1 . 海洋塑料垃圾每年会造成数十万海洋动物死亡，其中聚乙烯（PE，分子式为（C₂H₄）_n）塑料因缺乏有效的降解途径而危害巨大。2021年，中科院海洋所首次发现了能有效降解PE塑料的海洋微生物菌群。通过对该微生物菌群的组成种类和纯度进行定量分析，发现其中有5类细菌菌群为优势种群，研究人员通过微生物培养技术成功获得了上述5类细菌的纯培养菌株，将其中具有较强降解PE塑料能力的3类菌株按一定比例复配后，成功获得了一个能稳定共存且具有显著降解PE塑料能力的菌群，该菌群只需两周时间就可以将PE塑料降解为碎片。经过反复的毒理实验证实该菌群对环境无害，且在降解PE塑料的培养物中发现了能够产生有效抑制多种病原菌的活性物质。
(1)为筛选能有效降解PE塑料的海洋微生物菌群，在设计培养基配方时，碳源的设计上应满足的条件是_____________。
(2)研究人员发现了能有效降解PE塑料海洋微生物菌群中的5类优势菌群后，采用了_________法将单个细菌分散在固体培养基上，并根据菌落的____________（至少写出2种特点）等进行初步区分，从中获得了能稳定降解PE塑料的菌种A₁、A₂和A₃。如需计算一定体积的样品中某菌种的数量，可以利用______在显微镜下观察、计数，其统计结果与实际活菌数相比______（填“偏大”或“偏小”），原因是_____________。
(3)研究人员将经过稀释的含A₁、A₂和A₃三种菌种的菌液进行接种，通过培养基中的分解圈来筛选分解能力强的菌种，培养一段时间后测得透明圈的直径（D）与菌圈的直径（d）如图所示。如需进一步选择单一菌种进行扩大培养，应选用______菌种，理由是_______________。

   

2 . 尿素是一种重要的农业肥料，尿素分解菌可合成脲酶，利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可从土壤中分离尿素分解菌并进行计数。科研人员取0.1g土壤分别稀释10³~10⁷倍，将0.1mL不同稀释倍数的土壤稀释液接种在固体培养基上，在相同的培养条件下得到如表数据。下列叙述正确的是（　　）

稀释倍数		103	104	105	106	107
菌落数/个	1号平板	478	367	270	26	5
	2号平板	496	354	268	20	8
	3号平板	509	332	272	29	3

A．利用稀释涂布平板法可将稀释液中的菌体完全分离，一个菌落对应一个菌体

B．该实验中稀释倍数为105的平板最适合用来统计活菌数

C．以尿素为唯一氮源的培养基上长出的菌落均为尿素分解菌

D．若在显微镜下利用血细胞计数板直接计数，则统计结果一般比实际活菌数目少

3 . 下列有关培养基的叙述，错误的是（　　）

A．液体培养基要制成固体培养基，可在培养基中加入琼脂

B．细菌在固体培养基上生长，可以形成肉眼可见的菌落

C．每种培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质

D．培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及O2的要求

4 . 我国科考船采集了深海冷泉附近的沉积物样品，从中分离出微生物，并进一步研究了其生物学特性，以便更好地利用深海微生物，具体过程如图所示，图中Ⅰ～Ⅴ表示操作步骤。下列相关叙述错误的是（       ）

A．培养基①是液体培养基，培养基②是固体培养基

B．用平板划线法纯化菌种时，接种环的灼烧次数比划线次数多一次

C．若在培养过程中向培养基①内充满N₂，则此时的培养基①是鉴别培养基

D．V过程用稀释涂布平板法对微生物进行计数，结果会小于实际微生物数

5 . 某兴趣小组为从土壤中筛选出某类细菌制备相应培养基，培养基成分如表所示。下列有关分析错误的是（       ）

成分	KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
质量/g	1.4	2.1	0.2	10.0	1.0	15.0

A．从物理性质角度分析，该培养基属于固体培养基

B．从功能角度分析，该培养基属于选择培养基

C．该培养基可以筛选出能分解尿素的微生物

D．该培养基灭菌后还需要将pH调至中性或弱碱性

6 . 随着大同生态环境的持续改善，水体清澈、食物丰富的桑干河湿地成为候鸟迁徙的“乐园”。氮素污染物是造成水体富营养化的主要原因之一，异养硝化细菌能降解硝酸铵产生氨，在净化水质方面有一定应用价值。科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并对比了其去氮能力。回答下列问题：

   

(1)进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用__________法进行接种。初步筛选时，样品中含有多种微生物，培养后，一般依据___________来区分不同的微生物。
(2)从污水中分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要加入硝酸铵等营养物质、琼脂和酚红指示剂。从功能上分析，该培养基为____________培养基。培养后，这两种细菌都能生长并形成菌落，结果如图所示，__________（填“ZW2”或“ZW5”）菌株的去氮能力更强，判断依据是__________。
(3)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁵的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为57、162、232、121和315。则每毫升样品中的细菌数量___________个。该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________，原因是__________。

7 . 稻瘟菌引起的水稻稻瘟病是危害最为严重的真菌病害之一，每年都给水稻生产带来重大的经济损失。土壤中某些微生物能合成并分泌几丁质酶，能抑制稻瘟菌的生长，可用于水稻稻瘟病的防治。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶。下列相关叙述错误的是（       ）

A．筛选土壤中目的微生物时需用以几丁质为唯一碳源的培养基

B．纯化培养时，可选择稀释涂布平板法或平板划线法接种

C．在以几丁质为唯一碳源的培养基上生长的菌落均能分泌几丁质酶

D．利用能分泌几丁质酶的微生物对水稻稻瘟病进行的防治属于生物防治

8 . 下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是（       ）

A．选择农田或公园的表层土壤作为样品分离目的菌株

B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源和碳源

C．采取连续划线的方法可使微生物均匀分布

D．对分离的菌种进行鉴定还需要借助生物化学的方法

9 . 如图为研究人员从被石油污染的土壤中分离高效分解石油的细菌的过程。回答下列问题：

   

(1)应用____（填“蒸馏水”“无菌水”或“生理盐水”）制取细菌悬液。配制培养基时，调pH操作应在灭菌操作之____（填“前”或“后”）进行。步骤③中为微生物提供碳源的物质是____，经过步骤③培养后，培养基中石油分解菌的浓度会____（填“增大”“减小”或“不变”）。
(2)步骤④所用的培养基通常添加____作为凝固剂，接种后的平板进行倒置培养的目的是____。石油分解菌在步骤④的培养基上生长后，会在菌落周围形成透明圈，根据透明圈直径与菌落直径的比值大小可以判断目的菌对石油分解能力的大小，因此应优先选择透明圈直径与菌落直径的比值____（填“大”或“小”）的菌落继续进行步骤⑤的操作。
(3)研究人员用稀释涂布平板法对菌悬液中石油分解菌的数目进行统计，共接种了5个平板，培养后5个平板上的菌落数分别为288、291、321、285、311，其中不能用于结果计算的数据是____。

10 . 下列有关微生物的分离、培养及计数的叙述，正确的是（       ）

A．用液体培养基培养目的菌比固体培养基更容易获得单菌落

B．能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长的都是尿素分解菌

C．未接种的空白平板上长出菌落可能是培养基灭菌不彻底造成的

D．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏高