组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 发酵工程 > 微生物的培养与应用 > 微生物的实验室培养 > 培养基的类型及其应用
题型:非选择题-解答题组 难度:0.65 引用次数:466 题号:16691077
回答下列(一)(二)小题:
(一)某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌,并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定,以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方,其中溴甲酚绿遇酸变黄。
牛肉膏蛋白胨酵母膏番茄汁葡萄糖吐温碳酸钙溴甲酚绿
100mL1g1g1g20g1g0.05mL1.7g0.01g

请回答下列问题:
(1)配制该培养基,除表中的成分外还需添加2g的______;添加碳酸钙除了方便观察是否产酸,还可以产生CO2,以维持培养基______的恒定。
(2)初步筛选:应用____________方法进行分离,挑选出______的菌落作为初筛菌,再分别挑取其中形态大小各不相同的菌落进行菌种纯化;最终获得若干个不同的菌种用于后续测定。
(3)生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定:光电比色法可用于细菌细胞密度的测定,OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正比,通常用于细菌细胞密度(OD600)测量。在无菌条件下将不同菌种分别接种至MRS—NaNO2的培养基中,37℃厌氧培养24h。再将菌液______,测定OD600值,OD600值相对较小的菌株生长能力______。并通过测定发酵前后亚硝酸盐的含量,可以计算出______
(二)面对新冠疫情,最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测,原理为实时荧光定量PCR(RT—PCR)检测法,技术流程如下图所示,①②③表示相关步骤。请回答:

(4)PCR技术与DNA体内复制过程相比,两者的复制方式都是____________。RT—PCR过程中,需先以RNA为模板合成cDNA,故装置中需添加______酶。
(5)过程①中,RNA提取裂解液可同时灭活病毒,原因是______。采集到的样本要迅速进行病毒灭活处理,其目的是____________。步骤③需要的酶是______,引物F和引物R是根据______序列合成的。
(6)在进行新冠病毒核酸检测时,通常以病毒的ORFlab基因为检测的目标基因,是因为ORF1ab基因具有______的特点。检测试剂中还加有“阳性对照”和“阴性对照”,阴性对照的主要作用是____________.

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【推荐1】 重组人胰岛素是世界上第一个基因工程药物, 它的使用造福了亿万糖尿病患者。兴趣小组探究工程菌的构建, 实验所用质粒载体如下图所示, 其中 LacZ 基因的表达产物能将无色反应物 X-gal水解, 从而使菌落呈蓝色,否则菌落呈现白色;Ampr基因的表达产物分泌到细胞外发挥作用。本实验所用的受体大肠杆菌无 LacZ 基因。

(1)大肠杆菌细胞最常用的转化方法是: 一般先用__________处理细胞,使细胞处于_____的生理状态,然后再将重组的基因表达载体导入其中。
(2)双重筛选培养基: 培养基中加入__________用以监选出导入了质粒载体的受体菌 (转化子), 培养基中加入__________用以鉴别出含重组质粒的受体菌 (重组子)。重组子的菌落颜色是__________,原因是__________(答出 1 点即可)。
(3)某些重组子不能合成胰岛素, 可能的原因是__________(答出1 点即可)。
(4)长时间培养后, 培养基中转化子形成的菌落周围出现了一些非转化子形成的较小菌落, 这些非转化子菌落形成的原因是__________________________
(5)若从个体水平鉴定受体菌合成的人胰岛素是否具有生物学活性, 则实验组的操作是__________________________
2023-02-17更新 | 588次组卷
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【推荐2】分析下面两个材料,回答相关问题。
材料一:为探究经巴氏消毒后的牛奶中细菌种类及数量与放置时间的关系,某同学按如下流程来检测经巴氏消毒后的牛奶放置在室温下12~24h后,牛奶中细菌的种类及数量。请回答下列问题:

(1)由图示可知,该同学配制的培养基类型为_____(填“固体”或“液体”)培养基,图中A过程常采用的方法是_____
(2)在相同且适宜的环境条件下培养一定时间后,检测细菌种类及数量的指标依次是_____,该实验中对细菌数量的统计结果往往偏低,原因是_____
(3)若将所培养的细菌菌种稀释105倍,进行分离纯化计数,接种方法是_____。在五个固体培养基上分别接种0.1mL该菌菌液,适宜条件下培养一段时间后,若培养基上的菌落数分别为:23、67、144、142、135,则每升菌液中细菌数量为_____个。
材料二:新冠肺炎疫情警示人们要养成良好的生活习惯,提高公共卫生安全意识,戴口罩可以减少病原微生物通过飞沫在人与人之间的传播。为加快废弃口罩的处理,避免污染环境,某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩(熔喷布)的细菌(不分解琼脂)。请回答下列问题:
(4)培养基的配置和灭菌:根据目标微生物的特性,配置相应的培养基。熔喷布主要成分为聚丙烯纤维(PP,组成仅含有C、H两种元素),用于筛选的固体培养基除需加入经过处理的聚丙烯粉末作为_____外,还应加入水、氮源、无机盐和琼脂等。
(5)目的菌的获取、选择、扩大培养:目的细菌大多分布在距地表约5cm~10cm的潮湿土壤层, 因此取样时一般要_____。在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂,目的菌的作用可使目的菌菌落周围出现透明圈,应当选择透明圈直径与菌落直径比值_____(填“大”或“小”)的菌落作为目的菌群,接种于液体培养基中再进行扩大培养。
2023-06-29更新 | 86次组卷
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【推荐3】在白酒发酵的窖池中,培养液的pH≤4.5后,酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制,甚至停止发酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力,适宜作白酒发酵生产用菌种,为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌,研究者进行实验。
(1)酵母菌的代谢类型是_________________________________。在发酵过程中,窖池中培养液的pH会逐渐下降,原因是______________________________________________________________________________
(2)取适量窖底泥、酒糟和黄浆水,分别溶于10mL无菌水中,再各取1m上清液接入10mL麦芽汁培养基中置于___________(有氧/无氧)条件下培养,48小时后分别用_____________(平板划线法/稀释涂布平板法)接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上计数统计,培养结果见下表:

注:“+"”越多表示菌体长得越好数量越多,“-”表示几乎不生长
(3)在pH≤3.5的环境下,仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长,这些耐酸性酵母菌是菌株发生_____________和环境选择共同作用形成的。
(4)为了进一步纯化适于生产的菌种,应从pH为_____________(范围)的培养基中获得菌种,并接种到_____________(固体/液体)培养基上进行培养。
(5)实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株,特点如下表:

依据菌株特点,研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株,作出这一判断的理由是______________________________________________________________________________
2019-07-11更新 | 93次组卷
共计 平均难度:一般