24. 利用转基因的工程菌生产药用蛋白,近些年在我国制药行业中异军突起。图1是基因工程常用的一种质粒;图2是利用该质粒构建的一种基因表达载体。各限制酶质粒上分别只有一处识别序列,将质粒和重组质粒用相应的限制酶酶切后,得到的DNA片段长度如表中数据。请回答下列问题:
| 质粒 | 重组质粒 |
BglⅡ | 6.0kb | 6.0kb |
ClaⅠ | 6.0kb | 2.3kb,4.8kb |
PstⅠ | 6.0kb | 1.5kb,5.6kb |
(1)在基因工程中作为载体的质粒应具备的基本条件有
_________(至少答出2点),而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有
_________。
(2)为了获得更多的目的基因,可用PCR扩增,PCR的原理是
_________。PCR反应体系中加入dNTP后,这些物质作用有
_________。
(3)PCR中通常会得到不同的DNA产物,常采用
_________法鉴定,不同DNA片段因
_________等不同,在电场中的迁移速率也不同,因而可以形成不同条带。
(4)已知质粒被切除的片段长度为0.5kb,则与质粒结合的目的基因长度为
_________kb。质粒上ClaI与PstI区域之间的长度为2.4kb(如图1所示),结合图2分析,目的基因上ClaI、PstI两种限制酶的切割位点分别为
_________(在a、b两点中选填)。
(5)培养受体菌时,在培养基中应加入适量的
_________,可以将导入重组质粒和普通质粒的受体菌都筛选出来。