1 . SRY基因是哺乳动物￥染色体上具有决定雄性性别作用的基因片段。某人的性染色体组成为XX，但表现为男性体征，调查发现其1条X染色体上带有￥染色体的DNA片段。回答下列相关问题：
(1)在确定该DNA片段中是否含有SRY基因时，先从被测试者细胞中提取该DNA片段，然后和引物（根据____________设计的一段碱基序列）混合，进行PCR扩增；在PCR的延伸阶段，需加热至70~75℃，主要依据___________和防止DNA变性因素考虑。最后，用___________作为探针对扩增产物进行检测，若出现阳性反应，则___________（请“含有”→“不含有”）SRY基因。
(2)为验证该DNA片段能否决定雄性性别，将含该DNA片段的基因表达载体导入小鼠体内。一种操作方法是将目的基因导入雄原核，而不是雌原核，过程如图所示，从两者形态差异上分析，主要原因是_________。

(3)为筛选出性染色体组成为XX的小鼠胚胎，可对___________时期胚胎的滋养层细胞进行鉴别。将符合条件的早期胚胎移入代孕母鼠子宫中，胚胎移植时代孕母鼠的选择条件是___________，代孕母鼠对移入子宫的外来胚胎基本不发生___________，这为胚胎在代孕母鼠子宫内的存活提供了可能。在获得的子代小鼠中出现雄性小鼠，证明该DNA片段含SRY基因。

2 . 我国全面放开二孩政策已正式实施。一些高龄产妇希望通过试管婴儿技术圆二胎梦。请回答以下相关问题：
（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，在取卵前通常需要注射促性腺激素，而不通过服用雌激素来直接促进更多的卵泡发育，原因是________________ 。
（2）在体外受精前，医生借助超声波探测仪等工具用吸卵针从某女士卵巢中吸取卵母细胞；随后将取出的卵母细胞置于与____________中相似的环境，让它进一步发育成熟。受精过程中，精子顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵子的__________和_________，最终进入卵子内完成受精作用。
（3）胚胎的早期培养与动物细胞培养一样，都需要满足_____________、_________ 、 _________________及营养等条件。
（4）若做试管婴儿的夫妇中，妻子患有线粒体疾病(线粒体DNA缺陷），丈夫正常，则子女患病情况为__________。若要获得健康的孩子，可通过特殊的设计试管婴儿技术即“三亲婴儿”(医生要去除女性捐赠者卵子中的细胞核，接着用母亲卵细胞中对应的遗传基因取而代之，最后再按照标准的试管婴儿技术进行培育）。“三亲婴儿”的获得过程，除运用胚胎工程的技术手段外，还要特别运用_____________技术。

4 . 世界首个核移植“三亲婴儿”在美国诞生。其培养过程如图，请据图回答下列问题：

(1)在卵母细胞的获取过程中，需要对女性进行___处理，该处理的方法是给女性注射___激素。
(2)卵子与精子在发生上的重要区别是___；对采集到的精子要先经过___处理，才能用于体外受精；过程④受精完成的标志是___。
(3)为了提高已有胚胎的利用率，可采用___技术。若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意的问题是___。
(4)婴儿的遗传物质来自于___。

5 . 2016年1月1日起，新《人口与计划生育法》第十八条第一款明确规定了“国家提倡一对夫妻生育两个子女”。一些高龄产妇希望通过试管婴儿技术圆二胎梦。请回答以下相关问题：
（1）在取卵前通常需要注射______________，使其排出更多的卵子，医生借助超声波探测仪等工具用吸卵针从女性卵巢中吸取卵母细胞；并将其置于适宜条件下进一步发育
到___________期才能与获能的精子在体外受精，判断卵子是否受精的重要标志是___________________________________________。
（2）早期胚胎发育过程可分为____________________原肠胚等时期。人的胚胎可在8～16个细胞阶段移植。胚胎移植的实质是______________________________________。
（3）与“设计试管婴儿”相比，试管婴儿不需要经过______________________这一步骤。
（4）干细胞根据发生学来源分为胚胎干细胞和成体干细胞（如造血干细胞）。胚胎干细胞在功能上具有______________性。捐出一部分骨髓（造血干细胞）救治他人不会给捐献者身体健康造成损伤，原因是________________________________________________。

6 . 2015年2月3日，英国议会下院投票通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。请回答下列问题：

（1）图中“三亲婴儿”的染色体来自________和父亲提供的细胞核。
（2）过程②中防止多精入卵的屏障有___________和卵细胞膜反应。
（3）若捐献者携带红绿色盲基因，则该基因___________（“能”或“不能”)遗传给“三亲婴儿”。
（4）成熟的精子是由精子细胞变形而来， ________发育为顶体，________演变为尾，精子必须经过________才能具有受精能力，早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→__________→囊胚→原肠胚。囊胚中的__________层细胞将发育成胎膜和胎盘。

7 . 2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面作出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光或紫外光下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠，下图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程：

请根据上述材料回答下列问题：
(1)图中过程②常用的方法是___________；过程③利用的生物技术是________；在进行过程④前，利用_________技术可以获得数目更多且基因型相同的绿色荧光小鼠。
(2)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、_______、_______、___等部分。
(3)cDNA属于_______基因文库，其构建方法是：用某种生物发育的某个时期的mRNA通过______产生cDNA片段，与__________连接后储存在一个受体菌群中。
(4)PCR是一项利用DNA复制的原理在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。其基本过程是：加热至90～95℃使_________→冷却至55～60℃使________结合到互补DNA链→加热至70～75℃使________从引物起始进行互补链的合成，如此反复进行。

9 . 2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（1）图中通过过程①②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
_____
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来_____，理由是：_____。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用的方法_____。
（3）GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_____。
如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是避免器官移植发生_____反应。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：_____（用数字表示）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白

10 . 回答下列问题：
（1）干扰素是动物体内合成的一种糖蛋白，可以用于治疗病毒感染和癌症，建立乳腺生物反应器大量生产干扰素，需借助基因工程的方法，常以哺乳动物的_____为受体细胞。 为了保证干扰素基因只在乳腺细胞内表达，构建表达载体时必须在目的基因的前端加入_____。 基因工程中往往不以原核细胞为受体细胞生产干扰素是由于有活性的干扰素需要 ___________(填细胞器)的加工。
（2）干扰素体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在一70°C条件下保存半年，给广大患者带来福音。对蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现?________。原因是：__________________________________________________________。
（3）动物基因工程技术有可能使建立移植器官工厂的设想成为现实。实现这一目标的最大难题是免疫排斥。科学家正试图利用基因工程的方法对猪的器官进行改造以便获得对人无免疫排斥的可供移植的器官，所使用的方法是_________。
（4）试管婴儿技术解决了部分夫妻不育的难题或生育健康后代的要求。它和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都是以________为发育起点， 不同之处在于试管婴儿是在体外进行受 精后，在试管中进行胚胎培养；如果需要设计试管婴儿，还可以对胚胎进行________，最后选取健康的胚胎进行移植保证生出健康的孩子。