2 . CD3D严重联合免疫缺陷（SCID）是由CD3D基因突变引起的，该突变阻止了T细胞生长发育所需的CD3D蛋白的合成。科研人员对第3代CRISPR/Cas9基因编辑系统进行改造，获得一种超精确的腺嘌呤碱基编辑系统（ABE），该系统主要由向导sgRNA、Cas9切口酶和腺嘌呤脱氨酶组成，作用机制如图1。利用该系统在CD3δ-SCID患者的造血干细胞中可以更正约71.2％的致病突变。

(1)研究发现、Cas9切口酶只能对DNA的单链剪切，腺嘌呤脱氨酶催化腺嘌呤核苷酸转变成次黄嘌呤核苷酸，次黄嘌呤核苷酸可以和胞嘧啶核苷酸碱基互补配对，据此推测，至少通过________________次DNA复制可以完成修复。
(2)sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续碱基组成。研究发现，sgRNA会识别与之匹配的其它区域，导致sgRNA脱靶，试分析其原因是___________________，对此，你的解决措施是_________________________。
(3)为了对改造后的CD3D基因进行研究，把CD3D基因和His标签基因（His标签由6个组氨酸组成）连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，图2为载体、CD3D基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，已知组氨酸的密码子为CAU，终止密码子为UAG。

①写出His的基因编码链的碱基序列5'____________________3'。
②为构建融合基因并将其插入载体，科研人员设计了一对与CD3D基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物________________________（填“A”或“B”）的5'端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5'__________________3'。

5 . 紫外可见分光光度计常用于核酸的分离和鉴定。为研究 DNA 的复制，现进行以下实验：
大肠杆菌在条件适宜时约 20 分钟繁殖一代。研究人员先培养大肠杆菌，然后提取 DNA，经离心后，再测定溶液的紫外可见光吸收光谱，吸收光谱的峰值位置对应离心管中 DNA 的主要分布位置。实验步骤如下：
a．将大肠杆菌在¹⁵NH4Cl（氮源）的培养液中培养足够长时间。
b．提取大肠杆菌的 DNA，测定吸收光谱（图 1 a 处所示，峰值出现在 P 处）。
c．将大肠杆菌转移到¹⁴NH4Cl（氮源）的培养液中培养。
d．在培养到 6、13、20 分钟时，分别取样，提取 DNA，并测定吸收光谱，结果如图 1 b～d 处所示。
      
(1)关于大肠杆菌 DNA 复制的方式，有三种假设：全保留复制、半保留复制和分散型复制。其原理如图 2所示。据此判断，现有的实验结果可以否定哪种假设？___________。
(2)若分散型复制这一假设成立，请绘制出大肠杆菌在¹⁴NH4Cl的培养液中培养到 40 分钟时的吸收光谱图 e_____

   
（要求反映出峰值的位置与 P 和 Q 的关系）。
(3)后期实验证明 DNA 复制方式为半保留复制。根据图 1，吸收图谱只有一个峰值，且峰值的位置由 P 点逐渐上移到 Q 点，原因可能是：__。
(4)虽然同为 XY 型性别决定生物，性染色体组成为 XXY 的果蝇发育为雌性，X0 为雄性；性染色体组成为 XXY 的人类则发育为男性，X0 为女性，可见果蝇以 ____决定性别，而人类以____决定性别。
(5)研究发现小鼠 Y 染色体非同源区上的睾丸形成基因（T 基因）决定睾丸的形成。某些情况下，含 T 基因的染色体片段会转接到 X 染色体上，含 T 基因的受精卵发育为雄性，不含 T 基因的发育为雌性，含 2 个Y 染色体的受精卵不发育，那么性染色体数量正常的雄鼠基因型可能为_____ 。一个基因型为 XYT的受精卵中的 T 基因丢失，发育成能产生可育雌配子的雌鼠，该鼠与一只体细胞中性染色体数量正常但基因型未知的雄鼠杂交得 F₁，F₁随机交配得 F₂，则 F₂雌雄比例最小为____ 。