1 . 动物器官的体外培养技术对研究器官的生理、病理过程及其机制的意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图，请回答下列问题。

   

(1)体外培养肝脏小块要满足的条件：适宜的温度、pH、渗透压、气体环境、营养和____________。
(2)气室中充入5%CO₂的主要作用是____________。
(3)有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用如图所示装置和下列提供的材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具：肝脏小块、外周血淋巴细胞、淋巴细胞培养液、植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂)； 显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、滴管；吉姆萨染液(使染色体着色)、有机物 X 溶液等。 实验过程：
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。
②利用甲、乙、丙、丁4组装置(与上图相同)，按下表所示步骤操作(“ √ ”表示已完成步骤)

操作步骤	甲	乙	丙	丁
步骤一：加入肝脏培养液	√	√	√	√
步骤二：加入有机物 X 溶液	√		√
步骤三：放置肝脏小块	√

表中还需进行的操作是____________。
③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中并 继续培养淋巴细胞。

④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察____________，并对比分析。

若只有丙组淋巴细胞出现异常，甲组的淋巴细胞正常，则说明____________。

2 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）苹果醋是一种酸性发酵健身饮料，含有丰富的维生素、无机盐、氨基酸和有机酸类，风味独特，深受广大消费者欢迎。在苹果醋生产中，醋酸菌的性能对产品质量、发酵效率有很大影响。研究者为了从醋酸菌中选出优势高产的菌种，做了相关实验，部分实验结果如下所示。醋酸菌因产生醋酸溶解了培养基中的碳酸钙，而使菌落周围产生透明圈。回答下列问题：

菌株编号	透明圈直径（mm）	菌落直径（mm）
A1	3.5	1.5
A2	1.5	0.9
A3	7.2	1.8
A4	6.5	3.2

(1)菌株培养过程中需要对各种用具进行消毒，置于超净台上的用具可利用___________照射30分钟。
(2)依据菌落的______________（答出2点）等特征筛选出四株可能是优势高产的菌株（A₁、A₂、A₃和A₄），并采用___________________法来进一步纯化这些菌株。筛选的菌株接种于斜面培养基后，置于______________中临时保存。根据表中实验结果，可以选取______菌株用于生产。
(3)用筛选出的高产醋酸菌制作苹果醋，最终苹果酸和醋酸等总酸浓度不再增加，其原因可能是_______________________________________________________。（答出2点）
(4)在苹果醋工业生产过程中，除考虑上述条件外，还需温度、pH和______________等外界因素。
（二）如图为利用转基因小鼠获得人源性抗体的两种途径。回答下列问题：
   
(5)人体内抗体种类繁多，且抗体基因在细胞内一般成簇存在。获取人抗体基因可从_________细胞中提取出相应mRNA为模板，通过逆转录合成；或通过设计引物，利用__________技术获得。
(6)途径一利用胚胎干细胞作为受体细胞，原因是胚胎干细胞具有_______________特点。为让抗体基因只在嵌合鼠乳汁中表达，可将抗体基因与小鼠乳清酸性蛋白基因的________________部位结合，构建出乳腺特异性表达载体。
(7)途径二将小鼠抗体基因剔除的目的是______，获得的抗体比途径一的抗体具有_____优点。

3 . 在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，A、B、C、D四个小组分别选择不同材料进行实验，表中①～⑥表示不同的操作，请分析回答：

组别	材料选择	提取核物质	纯化DNA	鉴定DNA
A	鸡血	①
B	洋葱	②
C	猪血	③
D	猪肝	④	⑤	⑥

（1）实验材料选择错误的组别是____________，其原因是________________。鸡血是理想的实验材料，理由是__________________。
（2）简要说明①操作的基本过程：___________________。
（3）下列是⑤操作的两个方案，请分析其原理。
方案一：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10~15min。原因：___________________________。
方案二：将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10~15min，注意严格控制温度范围。原因：________________________
（4）⑥过程需要用到的试剂是______________________________。

4 . 淀粉酶在食品加工及轻工业生产中具有广泛用途。研究人员从细菌中克隆了一种淀粉酶基因，为了获得高产淀粉酶菌株，按下图所示流程进行基因工程操作。

（1）将淀粉酶基因与质粒载体重组时需要使用的酶包括_________ 。
（2）大肠杆菌经过_________ 处理后，可作为重组载体的宿主（感受态）细胞使用。
（3）为了初步筛选高产菌株，研究人员将得到的3个工程菌株接种到以淀粉为唯一碳源的培养基上，经过培养后用稀碘液处理，可观察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落为中心的透明圈。测量不同菌株形成的菌落及透明圈直径，结果见下表。

工程菌	菌落直径（C，mm）	透明圈直径（H，mm）	H/C
菌株Ⅰ	8.1	13.0	1.6
菌株Ⅱ	5.1	11.2	2.2
菌株Ⅲ	9.5	17.1	1.8

①表中菌落直径（C）的大小反映了__________，透明圈直径（H）的大小反映了_____________。
②根据表中数据，可推断其中淀粉酶产量最高的菌株是_______ 。
（4）基因工程技术已成功应用于人类生产生活中的诸多方面。请从植物育种或人类疾病预防与治疗方面举一实例，并说明制备该转基因产品的基本技术流程。（限100字以内）___________________

5 . 泡菜传统自然发酵方式的发酵周期相对较长，生产效率低。研究人员欲从泡菜中分离筛选出高产酸乳酸菌，为泡菜工厂化生产提供依据。请分析并回答下列问题：
(1)配制CaCO₃—MRS培养基。成分：蛋白陈、牛肉膏、酵母粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、琼脂粉、碳酸钙等。
①根据物理性质分类，该培养基属于______培养基，为乳酸菌种提供氮源的成分是______；
②培养过程中，乳酸菌产生乳酸溶解碳酸钙，形成溶钙圈，便于______。
(2)高产乳酸菌的培养与分离。其部分实验目的与具体操作如下所示，请完成下表。

实验目的	简要操作过程
梯度稀释	在无菌条件下取样品中泡菜汁1mL，加入①______进行10倍梯度稀释，依次得到10-5、10-6、10-7的稀释液。
接种培养	取上述稀释液1mL分别加入无菌培养皿中，然后将CaCO3—MRS培养基浇注混匀冷凝后，将培养皿②______，并连续培养48h。
分离纯化	挑取③______进行平板划线培养。
长期保存	将菌种加入30%的甘油中在-20℃保存

(3)高产酸乳酸菌的鉴定。提取筛选乳酸菌的DNA，通常采用16SrDNA（编码rRNA对应的DNA序列）的通用引物进行PCR扩增并测序鉴定。以16SrDNA作为细菌分类依据的原因是不同菌属的16SrDNA具有______。
(4)高产酸乳酸菌发酵效果检测。研究人员研究了两种高产酸乳酸菌（乳酸菌A50f7和A50b9）在发酵泡菜过程中pH的变化，结果如下图所示。据图分析，该研究实验的自变量是______，可以看出，接种两种乳酸菌效果相近，其相近之处表现为均能快速降低______，且接种量越大作用效果越明显。

   

6 . 钙可以影响生物膜的结构和功能，在植物抵御逆境的过程中具有重要作用。下表为喷钙处理、干旱处理、干旱并喷钙处理对植物叶片光合作用影响的实验结果，气孔导度表示叶片气孔的开放程度。请回答下列问题：

观测指标 处理	表观（净） 光合速率/[μmol·（m2·s）－1]	气孔导度/[mmol·（m2·s）－1]	细胞间隙CO2浓度/ （μmol·mol－1）	蒸腾速率/ [mmol· （m2·s）－1]
对照	7.65	219.07	127.27	4.17
喷钙	9.26	263.40	123.73	4.31
干旱	4.53	156.93	111.93	3.56
干旱并喷钙	8.31	281.93	119.20	5.09

(1)钙是生物体必需的________（填“大量”或“微量”）元素。


(2)该实验的自变量为_____________，干旱处理导致叶片表观（净）光合速率下降的原因是_______。
(3)细胞间隙CO₂浓度除与气孔导度有关外，还受________________（用表格中的观测指标作答）影响，表观（净）光合速率与气孔导度____________（填“完全”或“不完全”）呈正相关。
(4)由表可知，喷钙处理可________（填“加剧”或“缓解”）因干旱导致的气孔导度下降，从而________叶片表观（净）光合速率，推测钙具有________（填“稳定”或“抑制”）生物膜的作用，提高了植物抵御逆境的能力。

7 . 为了研究不同“层次”血清对细胞增殖的影响，科研人员做了以下实验：将分离出的牛血清装入专用血清瓶后放入冰箱中直立静置一段时间。取三根刻度吸管，将血清从上到下轻轻吸成均等的三份，分别装入消毒后的瓶中，标记为上、中、下，再分别从三个瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均匀备用。分别取等量的不同”层次”的血清和混合血清加入新配制的动物细胞培养液中，再接种小鼠上皮细胞（接种细胞密度为个），在适宜条件下培养72h后，进行计数，结果如下表。请回答：

组别	上	中	下	混
72h细胞数/个

（1）细胞培养过程中，的主要作用是______________，每天更换培养基的目的是________________________。
（2）如果用血细胞计数板计数细胞时进行如下图所示的操作，统计出来的数据比实际值偏_________。正确的操作方法应该是_____________________。

（3）从表中结果可以看出，不同“层次”的血清对细胞增殖的影响不同。造成这种结果的主要原因是不同“层次”血清中____________。
（4）根据实验结果，在动物细胞培养过程中，正确使用血清的方法是____________。

8 . 下表是某微生物培养基的成分及含量，请据此回答下列问题：

编号	成份	含量
①	粉状硫	10g
②		0.4g
③		4.0g
④		9.25g
⑤		0.5g
⑥		0.5g
⑦

（1）上表培养基可培养的微生物类型是______________________。
（2）若除去成分②，加入（），该培养基可用于培养___________。
（3）表中营养成分共有___________类。
（4）使用后的培养基在丢弃前，要进行的是___________。
（5）上表中各成分含量确定的原则是______________________________________________________。
（6）若要利用上表培养基观察菌落，应该增加的成分是___________。

9 . 在北方农牧交错带的中温带半干旱区，当农田连续耕作六年后，农作物产量往往下降，弃耕后土地易沙化。对三片弃耕土地分别采取围封禁牧、人工种植灌木或乔木等恢复措施，灌木、乔木成活后该地自然恢复。十五年后进行调查，结果见下表。

指标 样地	土壤含水量（%）	土壤全氮（）	草本植物种数（种）	节肢动物个体数（只·样－1）	节肢动物多样性指数*
弃耕地（对照）	0．26	0．09	1．1	3．1	0．6
禁牧草地	0．66	0．36	3．6	9．4	1．7
人工灌木林	0．77	0．42	2．8	7．4	0．8
人工乔木林	1．37	0．27	1．6	10．0	1．1

*多样性指数综合反映丰富度和均匀度
据表回答：
（1）土壤含水量增加最明显的是______样地。土壤全氮增加最明显的是______样地，这是该样地内豆科植物与根瘤菌相互作用的结果，豆科植物与根瘤菌的种间关系为______。
（2）三种恢复措施均可改良土壤，这体现了生物多样性的______价值。
（3）在半干旱地区，节肢动物是物种最丰富和数量最多的类群，在食物网中占据重要地位，其多样性一定程度上可反映生态系统的物种多样性。从生物多样性角度分析，三种恢复措施中更适宜于中温带半干旱区的是______。
（4）在中温带半干旱区，草原生态系统比农田生态系统的自我调节能力更______。

10 . 下表是某微生物培养基的成分，据表回答下列问题：

编号	成份	含量	编号	成分	含量
①	粉状硫	10g	②		0.4g
③		4g	④		9.25g
⑤		0.5g	⑥		0.5g
⑦		100mL

（1）上述培养基所培养微生物的同化作用类型是_____，判断依据是_____。
（2）若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基成分应如何调整？_____，调整的依据是_____。
（3）若表中培养基用于观察菌落形态，应增加的成分是_____。
（4）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，某些微生物仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加_____。下列选项中属于该类物质的_____（多选）。
A．某些维生素B．某些氨基酸C．酶D．激素
（5）下图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。图中在_____（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目理论上是_____个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是_____（用编号表示）。