回答下列(一)(二)小题:
(一)某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌,并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定,以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方,其中溴甲酚绿遇酸变黄。
请回答下列问题:
(1)配制该培养基,除表中的成分外还需添加2g的______ ;添加碳酸钙除了方便观察是否产酸,还可以产生CO2,以维持培养基______ 的恒定。
(2)初步筛选:应用____________ 方法进行分离,挑选出______ 的菌落作为初筛菌,再分别挑取其中形态大小各不相同的菌落进行菌种纯化;最终获得若干个不同的菌种用于后续测定。
(3)生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定:光电比色法可用于细菌细胞密度的测定,OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比,通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。在无菌条件下将不同菌种分别接种至MRS—NaNO2的培养基中,37℃厌氧培养24h。再将菌液______ ,测定OD600值,OD600值相对较小的菌株生长能力______ 。并通过测定发酵前后亚硝酸盐的含量,可以计算出______ 。
(二)面对新冠疫情,最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测,原理为实时荧光定量PCR(RT—PCR)检测法,技术流程如下图所示,①②③表示相关步骤。请回答:
(4)PCR技术与DNA体内复制过程相比,两者的复制方式都是____________ 。RT—PCR过程中,需先以RNA为模板合成cDNA,故装置中需添加______ 酶。
(5)过程①中,RNA提取裂解液可同时灭活病毒,原因是______ 。采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理,其目的是____________ 。步骤③需要的酶是______ ,引物F和引物R是根据______ 序列合成的。
(6)在进行新冠病毒核酸检测时,通常以病毒的ORFlab基因为检测的目标基因,是因为ORF1ab基因具有______ 的特点。检测试剂中还加有“阳性对照”和“阴性对照”,阴性对照的主要作用是____________ .
(一)某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌,并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定,以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方,其中溴甲酚绿遇酸变黄。
水 | 牛肉膏 | 蛋白胨 | 酵母膏 | 番茄汁 | 葡萄糖 | 吐温 | 碳酸钙 | 溴甲酚绿 |
100mL | 1g | 1g | 1g | 20g | 1g | 0.05mL | 1.7g | 0.01g |
请回答下列问题:
(1)配制该培养基,除表中的成分外还需添加2g的
(2)初步筛选:应用
(3)生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定:光电比色法可用于细菌细胞密度的测定,OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比,通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。在无菌条件下将不同菌种分别接种至MRS—NaNO2的培养基中,37℃厌氧培养24h。再将菌液
(二)面对新冠疫情,最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测,原理为实时荧光定量PCR(RT—PCR)检测法,技术流程如下图所示,①②③表示相关步骤。请回答:
(4)PCR技术与DNA体内复制过程相比,两者的复制方式都是
(5)过程①中,RNA提取裂解液可同时灭活病毒,原因是
(6)在进行新冠病毒核酸检测时,通常以病毒的ORFlab基因为检测的目标基因,是因为ORF1ab基因具有
更新时间:2022-10-02 20:27:34
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【推荐1】 重组人胰岛素是世界上第一个基因工程药物, 它的使用造福了亿万糖尿病患者。兴趣小组探究工程菌的构建, 实验所用质粒载体如下图所示, 其中 LacZ 基因的表达产物能将无色反应物 X-gal水解, 从而使菌落呈蓝色,否则菌落呈现白色;Ampr基因的表达产物分泌到细胞外发挥作用。本实验所用的受体大肠杆菌无 LacZ 基因。
(1)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: 一般先用__________ 处理细胞,使细胞处于_____ 的生理状态,然后再将重组的基因表达载体导入其中。
(2)双重筛选培养基: 培养基中加入__________ 用以监选出导入了质粒载体的受体菌 (转化子), 培养基中加入__________ 用以鉴别出含重组质粒的受体菌 (重组子)。重组子的菌落颜色是__________ ,原因是__________ (答出 1 点即可)。
(3)某些重组子不能合成胰岛素, 可能的原因是__________ (答出1 点即可)。
(4)长时间培养后, 培养基中转化子形成的菌落周围出现了一些非转化子形成的较小菌落, 这些非转化子菌落形成的原因是__________________________ 。
(5)若从个体水平鉴定受体菌合成的人胰岛素是否具有生物学活性, 则实验组的操作是__________________________ 。
(1)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: 一般先用
(2)双重筛选培养基: 培养基中加入
(3)某些重组子不能合成胰岛素, 可能的原因是
(4)长时间培养后, 培养基中转化子形成的菌落周围出现了一些非转化子形成的较小菌落, 这些非转化子菌落形成的原因是
(5)若从个体水平鉴定受体菌合成的人胰岛素是否具有生物学活性, 则实验组的操作是
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【推荐2】分析下面两个材料,回答相关问题。
材料一:为探究经巴氏消毒后的牛奶中细菌种类及数量与放置时间的关系,某同学按如下流程来检测经巴氏消毒后的牛奶放置在室温下12~24h后,牛奶中细菌的种类及数量。请回答下列问题:
(1)由图示可知,该同学配制的培养基类型为_____ (填“固体”或“液体”)培养基,图中A过程常采用的方法是_____ 。
(2)在相同且适宜的环境条件下培养一定时间后,检测细菌种类及数量的指标依次是_____ ,该实验中对细菌数量的统计结果往往偏低,原因是_____ 。
(3)若将所培养的细菌菌种稀释105倍,进行分离纯化计数,接种方法是_____ 。在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液,适宜条件下培养一段时间后,若培养基上的菌落数分别为:23、67、144、142、135,则每升菌液中细菌数量为_____ 个。
材料二:新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂)。请回答下列问题:
(4)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基。熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为_____ 外,还应加入水、氮源、无机盐和琼脂等。
(5)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此取样时一般要_____ 。在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂,目的菌的作用可使目的菌菌落周围出现透明圈,应当选择透明圈直径与菌落直径比值_____ (填“大”或“小”)的菌落作为目的菌群,接种于液体培养基中再进行扩大培养。
材料一:为探究经巴氏消毒后的牛奶中细菌种类及数量与放置时间的关系,某同学按如下流程来检测经巴氏消毒后的牛奶放置在室温下12~24h后,牛奶中细菌的种类及数量。请回答下列问题:
(1)由图示可知,该同学配制的培养基类型为
(2)在相同且适宜的环境条件下培养一定时间后,检测细菌种类及数量的指标依次是
(3)若将所培养的细菌菌种稀释105倍,进行分离纯化计数,接种方法是
材料二:新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂)。请回答下列问题:
(4)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基。熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为
(5)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此取样时一般要
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【推荐3】在白酒发酵的窖池中,培养液的pH≤4.5后,酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制,甚至停止发酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力,适宜作白酒发酵生产用菌种,为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌,研究者进行实验。
(1)酵母菌的代谢类型是_________________________________ 。在发酵过程中,窖池中培养液的pH会逐渐下降,原因是______________________________________________________________________________ 。
(2)取适量窖底泥、酒糟和黄浆水,分别溶于10mL无菌水中,再各取1m上清液接入10mL麦芽汁培养基中置于___________ (有氧/无氧)条件下培养,48小时后分别用_____________ (平板划线法/稀释涂布平板法)接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上计数统计,培养结果见下表:
注:“+"”越多表示菌体长得越好数量越多,“-”表示几乎不生长
(3)在pH≤3.5的环境下,仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长,这些耐酸性酵母菌是菌株发生_____________ 和环境选择共同作用形成的。
(4)为了进一步纯化适于生产的菌种,应从pH为_____________ (范围)的培养基中获得菌种,并接种到_____________ (固体/液体)培养基上进行培养。
(5)实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株,特点如下表:
依据菌株特点,研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株,作出这一判断的理由是______________________________________________________________________________ 。
(1)酵母菌的代谢类型是
(2)取适量窖底泥、酒糟和黄浆水,分别溶于10mL无菌水中,再各取1m上清液接入10mL麦芽汁培养基中置于
注:“+"”越多表示菌体长得越好数量越多,“-”表示几乎不生长
(3)在pH≤3.5的环境下,仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长,这些耐酸性酵母菌是菌株发生
(4)为了进一步纯化适于生产的菌种,应从pH为
(5)实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株,特点如下表:
依据菌株特点,研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株,作出这一判断的理由是
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【推荐1】如下表所示为培养某种微生物的培养基的配方,请回答:
(1)依物理性质,该培养基属于__________ 培养基。
(2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用类型是_________ 。
(3)该培养基中的碳源是__________ 。
(4)不论何种培养基,在配好之后倒平板之前都要先进行的是_________ ;倒平板时,一般需冷却至________ 左右,并在___________________ 操作。
(5)若用该培养基培养分解尿素的细菌,应除去物质____________ ,并加入物质________
成分 | NaNO3 | K2HPO4 | MgSO4·7H2O | FeSO4 | (CH2O) | 琼脂 | H2O |
含量 | 3g | 1.5g | 0.5g | 0.01g | 30g | 10g | 1000ml |
(1)依物理性质,该培养基属于
(2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用类型是
(3)该培养基中的碳源是
(4)不论何种培养基,在配好之后倒平板之前都要先进行的是
(5)若用该培养基培养分解尿素的细菌,应除去物质
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【推荐2】戴口罩、勤洗手是预防常见传染病的有效措施。为衡量某免洗洗手凝胶的清洗效果,研究人员检测了用该凝胶洗手前后,手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。回答下列问题:
(1)在进行实验前需要配制培养基,配制培养基通常包括计算、称量、溶解、调pH、灭菌等环节,其中调pH的过程_____________ (填“需要”或“不需要”)在酒精灯火焰旁进行。为检验培养基灭菌是否彻底,可_________ 。
(2)为统计洗手前手部细菌的数量,应选择的接种方法是_____ (填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”);除该方法外,还可使用显微镜计数法计数,但后者所得数据往往比前者_____ 。
(3)根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低,为了提高实验结果的可信度,请给出你的建议:_ 。
(4)培养一段时间后可根据_____ (至少填两项)等菌落特征初步判断培养基上细菌的类型。为了计算凝胶洗手前手部单位面积的细菌数量,除上图所给的信息外,还需要知道______________ 。
(1)在进行实验前需要配制培养基,配制培养基通常包括计算、称量、溶解、调pH、灭菌等环节,其中调pH的过程
(2)为统计洗手前手部细菌的数量,应选择的接种方法是
(3)根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低,为了提高实验结果的可信度,请给出你的建议:
(4)培养一段时间后可根据
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【推荐3】人参皂苷是人参中的主要活性成分,应用广泛,它是白色结晶粉末,化学性质稳定,沸点极高(大于300℃),可溶于甲醇、乙醇,易溶于水。我国科学家将相关酶的基因转入酵母菌,获得了能大量产生人参皂苷的工程酵母菌。回答下列问题∶
(1)酵母菌的新陈代谢类型为_____ 。
(2)利用工程酵母菌生产人参皂苷前,需对其进行分离纯化,下图是微生物接种最常用的两种方法。首先制备固体培养基,在灭菌__ (填“前”或“后”)要调节pH。利用无菌操作接种平板A时,需要火焰灼烧接种工具____ 次。平板B进行接种时的工具是__ ,此工具灭菌方法是__ 。为了检验培养基灭菌是否彻底,一般做法是_____ 。
(3)根据以上特点,直接从人参中提取人参皂苷可使用_____ (填“蒸馏”“压榨”或“萃取”)法,不选择其他两种方法的原因是___ 。
(1)酵母菌的新陈代谢类型为
(2)利用工程酵母菌生产人参皂苷前,需对其进行分离纯化,下图是微生物接种最常用的两种方法。首先制备固体培养基,在灭菌
(3)根据以上特点,直接从人参中提取人参皂苷可使用
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【推荐1】柑普茶是用新会特有的小青柑与云南普洱茶经过特定工序制作的再加工茶类。柑普茶的发酵过程中由于酵母菌、黑曲霉等微生物的作用,形成其甘甜、醇滑的风味,柑普茶中的茶多酚具有降血脂和降血糖等良好功效。
(1)小青柑的果皮可用来提取精油,最好采用的是___________ 法;柑普茶中的茶多酚易溶于有机溶剂,可通过___________ 法从茶叶中分离。
(2)为了研究酵母菌与柑普茶独特风味的关系,将柑普茶样剪碎研磨后称取1g,加入9ml无菌水制备稀释10倍的茶叶水,再进一步梯度稀释,依次获得102-104倍的稀释茶叶水。梯度稀释的目的是_____________________________________________________ 。在对应104的溶液中取0.1ml接种到5个选择培养基上,培养一段时间后,统计出平板上的菌落数分别为12、36、40、42和46,则每克柑普茶中的酵母菌数量约为______ 个。
(3)为研究柑普茶与降脂药液X在降脂效果方面是否存在差异,科研人员利用大鼠进行实验,实验方案如下表:
①表格中a、b的操作分别是:a:___________ ,b___________ 。
②若实验结论为柑普茶降脂效果好于降脂药液X,则得出此结论的依据是___________ 。
(1)小青柑的果皮可用来提取精油,最好采用的是
(2)为了研究酵母菌与柑普茶独特风味的关系,将柑普茶样剪碎研磨后称取1g,加入9ml无菌水制备稀释10倍的茶叶水,再进一步梯度稀释,依次获得102-104倍的稀释茶叶水。梯度稀释的目的是
(3)为研究柑普茶与降脂药液X在降脂效果方面是否存在差异,科研人员利用大鼠进行实验,实验方案如下表:
实验前 | 喂食 | 实验后 | |
对照组1 | 测量大鼠体重 | 基础饲料 | 测量大鼠体重 |
对照组2 | a | ||
对照组3 | b | ||
实验组 | 高脂饲料+柑普茶水 |
①表格中a、b的操作分别是:a:
②若实验结论为柑普茶降脂效果好于降脂药液X,则得出此结论的依据是
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【推荐2】检验水中的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施,某学习小组为了调查某河流的水质情况,测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作,请回答下列有关的问题:
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,一般需要配制含有____ 、水、无机盐的固体培养基,在划线时,接种环通过______ 灭菌。划线的某个平板培养后,第一划线区域都不间断地长满了菌,第二区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成划线无菌落可能的操作失误有①_____________ ;②________________ 。
(2)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布平板时,滴加到培养基表面的稀释液量不宜过多的原因是_______________ 。将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.2mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为62、64和66。据此可得出每升水样中的活菌数为______ 。
(3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的________ 的含量,同时可以使菌体与培养液充分接触,提高________ 的利用率。
(1)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,一般需要配制含有
(2)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布平板时,滴加到培养基表面的稀释液量不宜过多的原因是
(3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液的
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【推荐3】酸奶由牛奶经过发酵制成,口味酸甜细滑,营养丰富,深受人们喜爱,利用酸奶机可居家自制酸奶。分析并回答下列问题:
(1)有位同学周末利用酸奶机在家自制酸奶,从微生物培养角度看,酸奶机相当于恒温培养箱,鲜奶相当于________________ ,鲜奶中加入酸奶相当于________________ 。
(2)为检测某品牌酸奶中该微生物的数量,检验人员进行了下图所示的实验。
①为防止杂菌污染,需要对锥形瓶进何种灭菌方法?____________________ 。
②图中接种微生物的方法为________________ ,用该方法统计样本菌落数时,至少需要同时做A、B、C三个培养皿,目的是________________ 。实验检测时,若各取0.1mL已稀释104倍的酸奶分别接种到图示A、B、C培养基上培养,记录的菌落数分别为45、51、54,则每毫升酸奶样品中的目的菌数为________________ 个。
(1)有位同学周末利用酸奶机在家自制酸奶,从微生物培养角度看,酸奶机相当于恒温培养箱,鲜奶相当于
(2)为检测某品牌酸奶中该微生物的数量,检验人员进行了下图所示的实验。
①为防止杂菌污染,需要对锥形瓶进何种灭菌方法?
②图中接种微生物的方法为
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【推荐1】在盐碱地种植的作物会受胁迫产生过量的有害物质H2O2,PIP2s为某种水通道蛋白,其磷酸化水平影响H2O2的跨膜运输。我国的科研团队首次发现了植物细胞中AT1基因编码的AT1蛋白可以调节作物的耐碱性表型,其机理如图一所示。图二表示通过“PCR替换个别核苷酸获得突变基因”的定点突变技术,且个别核苷酸差异不影响引物与模板链的结合。回答下列问题:(1)盐碱环境可引起大多数作物细胞内液渗透压_______ ,吸水能力_______ 。图一中植物细胞中AT1基因编码的AT1蛋白可以调节作物的耐碱性表型,其机理为______ 。
(2)通过PCR替换个别核苷酸诱导AT1基因突变时,引物_______ 中含有特定的突变,为防止引物相互杂交,需要设计两个反应体系,分别加入引物对_____ 、______ 用于合成PCR产物1和PCR产物2;然后将PCR产物1和2加入无引物的PCR反应体系得到含有点突变的目的基因。再用引物对________ 扩增目的基因,得到大量的点突变目的基因。
(3)为了使扩增的目的基因两侧能被某种限制酶酶切形成黏性末端,对引物1和引物4的要求是_____ 。
(4)若将点突变目的基因导入棉花细胞,我国科学家自己独创的方法是______ 。要检测是否成功表达,可以从转基因生物个体中提取蛋白质,用相应的抗体进行_______ 杂交。
(2)通过PCR替换个别核苷酸诱导AT1基因突变时,引物
(3)为了使扩增的目的基因两侧能被某种限制酶酶切形成黏性末端,对引物1和引物4的要求是
(4)若将点突变目的基因导入棉花细胞,我国科学家自己独创的方法是
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【推荐2】甜柿鲜果肉中含有微量元素、维生素和β-胡萝卜素等多种成分,营养价值高。甜柿的涩味程度与乙醛代谢关键酶基因(PDC)的表达情况密切相关。已知启动子区域存在着许多调控蛋白的结合位点,RNA聚合酶和调控蛋白共同影响基因的表达水平。AD基因表达出的AD蛋白与启动子足够靠近时,能够激活后续基因转录,据此可利用与AD蛋白形成的融合蛋白来筛选待测蛋白(如图丙)。为筛选PDC基因的调控蛋白,科研人员用质粒A(如图甲)与质粒G(如图乙)进行实验,请回答下列问题:____________ (填“5'”或“3'”)端。
(2)PDC基因的启动子序列未知,为获得大量该基因启动子所在片段,可将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的____________ (填“上”或“下”)游,根据___________ ,设计引物进行PCR扩增,对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳时,由于DNA分子因含磷酸基团而带负电,凝胶加样孔应靠近电泳槽____________ (填“正极”或“负极”)接口。
(3)利用质粒A构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入不能合成尿嘧啶的酵母菌,用____________ 的培养基筛选成功转化的酵母菌Y1H;将从甜柿中提取的RNA逆转录形成的各种cDNA分别与质粒G连接后导入酵母菌,此时应选择质粒G中的位点______________ (填序号1~5)作为其插入位点,最终获得携带不同cDNA片段的酵母菌群Y187。
(4)重组酵母菌YIH分别与携带不同cDNA片段的酵母菌Y187进行接合生殖,形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。将接合子接种在_________ 中,观察菌落生长情况能判断其含有的待测蛋白是否为PDC基因的调控蛋白。
(1)启动子是一段驱动基因转录的DNA片段,位于转录模板链的
(2)PDC基因的启动子序列未知,为获得大量该基因启动子所在片段,可将已知序列信息的接头片段连接在PDC基因的
(3)利用质粒A构建含有PDC基因启动子片段的重组质粒并导入不能合成尿嘧啶的酵母菌,用
(4)重组酵母菌YIH分别与携带不同cDNA片段的酵母菌Y187进行接合生殖,形成的接合子含有两种酵母菌质粒上的所有基因。将接合子接种在
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【推荐3】抗菌肽是一类具有广谱抗菌、抗病毒等功能的小分子多肽,细菌不易对其产生耐药性且无残留等,被认为是理想的抗生素替代品。为了突破抗菌肽在畜禽养殖业广泛应用的瓶颈,我国研究人员运用小分子泛素蛋白(SUMO)融合技术将含有重组抗菌肽LLv基因的质粒导入大肠杆菌,表达融合蛋白SUMO-LLv,并优化了表达条件,从而能高效获得重组抗菌肽 LLv。所用质粒含有卡那霉素抗性基因(KanR)、LacZ基因及SacⅠ、XhoⅠ酶切位点等,其结构和构建重组质粒的过程如图1所示。据此分析回答以下问题:注:LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色;否则菌落为白色。
(1)扩增LLv基因时,PCR反应体系中含有的酶有_____________ ;已知该基因序列不含图1中限制酶的识别序列,为了使其能与已被酶切的质粒连接,需根据__________ 设计引物。
(2)LLv基因以a链为转录模板链,转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。该基因内部没有SacⅠ、XhoⅠ这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是_____________ 。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌时,需用CaCl2处理大肠杆菌,其目的是__________________ 。
(4)为了将成功导入重组质粒的大肠杆菌筛选出来,甲同学在添加了卡那霉素、X-gal等成分的培养基中进行接种,结果如图2,该同学采用的接种方法是______________ 。图2中出现的_____ 菌落即成功导入重组质粒的大肠杆菌菌落,判断的理由是________________ 。
(1)扩增LLv基因时,PCR反应体系中含有的酶有
(2)LLv基因以a链为转录模板链,转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。该基因内部没有SacⅠ、XhoⅠ这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是
(3)将重组质粒导入大肠杆菌时,需用CaCl2处理大肠杆菌,其目的是
(4)为了将成功导入重组质粒的大肠杆菌筛选出来,甲同学在添加了卡那霉素、X-gal等成分的培养基中进行接种,结果如图2,该同学采用的接种方法是
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