1 . 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述正确的是（       ）
   

A．过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞

B．过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞

C．过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化

D．可借助PCR技术、黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定

2 . 植物组织培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。

（1）植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有______________________（答出2点即可）。
（2）通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮（人工薄膜）包装得到人工种子（如图所示），这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是_______________________________。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质，因此应含有植物激素、___________和___________等几类物质
（3）用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的___________进行组织培养。
（4）植物组织培养技术可与基因工程技术相结合获得转基因植株。将含有目的基因的细胞培养成一个完整植株的基本程序是______________________________________________（用流程图表示）。

4 . 品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（       ）

A．过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗

B．过程B中常用PEG诱导原生质体融合

C．过程C中只有融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长

D．杂种植株的抗除草剂基因遵循孟德尔遗传定律

5 . 育种工作者利用番茄（2N）和马铃薯（4N）进行体细胞杂交，获得了“番茄—马铃薯”杂种植株，实验过程如图所示，遗憾的是该杂种植株并非是想象中的地上长番茄、地下结马铃薯的“超级作物”。

(1)材料中所用到的植物体细胞杂交技术应用到原生质体融合和___________________技术，该技术的理论基础是_________________________________________。
(2)图中①步骤所示植物细胞用___________________和___________________除去细胞壁，分离出有活力的原生质体。
(3)图中②过程细胞两两融合时，可出现___________________种融合细胞，要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有___________________和___________________两类激素。
(4)由杂种细胞培育成试管苗，需要经过细胞的④___________________和⑤___________________过程。其中⑤过程必须给予光照，其原因是___________________能利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。
(5)利用马铃薯和番茄的___________________进行离体培养得到单倍体植株，然后取单倍体植株细胞进行体细胞杂交，再用___________________处理之后也可得到可育的“番茄—马铃薯”杂种植株。

6 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与泡菜制作有关的问题：
（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生_____，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是_______。
（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使______菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使______菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。
（3）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行______，再用______的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有______，以便于观察是否产酸。
（4）自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加______。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
（1）为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经______处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法有______（答出2点即可）。
（2）若要获得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用______，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的黏性末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中______，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。
（3）原生质体在培养过程中，只有重新形成______后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过______或器官发生的途径再生植株。

7 . 科学家通过植物体细胞杂交的方法，培育出第一个杂种植物：番茄—马铃薯（番茄2N＝24，马铃薯4N＝48）。虽然这种植株并没有像科学家预料的那样，地上结番茄，地下结马铃薯，但却为植物体细胞杂交在生产实践中的应用拉开了帷幕。以下为番茄和马铃薯体细胞杂交的步骤：

回答下列问题：
(1)植物体细胞杂交技术的原理是______________，从杂交细胞到番茄—马铃薯植株是利用____________________技术来实现的。
(2)过程①利用酶解法得到的结构是_________，过程②中常用的试剂是____________。
(3)植物体细胞融合完成的标志是_________；过程②得到的融合细胞有________种。
(4)培养出的“番茄—马铃薯”植株细胞中的染色体数目为_______________。植物体细胞杂交技术在育种上的优点是____________________。

8 . 下列生物技术的应用实例中，运用的原理与其他各项不同的是（       ）

A．将转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育成植株

B．利用花药离体培养获得植物单倍体植株

C．悬浮培养人参细胞，提取人参皂苷

D．通过植物组织培养获得人工种子并发育成植株

9 . 滁菊为菊科多年生草本植物，长期营养繁殖易造成病毒积累，导致滁菊花色劣变。某科研小组比较了3种脱毒方法对滁菊体内菊花B病毒（CVB）和菊花矮化类病毒（CSVd）脱除的效果，结果见下表；下图是对不同试管苗进行RT-PCR（逆转录PCR）后的电泳示意图（引物根据CVB的基因序列设计），下列叙述错误的是（       ）

不同脱毒方法对“滁菊”茎尖脱毒率的影响

脱毒方法	样本存活数	脱除CSVd率	脱除CVB率
茎尖分生组织培养	77	20.78	44.16
热处理结合茎尖培养	71	36.62	63.38
病毒唑结合茎尖培养	71	46.48	49.30

A．RT-PCR技术中用到的酶有逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶

B．热处理、病毒唑处理后，试管苗存活率下降

C．试管苗2、5尚未脱毒成功，3、4已脱去CSVd和CVB病毒

D．只脱除CSVd病毒时，可选择病毒唑结合茎尖分生组织培养