2 . 如图所示，利用细胞工程和胚胎工程技术培育哺乳动物的方式有三种，其中a为精子，b为卵细胞，c和d均为体细胞。请回答下列问题：

(1)方法一为试管动物的培育过程，其中精子a在受精前要进行______处理，在体内，该过程是在雌性动物的_______中完成的。
(2)方法二的理论基础是_____。
(3)方法三获得杂种细胞，该技术的突出优点是________。

3 . 如图所示，利用细胞工程和胚胎工程技术培育哺乳动物的方式有三种，其中a为精子，b为卵细胞，c和d均为体细胞。请回答下列问题：

(1)方法一为试管动物的培育过程，其中精子a在受精前要进行____ 处理，在体内，该过程是在雌性动物的____中完成的。
(2)方法二的理论基础是____，通过方法二获得的动物个体乙的遗传物质主要来自____（填“b”或“c”）。
(3)方法三获得杂种细胞，该技术的意义是____。诱导动物细胞融合，有别于植物细胞融合的诱导方法为用____诱导细胞融合。

4 . [生物——选修3：现代生物科技专题]I、我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实施。十二年前，33岁的产妇朱女士利用试管婴儿技术，成功生下一个男孩。2016年3月，朱女士决定生育第二个孩子，医院找到当年为她冷冻的“胚胎”，经过检胎等程序，朱女士已成功怀孕12周。冷冻12年后复苏、植入，该“冻龄”宝宝将有望成为国内最“老”的宝宝。有意思的是，这个沉睡了12年的“冰宝宝”，跟自己11岁的亲哥哥其实是“同龄”。请回答以下相关问题： 
（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，医生在取卵前通常需要注射_____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。试管婴儿技术采用了体外受精等技术，精子顶体内含有的_____________能协助精子穿过卵细胞的_____________，最终进入卵细胞内完成受精作用。
（2）通过胚胎移植技术将冷冻的“胚胎”移入朱女士子宫内，使其继续发育，胚胎移植的实质是______________________________。沉睡了12年的“冰宝宝”跟自己11岁的亲哥哥其实是“同龄”。二者性别相同的概率为_____________________。
II、2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。

（3）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个____________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA为模板，然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段核苷酸序列作____________，在____________催化作用下进行PCR扩增；最后与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为 ____________性。
（4）三亲婴儿的培育技术________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而___________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。

5 . 【一】请回答下列与微生物的分离、培养等有关的问题：
(1)某培养基的配方：KH₂PO₄、NaNO₃、MgSO₄•7H₂O、KCl、葡萄糖、H₂O。如果使用该培养基来筛选土壤中分解尿素的细菌，则应去除的成分是______，同时需要添加的成分是______。
(2)琼脂是从海藻中分离获得的多糖物质，在培养基中常常需要加入琼脂，其作用是______。
(3)如图表示的微生物分离方法称为______。图示接种需要对接种环采用______灭菌，先后灭菌______次。

(4)已知稀释倍数为10⁶（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2mL），平板上分解尿素的细菌菌落数的平均值为233，则每毫升样品中菌落数是______。
【二】下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题：

(5)过程①技术为____________________。
(6)过程②常用__________激素处理，目的是使B牛____________________。
(7)自然条件下，A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫作__________。完成受精的实质是_______________ 。
(8)方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别是____________________。

6 . （一）请回答从土壤中分离产脲酶细菌实验的有关问题。
(1)LB固体培养基：取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸馏水溶解，再加适量的__________，灭菌备用。
(2)尿素固体培养基：先将适宜浓度的尿素溶液用__________灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗__________，故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有__________指示剂的培养基中，备用。
(3)取0.1ml的10^-4、10^-5两种土壤稀释液，分别用__________法接种到LB固体全营养培养基和尿素固体培养基上，培养48h，推测固体培养基上生长的菌落数最少的是__________。
A．10^-5稀释液+尿素固体培养基                    B．10^-5稀释液+LB固体培养基
C．10^-4稀释液+尿素固体培养基                           D．10^-4稀释液+LB固体培养基
在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现__________。
(4)统计10^-4稀释液接种培养后的菌落数分别是59、57、61，则样品中菌落的数量为__________个/mL，该方法测得的数值比实际值偏低的原因：__________。（考虑实验操作原因引起的细菌数目的变化）
（二）研究人员将fat-1基因与一只公兔的冻融精子在体外结合，再通过体外显微授精方式将携带有fat-1基因的精子注入到兔的卵母细胞中获得转基因胚胎，之后移植到代孕母兔输卵管内，最终得到4只转fat-1基因兔，其体内的不饱和脂肪酸比普通兔子提高了约3倍。请回答：
(5)为了得到更多的卵细胞，需要对母兔进行__________处理，若希望同时获得多个性状相同的兔子个体，可以使用__________技术。
(6)在上述转基因实验中，将fat-1基因与动物表达载体pEF-neo连接，构建pEF-fat-1重组质粒，需要的两类酶是限制性内切核酸酶和__________。
(7)在分离和培养兔子神经干细胞的过程中，当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行___________培养以得到更多数量的细胞。有关该细胞培养过程，下列叙述错误的是__________。
A．在培养液中需要加入葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等
B．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
C．细胞培养应在CO₂培养箱中进行，CO₂的作用是刺激细胞的呼吸
D．制备动物细胞悬浮液时，先用剪刀剪碎组织再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化

7 . 回答下列（一）（二）小题
（一）生物碱是铁皮石斛的有效成分之一，应用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：

请回答：
(1)选用野生营养芽进行组织培养时，需先将材料在___________的乙醇中浸泡10分钟，再用5%次氯酸钠溶液浸泡以达到___________的目的。
(2)原球茎细胞的细胞壁_______________（厚/薄），将原球茎置于__________（A．LB培养基   B．MS培养基+NAA/6-BA=1：10   C．MS培养基+NAA/6-BA=10：1   D．MS培养基+NAA/6-BA=1：1)上可长成丛壮苗。经过炼苗的幼苗移栽到实验室外前需要洗苗，目的是洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，洗苗时用________（自来水、无菌水）。
(3)生物碱属于铁皮石斛的_____________代谢产物，除了从植株中提取，也可以通过将含有原球茎的试管放在摇床上，通过________________培养分散成单细胞，然后培养特定细胞系实现工业化生产。
（二）研究人员将fat-1基因与一只公兔的冻融精子在体外结合，再通过体外显微授精方式将携带有fat-1基因的精子注入到兔的卵母细胞中获得转基因胚胎，之后移植到代孕母兔输卵管内，最终得到4只转fat-1基因兔，其体内的不饱和脂肪酸比普通兔子提高了约3倍。请回答：
(4)为了得到更多的卵细胞，需要对母兔进行_____________处理，若希望同时获得多个性状相同的兔子个体，可以使用_____________技术。
(5)在上述转基因实验中，将fat-1基因与动物表达载体pEF-neo连接，构建pEF-fat-1重组质粒，需要的两类酶是限制性核酸内切酶和___________________。
(6)在分离和培养兔子神经干细胞的过程中，当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行________培养以得到更多数量的细胞。有关该细胞培养过程，下列叙述错误的是___________________
A．在培养液中需要加入葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等
B．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
C．细胞培养应在CO₂培养箱中进行，CO₂的作用是刺激细胞的呼吸
D．为了防止细胞的分化，在培养皿底部往往要制备一层饲养层细胞
(7)大规模养殖兔子时，尿液中大量尿素会对环境造成污染。为获取土壤中的以尿素为氮源的微生物，需要配制尿素固体培养基，尿素溶液需用______过滤。有脲酶的细菌菌落周围会出现着色的环带，因为脲酶分解尿素产生氨气，使培养基中的__________指示剂变红。

8 . 下图为通过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，回答下列问题：

（1）A细胞是__________，获得该细胞可以有两种方法。一是从已屠宰母牛的__________ 中获取。二是从活体母牛中采集，为了获得更多的A细胞，可以用______激素使供体母牛超数排卵。
（2）在进行体外受精前要对精子进行__________处理。
（3）进行胚胎分割时，应选择发育到____________________时期的胚胎进行操作。通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是___________________。
（4）奶牛胚胎干细胞可以从早期胚胎中分离获得，由于其在功能上具有_____________，因此是研究体外细胞分化的理想材料。

9 . （一）苯酚呈酸性，是工业生产排放的有毒污染物质﹐自然界中存在着降解苯酚的微生物。分离和固定化高效降解利用苯酚的细菌菌株可有效降解废水中含有的苯酚。请回答下列问题：
（1）制备培养基时为获取高效降解菌，培养目的菌株的选择培养基中应加入___作为唯一碳源。
（2）在无菌条件下，将土样加到含有适量的_________三角瓶中，振荡摇匀，获得___________，并依次稀释制备不同浓度的土壤稀释液。采用______________方法可以在培养基上获得降解菌并计数。
（3）比较不同菌株降解苯酚能力的大小可采用的方法有：
①选择苯酚含量相同的固体培养基，________________________的菌株降解能力强。
②用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一段时间后，可测定培养液的________进行比较。
（4）工业上固定苯酚高效降解菌，与固定化酶比较﹐从操作角度考虑优点有_______________，操作中往往不采用吸附法﹐而用包埋法的原因是_____________________________________。
（二）科学家研究发现，组织培养过程中易发生变异，特别是通过愈伤组织过程获得的植株变异频率更高。科学家利用这一点，对某一不具有抗盐性的野生型植株进行培养，通过组织培养技术，可筛选获得该植物的抗盐突变体。
（1）相对于植物组织培养中的_________________途径，通过愈伤组织产生的胚胎发生途径和器官发生途径形成的植株变异率高，更有利于突变体的筛选。
（2）为培育该抗盐突变体，可将已消毒的外植体在合适的培养基中进行___________________，产生肉眼可见的愈伤组织后将其放在摇床上，通过液体悬浮培养可分散成___________，这种细胞的特点是________________________________。
（3）将收集到的这种细胞在液体培养条件下，经过培养基中成分的诱导，可发生类似_________经过卵裂、分化、器官发生和形态建成而发育成胚的过程。将形成的胚状体进一步转移到加入______________________________培养基中，可筛选出抗盐突变体。
（4）植物细胞在长期培养中，培养物的胚胎发生和器官形成能力会下降的原因可能有_____________________________。

10 . （一）利用酵母菌可制作葡萄酒，下图为实验室制作葡萄酒的基本流程：

请回答下列问题：
（1）上述流程中，A为________过程，该过程中酵母菌的呼吸类型主要是需氧呼吸，B为________过程。用KMnO₄溶液浸泡葡萄的目的是________。发酵瓶中葡萄汁的装量应控制在容器的2/3以下，主要原因是发酵过程有大量________产生，会使发酵液溢出。
（2）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种，对野生酵母菌进行诱变后通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌，诱变及筛选过程如下：
步骤1：野生菌液体培养一段时间后接受紫外线照射诱变处理。
步骤2：制备选择培养基。在基本培养基的基础上，注意添加________________和调低pH值，加________后灭菌，制成固体培养基。
步骤3：将紫外线照射后的菌液________，涂布在培养基平面上。
步骤4：根据是否能在培养基上生长筛选出突变菌。
（二）根据以下叙述回答有关的问题：基因敲除是针对某个序列已知但功能未知的基因，改变其基因结构，令该基因功能丧失，从而对生物体造成影响，进而推测出该基因功能的一门技术。以下是制备基因敲除小鼠的过程示意图。

（1）为了获得目的基因，可以用________或者PCR扩增法。构建基因敲除载体时需要的工具酶有________________________________________。
（2）为了得到胚胎干细胞，可以用________消化胚胎组织中的胶原纤维和细胞外的其他成分，获得单个胚胎细胞悬浮液，然后进行原代培养和传代培养。也可以直接将胚胎组织从机体中取出后立即进行细胞、组织培养，当细胞从组织块中迁移出来，形成________并增大后，再传代培养。
（3）将囊胚移植到代孕母鼠体内后，其外表的一层扁平细胞，将来会发育为________________________________。生产出的一只嵌合体小鼠与野生型小鼠杂交后（假设子代足够多）________（填“一定”或“不一定”）能得到杂合子基因敲除小鼠。基因敲除技术具有广阔的应用前景，请举一例________________________________________________。