1 . 高等植物中的乙烯生物合成受到发育阶段和环境的共同调节，其中乙烯合成酶在这一过程中起到至关重要的作用。拟南芥乙烯合成酶相关基因主要有两种：AtACS4和AtACSS为研究以上基因表达水平与发育阶段的关系，科学家将AtACS4和AtACS5的基因分别和GUS报告基因融合，并转入拟南芥。图1为使用的载体图谱，kan'为卡那霉素抗性基因，Amp'为氨苄青霉素抗性基因。据此回答下列问题：

	幼嫩根	幼嫩叶	成熟根	成熟叶
AtACS4		艹	++	++++
AtACS5	+	++++	++	++

注：+越多，表示GUS基因产物经染色后颜色越深
(1)目的基因的克隆：根据AtACS4和AtACS5序列信息，设计引物对目的基因PCR扩增，对扩增产物进行电泳。制备凝胶时选择合适的梳子来制备样品孔，插入齿梳的时间应在琼脂糖凝固_____(“前”或“后”)。电泳过程中，凝胶点样孔端应靠近电泳槽___极接口，电泳完成后切胶回收DNA，测序验证。
(2)构建重组DNA分子：测序后可知所得条带确为实验所需条带且无突变。为使目的基因正确插入载体相应位置，设计引物时，在目的基因两端分别引入___________两种限制酶的识别序列。用____________酶处理PCR所得的DNA片段与空载体(未插入目的基因的载体)，可获得重组DNA 分子。
(3)将重组DNA 导入农杆菌：用氯化钙处理后的农杆菌，_____发生了变化，成为感受态细胞。低温下将农杆菌与重组DNA混匀，使外源DNA粘附与受体细胞表面，最后短暂热刺激，使外源 DNA 进入受体细胞。将受体菌接种在_____(“含”或“不含”)抗生素的培养液中，慢速培养一段时间，使细胞恢复回正常状态，并表达相关基因。两小时后，再将农杆菌溶液涂布于添加了___________的LB平板进行筛选。
(4)农杆菌转化拟南芥：将转基因农杆菌与消毒处理拟南芥叶片共同培养，共同培养后的拟南芥叶片转入含氨苄青霉素的固体培养基，进行多次______培养，主要目的是除去农杆菌和筛选转化的植物细胞。若培养基中氨苄青霉素浓度太低，可能会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行_____________检测。经过发芽和生根培养后的组培苗，在移栽大田前需进行炼苗，炼苗的作用是____________。
(5)拟南芥乙烯合成酶的表达特点：使用GUS染液染色后，具GUS基因表达产物的部位会现蓝色，用肉眼可看到，且一定程度下染色深浅可反映出GUS基因的表达水平。使用GUS染液对不同发育阶段的两种转基因拟南芥进行染色。AtACS₄和AtACS₅的启动子和GUS报告基因融合后进行转化、染色后获得的实验结果如上表，可以推测______启动子在幼嫩植铢的叶片中表达量更高，AtACS₄在根中的表达情况是_______________________。

2 . 蝇为是昆虫纲双翅目的一种小型蝇类，体长3～4mm，是常用的遗传学研究材料。果蝇的长刚毛和短刚毛是由一对等位基因（B、b）控制的，等位基因（D、d）会影响长刚毛的分叉。研究人员用长刚毛雌果蝇与短刚毛雄果蝇作为亲本进行杂交，全为短刚毛，雌雄随机交配，所得表型及数量见下表。回答下列有关问题。

	长刚毛	短刚毛	分叉刚毛
雄性个体（只）	49	301	51
雌性个体（只）	101	298	0

(1)根据相关数据分析可知，B/b和D/d这两对等位基因位于___（填“一对”或“两对”）同源染色体上，理由是___。
(2)亲本中雌性个体的基因型为___，中表型为短刚毛的雄性个体的基因型有___种。
(3)研究人员现从中选出了一只长刚毛雌性果蝇，欲确定其基因型，请从中选择材料，设计实验来判断该长刚毛雌性果蝇的基因型。（请写出实验思路和预期实验结果）
实验思路：___。
预期结果：___。

3 . 绿色植物通过光合作用将水和合成有机物，实现了将光能转化成化学能并进行储存。光照是绿色植物进行光合作用必不可少的条件，请回答下列有关问题。
(1)植物缺会导致植物出现黄化症状，这说明了无机盐具有___的作用。
(2)研究表明，光照过强会抑制植物的光合作用。强光最先损伤植株顶端的幼叶，导致其光合速率降低，并可能引起植物死亡。科研人员以拟南芥为材料研究幼叶应对强光影响的机制。
①clh基因编码降解叶绿素的C酶，科研人员利用强光照射野生型拟南芥（WT）和clh基因缺失突变体（clh）的幼叶，并统计幼叶存活率，结果见表。由表可知C酶可___（填“提高”或“降低”）幼叶存活率。

光照时间/h 存活率/% 叶片种类	0	24	48	72	96
WT	100	100	85	48	0
Clh	100	88	60	22	0

②检测强光处理不同时长下WT和clh突变体叶片的光合作用强度（如图），说明C酶的作用在强光条件下被激活，并且主要在幼叶中发挥作用，得出这一推论的依据是___。

进一步检测显示clh基因在幼叶中___（填“高”或“低”）表达，为上述推论补充了证据。
③D1蛋白可与叶绿素分子结合形成PSⅡ的核心结构，但D1极易受到光损伤。高等植物的叶绿体存在PSⅡ修复循环途径，该途径首先降解受损的D1，fh酶是直接降解D1的酶，再以新合成的D1替代原有D1，从而恢复PSⅡ的活性。后续实验证明，强光处理时，C酶通过降解结合在D1上的叶绿素，促进fh酶对D1的降解，进而加速PSⅡ的修复循环。结合上述系列研究，阐明强光下植物体中幼叶的光保护机制：___。

4 . 某二倍体植物宽叶（M）对窄叶（m）为显性，红花（R）对白花（r）为显性。m、r的位置如图 1所示。一批纯种窄叶白花植株经诱导产生了如图 2 甲、乙、丙所示的突变。现有一株由纯种宽叶红花诱导得到的突变体，其体细胞内发生的变异与 M 无关，且为图 2 甲、乙、丙所示变异类型中的一种，其他同源染色体数目及结构正常。现只有甲、乙、丙植株可供选择，请设计一代杂交实验确定该宽叶红花突变体的变异类型是图示甲、乙、丙类型中的哪一种。（注：各型配子活力相同，控制某一性状的基因都缺失时，幼胚死亡）

(1)图2甲、乙、丙所示的变异类型依是________、______、______（请具体表述）。
(2)实验步骤：①用该突变体与_______（填“甲”或“乙”或“丙”）植株杂交。②观察、统计后代表现型及比例。
(3)结果预测：I、若宽叶红花与宽叶白花植株的比为_______，则该宽叶红花突变体为图 2甲所示变异类型II、若宽叶红花与宽叶白花植株的比为_____，则该宽叶红花突变体为图 2乙所示变异类型Ⅲ、若宽叶红花与窄叶白花植株的比为_______，则该宽叶红花突变体为图 2 丙所示变异类型

7 . 转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　）

A．将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗

B．Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖

C．促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官

D．Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达

9 . 电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段，以下为单克隆抗体制备流程图：

   

(1)若该图中的单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则图中特定抗原通常是________。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为________________________（答两点）。
(2)图中诱导细胞融合时需要采用________诱导法、聚乙二醇融合法或物理法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是___________________。
(3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行______和_______，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)在动物细胞原代培养过程中，悬液中分散的细胞很快就贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为_______。当细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为________。在体外培养杂交瘤细胞时，瓶壁上形成的细胞层数是________（单层/多层）。
(5)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示：

丁酸钠的浓度（mmo1/L）	时间（h）
	48	96	144
0	1∶320	1∶640	1∶1200
0.25	1∶320	1∶1280	1∶2500
0.5	1∶160	1∶2500	1∶2500
0.75	1∶320	1∶320	1∶640

注：表中比值表示抗体效价，比值越高表明越有利于抗体的产生。
该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO₂的培养箱中培养，CO₂的主要作用是______，该实验的自变量为___________。