1 . 2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。身患线粒体遗传疾病的女性将因此获得更多生育选择和机会。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。

（1）人体中，线粒体存在于除___________外的人体细胞中；可采用___________法从细胞中分离出线粒体。
（2）图中细胞M是处于___________(写出具体分裂时期）的卵母细胞，卵细胞完成受精的重要标志是在卵黄膜和透明带间隙中观察到________________。
（3）广义上的线粒体病的发病机制非常复杂，可呈现常染色体显性遗传、隐性遗传或伴性遗传，也可呈现母系遗传等特点。由此分析，引起线粒体病的基因突变可发生于_____________的DNA.
（4）临床上，当一位患者的基因变异不能被确定时，完整的生化检查（代谢产物分析、酶测定、肌肉活检）可以辅助诊断。其中，乳酸和丙酮酸水平在一定程度上反映了线粒体功能。进行最小运动量测试，患者运动后10分钟血乳酸和丙酮酸仍不能恢复正常，且乳酸：丙酮酸比值会_________(高于/低于）健康人。

2 . 某女性患有输卵管阻塞，该夫妇借助“试管婴儿”技术，一次生殖过程中生出两个孩子，如图所示。请分析回答下列问题。

（1）过程X若想顺利进行，首先来自父方的精子要进行________。
（2）若借助人工手段获得这样两个胎儿，需要用到的技术手段是胚胎分割，在分割囊胚阶段的胚胎时操作过程中需要将______________。
（3）________（生物技术）是甲、乙产生的最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是_______________ 。
（4）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。

①由于女性自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射______激素，促使一次有更多的卵泡发育。
②“三亲婴儿”的染色体来自_____（填细胞名称），这种生殖方式属于____（填“有性”或“无性”）生殖。
③“三亲婴儿”的培育技术__（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。

3 . 英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。

（1）从图中可以看出“三亲婴儿”中的“三亲”的性别为_________。
A.三男                                                     B.三女
C.两男一女                                          D.两女一男
（2）图中“三亲婴儿”的性别为_________。
A.男                                                                      B.女
C.不一定                                                          D.由图中母亲决定
（3）图中的捐献者具有某致病基因X（线粒体基因），图中的母亲为色盲患者。其中“三亲婴儿”获得的致病基因为____。
A.基因X                                                B.色盲基因
C.两种均有                                          D.两种均没有
（4）“三亲婴儿”的染色体数目为__________，来自于_________个亲本。
（5）有人认为“三亲婴儿”也可能成为“四亲婴儿”，需要对另一亲本注射激素进行_______处理，为了解决成功率的问题，需要较多的软骨细胞，在培育过程中一般需要对图中的母亲和捐献者注射______激素。
（6）“三亲婴儿”的培育过程中用到的胚胎工程的技术有哪些？________________。（至少填两种）

4 . 生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面，比如：
（1）哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。如图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法。请分析回答。

①方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，使其________________，从而获得更多的卵母细胞，在体外选用特制的培养液经过早期胚胎培养至________________期，并从________________中分离、筛选出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞。
②采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。研究人员用特定方法去除细胞M中的_____原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选，所得单倍体胚胎干细胞的染色体组成与正常二倍体小鼠的基因组染色体组成相比，不同在于_____________
③下列关于干细胞的说法正确的是______
A．干细胞通过不断的再生和修复治疗多种疾病
B．成体干细胞只能分化成特定的细胞或组织
C．胚胎干细胞具有分化成多种组织细胞的潜能，也具有发育成完整个体的能力
D．造血干细胞是发现最早、研究最多、应用最为成熟的一类胚胎干细胞
（2）研究发现，小鼠单倍体干细胞存在自发二倍体化的现象。为此，可以通过测定来自胚胎干细胞的___________________分子含量或者利用显微镜观察处于有丝分裂中期细胞中的染色体数目来确定。
（3）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究____________________基因功能的理想细胞模型。

5 . 下图1表示基因型为AaBb的某二倍体动物不同细胞分裂时期的示意图；图2表示该动物细胞分裂不同时期染色体数与核DNA数比例的变化关系，请据图分析并回答问题：

(1)图1中，既含有两个染色体组又含有同源染色体的细胞有___________（填数字序号），处于图2中CD段的时期有____________（填数完序号），由D到E变化的原因是___________（填字母：A同源染色体分离；B染色体复制；C着丝点分裂；D染色体平均分配到子细胞）。
(2)在不考虑其他变异的情况下，与图1时期②细胞来自同一母细胞的另一个细胞，其产生的子细胞可能的基因型是___________

A．全为AB	B．全为aB
C．一个为AB、一个为aB	D．一个为Ab、一个为ab

(3)若将该动物的肝细胞放置到含³H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液中培养若干代，使其每条染色体均带有放射性后，再转移到普通培养液中培养两代，其产生的子细胞按其染色体的放射性的强弱分为强、较强、较弱、弱和无放射性五类，下列说法正确的是_____________。

A．放射性强和无放射性的细胞数量大致相当，约占1/16

B．放射性较弱的细胞数量最多

C．子细胞放射性强弱的根本原因是含有放射性的染色体和不含放射性的染色体发生了自由组合

D．随着培养的继续进行，前四类细胞的比例会逐渐减少，且减少的速率相等

(4)若该动物为雌性哺乳动物，则其生殖细胞需在输卵管中成熟至图1中时期___________（填序号）时，才具备受精的能力。
(5)当细胞完成了一个细胞周期后，子细胞将可能有以下三种变化类型：a继续进入下一个细胞周期；b暂停分裂，但保留分裂能力；c停止分裂，分化成具有特定功能的细胞。癌细胞、效应T细胞、记忆细胞依次属于___________、___________、___________（填字母）变化类型。

6 . 请根据体细胞核移植过程流程图，回答下面的问题：

（1）动物核移植是将动物的一个细胞的__________，移入一个已经去掉细胞核的____________中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终成为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为_______________动物。
（2）图中A细胞表示处于_______________期的_______________。
（3）图中过程①表示通过显微操作去除A细胞中的______________，
（4）图中过程②表示将_______________注入去核的A细胞中。
（5）图中过程④表示_______________。
（6）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成。
克隆牛的产生说明_____________具有全能性。克隆牛的性状主要表现__________品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成___________（填“相同”或“不同”）。

7 . 中科院动物研究所小组已培育出中国首例转基因猕猴。这一研究成果标志着中国科学家在灵长类转基因动物研究方面达到丐界领先水平。如图是转基因猕猴培育过程示意图，据图回答。

（1）过程①需要使用的酶有______。过程②中常用______技术将目的基因导入受精卵。
（2）如果过程⑤在体外进行，那么卵母细胞需要培养到______期，精子需要获能。受精过程中______两者发生的生理反应阻止了多精入卵的发生。
（3）图中过程⑦称为______，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理发化相同，此前需对代孕雌猴做______处理。
（4）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可采用胚胎分割技术，在对囊胚阶段的胚胎分割时，要注意______。

8 . 研究人员利用小鼠(2N＝40)的单倍体ES细胞(只含一个染色体组)，成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如下图所示：

注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶，箭头指向的位置为限制酶的切割位置，Amp^r是氨苄青霉素抗性基因，Neo^r是G418抗性基因。
（1）重组质粒上的抗生素抗性基因可作为________，其作用是有利于筛选出含有目的基因的细胞。氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neo^r的小鼠细胞，结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是________(选填图中的编号)，图中③处的培养液应添加________________(填氨苄青霉素或G418 )。
（2）若图中过程①选用的2种限制酶识别序列和切割位置分别是和，则经这两种限制酶切割后所产生的黏性末端是______。此时，图中过程②应选用______(填E·coli DNA连接酶或T₄DNA连接酶)。
（3）据图分析，细胞乙内除线粒体DNA外，还有________个DNA分子；细胞乙发育成桑葚胚的过程中细胞分裂方式是____________，将细胞乙培养成桑椹胚的技术称为________技术，该胚胎中每个细胞的体积变化是_______。
（4）下列关于质粒运载体的说法正确的是________。
A．没有限制酶就无法使用质粒运载体
B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞
C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则
E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达

9 . MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是GAAT↓TAATTC、C↓TGCAG、G↓AATTC，如图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切点。图3表示利用基因工程生产胰岛素的三种途径。图4表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。请据图回答问题。

（1）若要用如图1和图2中的质粒和外源DNA构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。在构建新的限制酶切位点的过程中需要使用哪些工具酶___________________。
（2）图3中催化过程①的DNA连接酶的作用是促使形成_________________，导入受体细胞B常用方法_______________，④过程也可以培养到______________，再从培养液中提取。导入受体细胞C首先使用Ca²⁺处理使其吸收周围的DNA分子，之后将细胞C与图中M溶于_____________________中，完成转化过程。
（3）获得动物1的受体细胞通常是受精卵，哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程中，注射促性腺激素后还需_______________的诱导下才能完成。动物2体内各体细胞的基因种类________________。上述动物的获得均需运用_________________________技术。
（4）干细胞科技发展至今，已进入以脐带、胎盘等组织为主要干细胞来源的全新时代。目前国内干细胞临床研究超过半数采用脐带或胎盘干细胞。胎盘干细胞由囊胚的________________细胞发育而来，利用胎盘干细胞具有发育全能性的特点，所以临床上可以用于__________________，从而挽救器官衰竭的患者的生命。

10 . 人类疾病的转基因生物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠（2N）制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示（注：基因B为高血压相关基因）。

（1）在上述转基因大鼠的培育过程中，涉及的现代生物技术有____________（写出两项即可）。
（2）获得目的基因B的方法可以是化学方法人工合成，或是从____________获取，还可以用PCR技术扩增目的基因，PCR扩增的原理是____________，在扩增过程中，除需要游离的脱氧核苷酸，模板外，还需要的条件为________________________。
（3）子代大鼠如果检测到相应____________和出现____________，即可分别在分子水平和个体水平上，说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（4）进行①过程的卵母细胞已经处于____________期，受精过程中，防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和____________。过程⑤通常选择去核卵母细胞做受体细胞的原因除了卵母细胞体积大、易操作，营养物质丰富外，还因为它____________。
（5）将早期胚胎移植到代孕鼠体内时，代孕鼠对移入子宫的重组胚胎基本上不发生____________，这为重组胚胎在代孕母鼠体内的存活提供了可能。
（6）在构建的B基因的表达载体中，高血压相关基因的首端必须有____________，它是____________识别和结合部位，重组表达载体中标记基因的作用是____________。