【推荐1】【生物——选修3:现代生物科技专题】MagaininmⅡ是非洲爪蟾皮肤分泌的一种抗菌肽,能对细菌、真菌、肿瘤细胞等产生明显的抑制效果。科学工作者通过基因工程技术获得能表达该种抗菌肽的大肠杆菌。请回答下列问题：
(1)和抗体相比,抗菌肽的抗菌作用具有________________特点。
(2)依据抗菌肽氨基酸序列人工设计合成的 MagaininmⅡ基因能在大肠杆菌细胞中表达出相同抗菌效果的抗菌肽，其原因是 _______________。
(3)可用PCR技术对人工合成的 MagaininmⅡ基因进行扩增。请完成下表，比较细胞内DNA复制和PCR扩增DNA的异同：

	DNA复制	PCR扩增DNA技术
1	解旋酶解旋	①_________
2	DNA聚合酶	②_________
3	边解旋边复制	先解旋后复制
4	半保留复制	半保留复制

(4)下图为某质粒的示意图,若目的基因插入b位点，则导入重组质粒的受体菌在含氨苄青霉素的培养基上能增殖,同时在____________。
目的基因在受体菌中表达，还需要在目的基因首端具有________________。

【推荐2】水蛭素是一种小分子蛋白质，对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现的最强凝血酶天然特异抑制剂，在心脑血栓疾病治疗中均有显著作用。天然水蛭素主要从医用水蛭的唾液腺中分离出来，产量有限，因此利用基因工程制备重组水蛭素成为抗血栓治疗的研究热点之一。基因工程中所用的质粒图谱如下图。Sac Ⅰ、Hind Ⅲ和BamH I为三种限制性内切核酸酶，（图中限制酶的识别序列和切割后的黏性末端均不同）回答下列问题：

(1)获取目的基因：从________细胞中获取mRNA。已知水蛭素基因的α链为转录的模板链，在设计用于cDNA扩增的特异性引物时，需要在引物______（A/B/C/D）的______端添加BamH I识别序列和强启动子序列。
(2)构建重组质粒：对质粒选择用BamH I、Hind Ⅲ 限制酶进行酶切，与目的基因构建重组DNA分子，目的基因和质粒可以“拼接”成功的原因是_____________。用Sac Ⅰ酶切构建后的重组DNA,经凝胶电泳确定重组DNA 的片段长度，电泳过程中观察到_________________，关闭电泳仪电源。
(3)导入大肠杆菌；为提高大肠杆菌的转化效率，可将大肠杆菌放于低温、_____________（“高”或“低”）浓度的CaCl₂溶液中，可使细胞膨胀通透性增加，制备成_____________，促进重组质粒的转入。
(4)筛选与检测：将大肠杆菌培养在添加_____________的LB固体培养基上，可筛选得到转入重组质粒的大肠杆菌。还可以用_____________技术更加精准地鉴定大肠杆菌细胞中是否转入了水蛭素基因。
(5)生产：在规模化的发酵生产中，需监控发酵过程的营养供给、_____________(写2点)等变化。采用低温（4℃）离心、萃取方法分离和提纯水蛭素，低温处理的目的是_____________，其理由是_____________
(6)通过上述方法生产的水蛭素的抗凝血活性低于天然野生型水蛭素，可通过大引物PCR定点诱变改良基因。需要进行两轮PCR（PCR1和PCR2）见下图。在PCR1中，至少需要经过___个循环才能获得图中所示大引物。在PCR2中，若要获得带有突变位点的改良基因，则应选择的引物是___（填“①”或“②”）。

【推荐3】盐分是限制植物生长发育的重要因素之一。科研人员尝试利用獐茅液泡膜Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（AINHX基因）培育转基因耐盐马铃薯。
（1）通常从獐茅的__________中获取AINHX基因用以构建基因表达载体，构建基因表达载体过程中必须使用的工具酶是_______________________________。
（2）为保证目的基因在马铃薯根细胞中能够正常表达，运载体上应含有特定的_________________。
（3）马铃薯的转化过程常用农杆菌转化法，这种方法是利用了农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有__________________的特点。
（4）为探究目的基因整合到马铃薯基因组是否转录，可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成_______________，再利用PCR方法进行基因扩增，基因扩增时需要先根据__________________________合成引物。若对基因扩增n代，则共需消耗____________对引物。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明______________________。
（5）为证明转基因马铃薯获得了耐盐性，将生长至4叶期的转基因幼苗转入___________________培养液中培养，30天后观察植株生长状况。

【推荐1】番木瓜是一种优质热带水果，在我国有“岭南佳果”之美誉。但番木瓜容易受番木瓜环斑病毒（PRSV）的侵袭，导致产量大大下降。科研人员将PRSV的衣壳蛋白基因导入番木瓜，培育出转基因番木瓜。据此回答下列问题：
(1)PRSV的衣壳蛋白基因可以在番木瓜细胞中表达出相应蛋白，是因为______。
(2)可利用PCR技术大量扩增PRSV的衣壳蛋白基因，该技术需要的基本条件有温度控制、引物、______、______，其中，引物是指______；PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg²⁺，Mg²⁺的作用是______。
(3)欲从个体生物学水平检测PRSV的衣壳蛋白基因是否赋予了番木瓜相应的特性，最有效的方法是______。
(4)科研人员在一株野生型番木瓜中提取到一种抗PRSV的蛋白M，利用相关技术使蛋白M的某个氨基酸发生改变，提高了蛋白M抗PRSV的性能，该技术属于______。

【推荐2】科学家从大量木乃伊中获得少量木乃伊DNA，进行克隆，复制了2400年前的DNA。兴趣小组同学模拟了其中部分研究过程，设计了如下实验（MspⅠ、BamⅢ、MboⅠ、SmaⅠ为4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG，如图所示）。请回答以下问题：

(1)从解旋过程进行分析，PCR扩增木乃伊基因与体内DNA复制过程不相同的地方是_____（答出两点）。
(2)若将图乙中质粒和图甲中木乃伊基因通过同种限制酶处理后，构建重组质粒，应选用的限制酶是____________，选择理由是__________。
(3)经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，最可能的原因是______。
(4)据图丙分析，培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A、B还应分别含有_____________。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是__________菌落中的细菌。

【推荐3】土壤盐渍化影响水稻生长发育。将水稻耐盐碱基因 OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育耐盐碱水稻新品种，其操作流程及可能用到的限制酶如图，其中bar为抗除草剂基因，Tet^r为四环素抗性基因，Amp^r为氨苄青霉素抗性基因，①~⑦表示操作过程。

限制酶	BamHⅠ	BclⅠ	SmaⅠ	Sau3AⅠ
识别位点及切割位点	-G↓GATCC-	-T ↓GATCA-	-CCC↓GGG-	-↓GATC-

(1)过程①PCR扩增 OsMYB56需要添加引物，应选用的引物组合为_____

A．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TCTGTTGAAT-3′

B．5′-CTTGGATGAT-3′和5′-TAAGTTGTCT -3′

C．5′-ATTCAACAGA -3′和5′-ATCATCCAAG-3′

D．5′-ATTCAACAGA-3′和5′-GAACCTACTA-3′

(2)根据基因表达载体的结构组成分析，Ti质粒中的CaMV35S是_______。其功能是______。
(3)过程③应选用______切割质粒，利用所选限制酶进行操作的优势是________。切割后需要用________进行连接才能获得重组质粒。
(4)为了筛选出含重组质粒的受体细胞，应在添加________的选择培养基上培养。培养后获得的菌落不能判定是否含有重组质粒，原因是_______。

【推荐1】水稻的雄性不育植株是野生型水稻的隐性突变体（正常基因M突变为m）。雄性不育植株不能产生可育花粉，但能产生正常雌配子。
(1)水稻的花为两性花，自花授粉并结种子。在杂交育种时，雄性不育植株的优点是无需进行_____________，大大减轻了杂交操作的工作量。
(2)我国科研人员将紧密连接的，且不与其它基因发生交换的三个基因M、P和R（P是与花粉代谢有关的基因，R为红色荧光蛋白基因）成功转入雄性不育水稻植株的一条染色体DNA中，获得转基因植株，如下图所示。

向雄性不育植株转入M基因的目的是让转基因植株_____________。转基因植株自交后代中，雄性不育植株为_____________荧光植株，由无荧光植株和红色荧光植株的性状分离比为_____________，分析P基因的功能是_____________。
(3)雄性不育植株不能通过自交将雄性不育的特性传递给它的子代，而育种工作者构建出的转基因植株的特点是_______________________________________。

【推荐2】抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种人体血浆蛋白，临床上作为药物主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因绵羊生产抗凝血酶Ⅲ蛋白药物的流程图。请回答：

(1)在过程①构建的基因表达载体中，为实现抗凝血酶Ⅲ基因能在转基因绵羊的乳腺细胞中表达，应让该基因与__________的启动子等调控组件结合在一起，转基因绵羊进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产抗凝血酶Ⅲ蛋白。过程④中采用的最为有效的技术是____________。
(2)过程⑤涉及到的动物细胞工程技术是_________。选用MII中期的卵母细胞作为受体细胞，对受体细胞作去核处理的目的是______________。
(3)过程⑥早期胚胎培养过程中，培养液成分除了糖类、氨基酸、无机盐、维生素等营养物质外，通常还需要加入_________________等一些天然成分。过程⑦移植后的胚胎在受体子宫存活的生理学基础是___________。

【推荐1】埃博拉病毒（EBoV）衣壳外有包膜，包膜上有多种棘突蛋白，其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞识别。如图为制备抗埃博拉病毒单克隆抗体的过程。回答下列问题：
   
(1)制备抗埃博拉病毒单克隆抗体过程中需要用灭活的EBoV对小鼠进行多次注射的目的是__________。
(2)细胞融合的原理是___________。通常将获得的杂交瘤细胞放置于__________的混合气体的CO₂培养箱中进行培养。
(3)单克隆抗体制备过程中要经过两次筛选。第一次筛选出杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进，经多次筛选后可获得足够数量的单克隆抗体。筛选后进行___________。杂交瘤细胞具备的特点是___________。
(4)体外培养杂交瘤细胞的培养液中营养物质种类要齐全，比例要合适，此外为补充细胞生长所需的未知营养物质还需要添加________等一些天然成分。获得的单克隆抗体最终可以从_________或___________中提取。
(5)为克服鼠源性单抗的异源性反应，科研人员通过人工改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，获得了嵌合抗体。该嵌合抗体的研制属于________工程科技范畴。

【推荐2】2018年7月，某生物公司的百白破疫苗检验不符合规定。为生产高效价疫苗和简化计划免疫程序，科学家研制出基因工程乙肝-百白破(rHB-DTP)四联疫苗，经各项检测均通过rHB-DTP四联疫苗制检规程的要求。其有效成分是乙肝病毒表面抗原、百日咳杆菌、白喉杆菌和破伤风杆菌的四种类毒素。请分析回答下列问题：
(1)为获取百日咳杆菌类毒素的基因，可从百日咳杆菌的细胞中提取对应____________，在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段，获得的cDNA片段与百日咳杆菌中该基因碱基序列__________________(填“相同”或“不同”)。
(2)由于乙肝病毒表面抗原的基因序列比较小，且序列已知，获得目的基因可采用__________，然后通过____________大量扩增，此技术的前提是已知一段目的基因的核苷酸序列以便合成引物。
(3)把目的基因导受体细胞时，科学家采用了改造后的腺病毒作为载体，写出你认为科学家选它的理由________________________________________________。(写出2点)
(4)研究发现，如果将白喉杆菌类毒素20位和24位的氨基酸改变为半胱氨酸，免疫效果更好，请写出此种技术的基本流程____________________________________。
(5)实验证明，一定时间内间隔注射该疫苗3次效果更好，其主要原因是体内产生的_________数量增多，当同种抗原再次侵入人体时二次免疫的特点是____________，免疫预防作用更强。

【推荐3】为增加油葵种子中的含油量，科学家尝试将花生中的酶A基因导入油葵细胞，获得转基因油葵新品种。
（1）为获取目的基因，可从花生细胞中提取______________，经逆转录形成____________。以此为模板通过_____________扩增目的基因。
（2）构建重组DNA分子需用载体，常见的载体有____________；构建好的载体一般都包括以下几个部分：启动子、目的基因和__________________
（3）剪取油葵的叶片放入浸染液中，一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。最后经过___________培育成转基因油葵植株，此种技术的原理是___________________。
（4）研究发现，如果将该酶A的20位和24位氨基酸变为半胱氨酸其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程对酶A进行改造，所需步骤有：蛋白质的结构和功能分析→_______→________→将改造后的酶A基因导入受体细胞→获得所需的蛋白质。
（5）经过种植转基因油葵发现，虽然转基因油葵种子中含油量上升，但是抗灰霉菌的能力丢失，其原因是_______。