1 . 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（       ）
①化学消毒       ②高压蒸汽灭菌       ③干热灭菌       ④ 紫外线灭菌       ⑤ 灼烧灭菌       ⑥ 巴氏消毒法

A．⑤③⑤①④⑥	B．③②⑤④①⑥
C．②③⑤①④⑥	D．②②⑤④①⑥

3 . 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行__________________________灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入在培养皿的_____________上做好标记的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约为_____________的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后_____________培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________ 。下列关于相关操作叙述合理的有________。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。
(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上_________色细胞的个数应不少于____________才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。

4 . 下列操作能达到灭菌目的的是（       ）

A．用免洗酒精凝胶擦手	B．制作泡菜前用开水烫洗容器
C．在火焰上灼烧接种环	D．防疫期间用石炭酸喷洒教室

5 . 某污水处理厂欲处理一批含As^3＋和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N₂O和N₂。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选_______：该培养基中含有适宜浓度的________，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________培养基。
接种：取采集的人体新鲜粪便样品0.3 g，接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________；涂布完成后，将平板置于温度为________的恒温培养箱中培养24 h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是________，该接种工具的灭菌方法是________。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的________开始划线，目的是_______。
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力：挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养，吸取1 mL菌液离心收集菌体后，分别接种到含有0 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的液体培养基中，测定其OD值(OD值越大，表明菌体数量越多)，并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论：_______。

6 . 某兴趣小组对土壤中细菌进行分离并计数，利用选择培养基筛选某种细菌，以下叙述正确的是（       ）

A．可配制以(NH4)2SO4为唯一氮源的培养基用于筛选硝化细菌

B．所有培养基的成分均需进行高压蒸汽灭菌

C．脲酶将尿素分解成氨，使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红

D．本实验可采用稀释涂布平板法或平板划线法的接种方法

7 . β苯乙醇是赋予白酒特征风味的物质。从某酒厂采集并筛选到一株产β苯乙醇的酵母菌突变株，然后将该突变株扩大培养后用于白酒生产。下列叙述正确的是（       ）

A．该培养过程包括配制培养基、灭菌、分离和培养四个步骤

B．配制培养基时应加入β苯乙醇作为主要能源物质

C．所用培养基及接种工具分别采用湿热灭菌和干热灭菌

D．培养阶段需保证培养液适宜的pH和充足的溶氧量

9 . 回答下列与酵母菌有关的问题：
（1）分离培养酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，该培养基应采用________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_______________。
（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进______________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养，可促进_________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是______________________。

10 . 纤维素是地球上储量丰富的可再生资源，经纤维素酶催化水解后，可被微生物发酵利用。筛选高产纤维素酶菌株的流程如图所示。下列说法错误的是（       ）

A．步骤I-Ⅲ均需在超净台上进行，I和Ⅲ均为稀释涂布平板法接种

B．培养基②的每一个菌落均是由一个细菌细胞繁殖而来的子细胞群

C．步骤Ⅱ是根据菌落特征初步鉴定并扩增高产纤维素酶菌株的过程

D．④从功能来看应为选择培养基，以便选出透明圈大的菌落作目的菌种