1 . 研究发现，实体肿瘤内部通常是缺氧的环境，蓖麻毒素蛋白（RTA）可作用于核糖体，使蛋白合成受阻，从而引起细胞死亡。TAT是一种短肽，可转导蛋白进入细胞，含有氧依赖性降解区域ODD（多肽）的融合蛋白可以适应低氧条件稳定存在，但在常氧条件下会被蛋白酶降解。科研人员以RTA作为抑制肿瘤细胞增殖的活性分子，利用TAT的作用将融合蛋白转运进入肿瘤细胞，并利用ODD的作用减轻RTA对正常细胞的毒性，分别构建了含TAT-RTA（660bp）和TAT-RTA-ODD（870bp）融合基因的表达载体，并成功得到相关融合蛋白。
(1)可采用PCR的方法获取融合基因TAT-RTA，需要根据TAT和RTA基因设计引物，引物的作用是___________。已知RTA基因和欲得到的TAT-RTA融合基因的结构如图所示，TAT基因编码链序列5'ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA3'，为顺利构建表达载体，需要在引物1的5'端加入___________酶切位点，引物2的5'端加入___________酶切位点，利用TAT和RTA核酸序列设计引物时，要求在RTA蛋白的前端引入TAT短肽，请根据要求写出引物1___________（写出引物5'端的12个碱基即可）。

   

(2)载体的部分结构如图所示，His标签由连续的6个组氨酸构成，可用于对重组融合蛋白进行分离纯化，将PCR得到的TAT-RTA融合基因和载体双酶切后，再用___________酶连接。但是在研究时，发现融合蛋白中没有His标签蛋白，据图分析原因是______________________。

   

(3)科研人员将得到的重组融合蛋白经腹腔给药荷瘤小鼠（患实体肿瘤的小鼠称为荷瘤小鼠），研究荷瘤小鼠肿瘤体积变化，结果如图所示，

   

请写出本实验的结果______________________。
产生该实验结果的原因是______________________。

2 . 下表是某同学在做几个实验时所列举的实验材料、实验条件和观察内容。回答问题：

组别	材料	实验条件	观察内容
A	苹果匀浆	斐林试剂、水浴加热	颜色反应
B	浸泡过的花生种子	清水、苏丹Ⅲ染液、50%的酒精溶液	细胞中着色的小颗粒
C	豆浆	双缩脲试剂A液和B液	颜色反应

(1)上述实验中，需要使用显微镜进行观察的是_____（填实验组别字母）。
(2)A组实验观察到的颜色反应是_____。B组实验中50%的酒精的作用是________。

3 . 科研人员对猕猴桃果肉的光合色素、光合放氧特性进行了系列研究。 图甲为光合放氧测定装置示意图，图乙为不同光照条件下果肉随时间变化的光合放氧曲线。 请回答下列问题：

(1)取果肉薄片放入含乙醇的试管，并加入适量______，以防止叶绿素降解。长时间浸泡在乙醇中的果肉薄片会变成白色，原因是______。
(2)若图1中装置在适宜温度下进行试验，则影响光合放氧速率的主要环境因素有_______（回答出两种主要因素）等。 氧电极可以检测反应液中氧气的浓度，测定前应排除反应液中____的干扰。
(3)图1在反应室中加入NaHCO₃的主要作用是______。 若提高反应液中NaHCO₃浓度，果肉放氧速率的变化是______(填“增大”、“减小”、“增大后稳定”或“稳定后减小”)。
(4)图2中不同时间段曲线的斜率代表光合放氧的速率，对15～20 min曲线的斜率几乎不变的合理解释是______；若在20 min后停止光照，则短时间内叶绿体中含量减少的物质有______(填序号：①C₅　②ATP　③[H]　④C₃)，可推测20～25 min曲线的斜率为______(填“正值”、“负值”或“零”)。

4 . 随着工业“三废”的排放，土壤中镉（Cd²⁺）等重金属对农作物的影响日益严重。为探究镉（Cd²⁺）对水芹菜生长、光合特性的影响及增施不同浓度钙（Ca²⁺）对镉胁迫的缓解效应，科研人员通过营养液水培方式，进行了一系列实验，结果如表。

组别	叶绿素 （mg·g-1）	类胡萝卜素 （mg·g-1）	净光合速率（μmol·m-2·s-1）	气孔导度（mmol·m-2·s-1）	胞间CO2浓度（μmol·m-1）	株高 （cm）	鲜重（g）
对照组	0.59	0.11	8.90	386.67	301.33	89.10	185.33
Cd2+组	0.40	0.07	6.20	327.33	350.67	55.40	96.65

(1)对照组用水芹菜正常生长的完全培养液培养，Cd²⁺组的处理方法是__________。据表分析可知，镉能降低水芹菜的净光合速率，主要通过降低___________的含量，从而导致为暗反应提供的_________减少。
(2)据表中数据分析，与对照组相比，镉胁迫导致净光合速率显著下降__________（填“是”或“不是”）气孔因素造成的，判断依据是______________。
(3)研究表明，Ca²⁺与Cd²⁺会竞争细胞表面的离子通道，因而增施适量的钙可以缓解镉胁迫的原因是_________。请完善增施不同浓度Ca²⁺溶液对镉胁迫水芹菜的缓解效应的实验设计思路__________。

5 . 水存在两种跨膜运输机制：一种是通过脂双层的自由扩散，另一种是通过专一的水通道一水孔蛋白跨膜运输。研究者据此提出的实验思路如下：
①实验分组：
甲组：肾小管上皮细胞+生理盐水配制的蛋白酶液
乙组：肾小管上皮细胞+X
②将甲、乙两组制成装片，在盖玻片一侧滴清水，另一侧用吸水纸吸引，显微镜下观察破裂的细胞数目。
（1）实验目的：_________________________________________________。
（2）题中X是_________________________________。
（3）若甲组和乙组破裂的细胞数目基本相同，说明________________________________；若甲组极少的细胞发生破裂，乙组破裂的细胞数目较多，说明__________________________；若出现_____________________________________________________________，说明肾小管上皮细胞通过两种方式吸收水分。

6 . 如图为“探究酵母菌的呼吸方式”的实验装置图，C、E瓶为澄清石灰水，请据图分析：

（1）A瓶加入的试剂是_____，其目的是_____，B中酵母菌细胞呼吸的场所为_____。
（2）乙装置的酵母菌产生CO₂部位是_____。酵母菌与乳酸菌在结构上最主要的区别是：前者_____。如果把¹⁸O₂充入甲装置，则酵母菌内最先出现¹⁸O₂标记的化合物是_____。
（3）D瓶应封口放置一段时间后，再连通E瓶，其原因是_____
（4）图中装置有无错误之处，如果有请在相应的图中加以改正。_____

7 . 研究不同施硫量对玉米光合特性的影响，以（NH₄）₂SO₄作为硫源，在人工气候室内设置0（CK组）、36．3（S₁组）、413．85（S₂组）3个施硫水平（单位：kg/hm²）进行试验，并测定玉米不同发育时期叶片净光合速率和叶绿素含量等指标，实验结果如图所示，回答下列问题。


（1）上述实验可用__________提取玉米叶片中的色素，其含量的高低能直接反映出__________的合成速率。
（2）要获得图1中所示曲线，在玉米不同发育时期，人工气候室内除环境湿度、温度相同之外，__________外界因素也应相同（两点即可）。
（3）研究发现，硫元素可以提高叶绿素将光能___________的能力。结合图1和图2结果推测，施用硫肥使玉米增产的原因可能是__________。

8 . 植物叶肉细胞光合作用的碳反应、 蔗糖与淀粉合成代谢途径如图所示。 图中叶绿体内膜上的磷酸转运器转运出 1 分子三碳糖磷酸的同时转运进 1 分子 Pi （无机磷酸）。

（1）若蔗糖合成或输出受阻， 则进入叶绿体的 _________ 数量减少， 使三碳糖磷酸大量积累于 _________中，也导致了光反应中合成 __________ 数量下降， 卡尔文循环减速。上述这种三碳糖磷酸对卡尔文循环的调节属于 ___________ 。 此时过多的三碳糖磷酸将用于 ___________ ， 以维持卡尔文循环运行。
（2）某同学研究了不用光强度和不同浓度的NaHCO₃溶液对小球藻光合作用的影响，得到的实验数据如下：

第2~4d，在高浓度NaHCO₃溶液条件下，高光强度组比低光强度组氧气的相对浓度上升快，其主要原因是____________________________________；第6d后高浓度NaHCO₃溶液和高光强度组氧气的相对浓度上升显著加快，除上述原因外，还可能的原因是___________________________。

9 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与微生物培养与应用有关的问题：
（1）最适于酵母菌生长的是麦芽汁培养基，该培养基在________压力（121℃）条件下高压蒸汽灭菌15分钟。待灭菌完毕将试管靠在平放的笔上，进行冷却，待试管中的培养基冷却凝固成________后，即可进行接种。
（2）葡萄皮上常带有野生酵母，但在“用葡萄制作葡萄酒”实验中，需要加入适量干酵母悬液，其目的是_______________。将装配好的发酵瓶放在25~30℃环境中发酵，当发酵瓶中________________________，表示发酵完毕。 若发酵温度高于30℃，则需及时降温处理，主要是为了防止___________（A.酒精分解B.酵母菌死亡C.酒的风味不佳D.发酵瓶气压过大）
（3）发酵工业中，有时会采用不溶于水的介质对酵母菌进行处理，限制其在一定空间范围内活动，该处理起到对酵母细胞的___________作用。与传统发酵相比，该处理的优点是_______________________________。（至少答出两点）
（二）现采用建立转基因小鼠的方法来研究CA65基因的作用，回答有关的问题：
（1）CA65转基因小鼠载体的构建：将CA65 基因用________酶切后，插入到质粒中，构建CA65 转基因载体。
（2）CA65转基因小鼠的获得与检测：用__________法将转基因载体导入到小鼠_______的中，体外培养获得早期胚胎，在培养过程中必须配置一系列含有不同成分的培养液，原因是_______________________。早期胚胎再经__________到代孕母鼠相应部位。小鼠出生10天后提取其DNA，用_________技术扩增DNA 并通过分子杂交技术来检测CA65 转基因小鼠细胞是否含目的基因。
（3）转基因组与野生组对照发现，CA65 转基因小鼠的淋巴管明显增多，管径变粗。该实验结果说明CA65___________________________________________________________。

10 . 实验法是生物学常用的研究方法。请根据以下相关的实验现象和结果回答问题：

（1）已知放线菌素D是RNA合成抑制剂。如图是根据海胆受精卵在有放线菌素D和无放线菌素D存在情况下培养时，对¹⁴C标记的缬氨酸参与蛋白质合成的实验结果绘制的曲线图。请据图回答有关问题：
①直接参与将¹⁴C-缬氨酸掺入新合成蛋白质的细胞器是______，该过程在生物学上称为翻译，所依赖的模板是______分子。
②从受精开始到10小时之内，蛋白质合成所依赖的模板分子的来源是______。（从下图四个选项中选择，用字母代表）
A．未受精卵原有的   B．受精卵新合成的    C．精子提供的    D．无法确定
③受精10小时以后，海胆细胞内新合成的蛋白质所依赖的模板主要是______（答案从上小题四个选项中选择，用字母代表），作出此判断的依据是______。
（2）鸡的输卵管细胞合成卵清蛋白，成红细胞合成β珠蛋白，胰岛细胞合成胰岛素，这些细胞都是在个体发育过程中逐渐产生的，因此早期人们推测细胞的这种分化是由于在发育过程中遗传物质的选择性丢失所致。分子生物学技术发展起来后，科学工作者用编码上述三种蛋白的基因分别作探针，对三种细胞中提取的总DNA的限制性内切酶的酶切片段和三种细胞的总RNA分别作分子杂交实验，结果如表：

	细胞总DNA	细胞总RNA
	输卵细胞 成红细胞 胰岛细胞	输卵管细胞 成红细胞 胰岛细胞
卵清蛋白基因	+             +            +	+               -             -
β珠蛋白基因	+             +             +	+             -
胰岛素基因	+             +             +	-               +

注：“+”阳性结果（表示杂交过程中有杂合双链）

“-”阴性结果（表示杂交过程中有游离的单链）

上述实验结果说明：早期人们认为细胞的分化是由于在发育过程中遗传物质选择性丢失所致，据此实验你认为这种推测______（填“成立”或“不成立”），理由是______。而细胞发育的不同阶段合成不同的蛋白质是细胞中不同______的结果。