解苹果酸能力差，过多的苹果酸会使葡萄酒有酸涩感，解苹果酸裂殖酵母（Ml)具有极强的降解苹果酸能；但发酵性能极差。为了培育新型酵母菌菌种，科研人员采用了以下步骤进行育种。请分析回答：

(1)步骤一：制备原生质体。培养Cl、Ml单倍体亲株，加入一定量的0.5%的蜗牛酶液，保温处理一段时间，用一定浓度的高渗缓冲液洗涤，以确保获得更多的原生质体。
①本实验中，蜗牛酶液的作用是______________。
②在无菌条件下，用___________(A：高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C：生理盐水）洗涤，以确保获得更多的原生质体。
③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验，结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率，相比较酶浓度为_______________时更适宜。
(2)步骤二：诱导原生质体融合。取Cl、Ml原生质体悬浮液等量混合，离心去除上清液，加入一定量40%的_________溶液,30℃保温20min，镜检并观察融合情况。
(3)步骤三：融合子的鉴定。测定细胞体积及DNA含量，结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是_____________。
(4)步骤四：融合子发酵性能的测定。测定融合子与亲株的降糖能力和降酸能力，图2和图3是对Z29和亲株的测定结果，据图分析可以得出的结论是__________的降糖能力和降酸能力均较好，表明 _________。

7 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜制作有关的问题：
（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生_____，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是_______。
（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使______菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使______菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
（3）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行______，再用______的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有______，以便于观察是否产酸。
（4）自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加______。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
（1）为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经______处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法有______（答出2点即可）。
（2）若要获得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用______，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的黏性末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中______，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。
（3）原生质体在培养过程中，只有重新形成______后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过______或器官发生的途径再生植株。

8 . 下图为两个种间植物细胞融合和再生植株示意图。请据图回答：(一～八表示各主要步骤)

(1)从步骤一到步骤二是植物细胞形成____________的阶段，其关键技术是______________________。
(2)从步骤二到步骤三一般要用____________作为促融剂。
(3)步骤四为____________过程。
(4)在形成再生植株的过程中，与组织培养有相似之处的步骤是___________，理由是___________________。
(5)步骤八表示选择体细胞杂种植株，杂种植株在形态上表现为___________，其根本原因是_____________。
(6)该项研究解决了育种过程中的什么问题？
_____________________________________________________________。

9 . 紫罗兰（2n=14）花色丰富、抗虫性强、种子油富含X-3-亚麻酸。为了让油菜（2n=38）具有紫罗兰的诸多优良性状，科研工作者进行了如图1所示实验，分析回答下列问题：

(1)用酶解法制备原生质体时，需先用较 ______（填“高”或“低”）渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的 ________________状态，然后用酶去除细胞壁，获得原生质体。
(2)筛选出所需的杂种细胞后，还要采用 __________________技术才能获得杂种植株，该过程需要在培养基中加入一定浓度的 _____________________（填写相关植物激素的名称），使其脱分化形成愈伤组织，继而再分化，并生长发育成完整植株。
(3)运用传统有性杂交方法不能得到紫罗兰一油菜的杂种后代，原因是______。
(4)科研工作者分别用4种浓度的PEG对两种原生质体进行了融合试验，结果如图2所示：
注：a.由两个原生质体进行的融合称为二源融合；大于两个原生质体进行的融合称为多源融合；b紫罗兰一油菜是由一个紫罗兰原生质体和一个油菜原生质体融合后培养产生的。
该实验的自变量是 _________________，根据实验结果，为提高紫罗兰一油菜的成功率，应选用的最佳PEG浓度为 ______%。

10 . 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，请回答下列问题：
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。下图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。

材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)材料一中，步骤①所使用的B淋巴细胞能合成并分泌___________（填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行____________及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是____________。
(2)体外培养材料一中X细胞时，需向培养液中通入95%空气＋5%CO₂的无菌气体，其中CO₂的主要作用是___________。长时间培养时还需要定期清理培养液的目的是___________。利用抗HCG单克隆抗体，研究人员制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的机理是___________。
(3)实现材料二中茶碱的工业化生产时，可将龙井茶叶细胞培养到____________阶段，然后从_________（填“细胞器”）中提取茶碱；若要获得人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到___________，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中，由其培育成的植株生殖方式属于___________。
(4)材料一和材料二都是为了有目的地获得特定产品，两者涉及的工程技术是在___________水平上操作的。