【推荐1】乙烯可以促进香蕉果实成熟，在此过程中，会发生一系列的变化：果肉逐渐变甜，果皮由青色变为黄色，果实逐渐变软，产生特殊的香味。关于乙烯催熟的原理，农科院的研究员展开了一系列研究。
(1)香蕉成熟过程中口味逐渐变甜，其原因是淀粉酶催化淀粉水解为可溶性糖，部分糖积累在果实的______（填细胞器名称）中使果实变甜。另外部分糖参与有氧呼吸，最终在线粒体中______（填反应物）反应生成二氧化碳。
(2)测定香蕉成熟过程中淀粉水解酶D和乙烯响应蛋白H表达量，结果如图1。

   

由图可知，香蕉成熟过程中乙烯的作用是_________。
(3)某研究员进一步研究推测，H基因的表达产物H蛋白与D基因的启动子结合，是促使D基因转录的必要条件，从而催化淀粉水解。研究者利用图2所示重组载体1、重组载体2和亮氨酸缺陷型酵母细胞设计如下实验，证明以上推测。

   

①构建重组载体需要用到的酶有______。
②先将载体1导入亮氨酸缺陷型酵母细胞，可通过______生物技术筛选出重组酵母1。
③再将载体2导入重组酵母1，用____________的选择培养基筛选出重组酵母2。
A含亮氨酸，不含金弹子素       
B.不含亮氨酸，含金弹子素
C.不含亮氨酸，不含金弹子素       
D.含亮氨酸，不含金弹子素

【推荐2】为探究不同配方的洗手液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果，某实验小组将金黄色葡萄球菌接种到蛋白胨培养基上，接着用滤纸片蘸取不同配方的洗手液放置在该平板上。培养一段时间后，结果如下图1；科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选农田土壤能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如图2所示实验流程；为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图3所示。关于微生物培养和应用的相关表述，下列说法错误的是(      )

（1）蛋白胨可为金黄色葡萄球菌提供碳源、氮源、维生素
（2）蛋白胨培养基为金黄色葡萄球菌的选择性培养基
（3）本实验中接种金黄色葡萄球菌的方法为稀释涂布平板法
（4）甲配的洗手液对金黄色葡萄球菌抑菌效果好
（5）图2驯化培养基A中加入的物质X是敌敌畏，其诱导微生物产生高耐受或能降解敌敌畏的变异，以达到驯化目的
（6）图2驯化后的微生物常利用接种环挑取菌液在培养基B上连续划线分离获得单菌落，划线接种过程中需对接种环进行5次灼烧
（7）可以通过检测以敌敌畏为唯一碳源的图2培养基C中敌敌畏的剩余量，筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物再进行纯培养
（8）用稀释涂布平板法来统计菌落数，能测得图2培养基C中活菌数的原因是平板上的一个菌落就是由一个活菌繁殖形成
（9）平板涂布时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布
（10）空白平板使用前需进行无菌鉴定，接种后未长出菌落的平板可以直接丢弃
（11）采用稀释涂布平板计数时，统计结果往往多于原始菌液中微生物数量
（12）利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
（13）土壤中的细菌，绝大多数分布在距离地表约3～8cm的土壤中，取样时一般铲去表层土
（14）测定土壤中细菌的数量，一般选用10²、10³、10⁴倍数的稀释液进行平板培养
（15）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌
（16）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
（17）微生物在液体培养基中生长时，可形成肉眼可见的菌落
（18）各种微生物培养基都含有的营养物质包括水、糖类、脂肪、蛋白质和无机盐
（19）培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
（20）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤依次是计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
（21）湿热灭菌后的培养基需冷却至室温再倒平板，避免高温杀死菌种
（22）筛选可分解尿素的菌种时，培养基中还需加入适量的碳源
（23）实验室分离纯化菌种一般使用液体培养基或半固体培养基
（24）图3采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
（25）培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色
（26）图3实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
（27）可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌

【推荐3】枯草芽孢杆菌是畜禽养殖中常用的益生菌之一，能产生多种酶和抑菌物质，常用作饲料添加剂。研究人员欲从高产奶牛瘤胃液中筛选出能够高效产酶及抑菌的菌株，结果如下表。

菌株编号	产酶活性（U/mL）			抑菌圈直径（mm）
	纤维素酶	蛋白酶	淀粉酶	大肠杆菌	金黄色葡萄球菌	伤寒沙门氏菌
AX1-3	12.67	11.82	293.55	11.06	/	14.11
BX1-10	5.53	1.34	156.21	/	14.33	22.00
BX1-12	27.33	137.54	1450.53	13.62	23.21	25.97

注：“/”表示无抑菌圈
回答下列问题。
(1)将培养皿等玻璃器皿放入______________内灭菌，培养基常采用_____________法进行灭菌，蛋白胨可以为菌株提供____________________等营养物质，在提供以上营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对_________________的要求。
(2)在饲料中添加枯草芽孢杆菌的目的是：一方面_____________﹔另一方面能够抑制病原菌生长，提高畜禽的抵抗力。
(3)用不含菌株的培养液进行抑菌试验时，制备多个分别涂布了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌的平板，在每个平板上打4个8mm的小孔，并向4个小孔中分别加入等量的去除AX1-3菌株的培养液、____________。（答出另外3个）
(4)据表分析，编号为___________的菌株更符合筛选要求，依据是___________。

【推荐1】β-1，3葡聚糖酶可以水解许多病原真菌细胞壁外层的β-1，3葡聚糖和几丁质，降解真菌细胞壁，从而抑制真菌的生长与繁殖。研究人员在植物中克隆到β-1，3葡聚糖酶基因（BG2）并转入苹果主栽品种，以减少苹果真菌病害、实现无公害生产。回答下列问题：

(1)BG2的克隆可利用PCR技术，该过程需要一对特异性引物，引物是指____________。在体外对目的基因进行大量复制后，常采用_____________来鉴定产物。
(2)上图为利用PATC940（由农杆菌Ti质粒改造获得）构建BG2抗病质粒的过程。图中右下处的酶为____________，人工设计的复合启动子的作用是____________。XbaI酶切后片段与SpeI酶切后的片段能进行连接的原因是_____________。
(3)构建BG2抗病质粒完成后，首先BG2重组抗病质粒导入农杆菌，该过程中需要用CaCl₂处理农杆菌，目的是_____________。研究人员将转入BG2抗病质粒的农杆菌与苹果外植体共培养，以进行遗传转化。目的基因BG2将随着T-DNA转移到被侵染的细胞而进入细胞，并随其整合到____________上。
(4)在完成遗传转化后，需要不断观察和检测转基因苹果植株在田间的生长状态，以确定目的基因是否赋予了苹果植株____________。

【推荐2】花青素属于生物类黄酮物质，有清除自由基、抗氧化和抗突变的作用。科研人员将拟南芥的MYB12基因（能促进类黄酮生物合成）转入番茄体内，培育出了果实含有花青素而呈紫色的番茄新品种。某种质粒和含MYB12基因的DNA片段如图所示，箭头表示限制酶及其切割位点。回答下列问题:

(1)将MYB12基因导入受体细胞前，利用PCR技术进行扩增。在PCR扩增仪中要加入缓冲液、目的基因、_________（答出2点）等。若在PCR扩增仪中加入模板DNA分子2个，经过30次循环后，则DNA分子数量将达到______个。
(2)据图分析，为了将MYB12基因正确插入图示质粒中，应选取限制酶_______分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。不选取其他两种限制酶的原因是_____。
(3)番茄是双子叶植物，常用____________法将目的基因导人受体细胞，Ti质粒上的______能整合到受体细胞的染色体DNA上。
(4)为了鉴别受体细胞中是否含有MYB12基因，可用含_____（填“氨苄青霉素”、“卡那霉素”、“四环素”或“链霉素”）的培养基进行初步筛选。待转基因番茄结果后，也可以通过观察______来确认是否成功获得了转MYB12基因番茄新品种。

【推荐3】人乳铁蛋白（hLF）对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如图。图中AseI、NheI、SalI、BamHI代表相关限制酶切点，neo^r为新霉素抗性基因，BLG基因为B乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。
   
(1)过程①所需要的酶是______，该过程不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR，原因是_______。
(2)为便于hLF基因插入pEB质粒中，需在引物的_______端添加______两种限制酶的识别序列。
(3)若利用PCR技术扩增某基因片段时消耗了62个引物分子，则该过程扩增了_____次。过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是______。
(4)将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞中_____，以便筛选出转染成功的细胞。

【推荐1】人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：

（1）过程①代表的是________。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用_______和_________两种工具酶。
（3）过程③采用的实验技术是_____________________，获得的X是___________。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的______所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行
_______________________比较；或用图中的_______进行特异性结合检测。
（5）若B淋巴细胞改为B细胞能达到预期的效果吗？__________原因是 ___________________。
（6）该病毒抗体最终可以从_______和_________中提取。
（7）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用___________。

【推荐3】2020年诺贝尔化学奖授予两位在CRISPR-Cas9基因编辑方面做出了突出贡献的女科学家。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称，Cas9指的CRISPR相关蛋白9，是进行DNA切割的酶的名宇。CRISPR-Cas9具有切割他类型细胞中DNA序列的潜力，可对生物的DNA序列进行修剪、切断、替换或添加。它作为基因组“编辑器”在全球数千个实验室中得到广泛应用。下图是某实验室将编辑好的人胰岛素基因入大肠杆菌时所用的载体质粒。请回答问题：

（1）研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，推测该系统在细菌细胞内的作用是________________。
（2）Cas9在基因编辑过程中所起的作用是________，编辑后的基因应该插入甲载体的位点________，甲载体中的荧光素酶基因的作用是________________。
（3）在基因工程过程中可利用PCR技术对编辑后的目的基因进行大量扩增，它利用的是________的原理，扩增时通常需要在引物的________端添加相应的酶切位点，经过n轮扩增，理论上至少需要的引物数量为________________。