1 . 回答下列关于微生物培养与纯化的问题：
(1)微生物培养利用的培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、无机盐、氮源、碳源，在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、 __________________________ 以及氧气的需求。对微生物进行培养时，需对培养基、试管、培养皿等进行_____________处理。纯化菌种时常用的接种方法有______________________。
(2)某兴趣小组欲从土壤中分离分解尿素的细菌，可以将样液接种到以 __________________为唯一氮源的培养基上以筛选目的菌株，从功能上划分，该培养基属于_____________________培养基。
(3)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在校服表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是计算→称量溶化灭菌→倒平板。倒平板时需要在酒精灯火焰旁操作，待平板冷却凝固后，还需要将平板_____________________。
(4)在平板上进行划线时，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是______________________________。

2 . 苯丙酮尿症（PKU）患者表现为苯丙氨酸的代谢产物—―苯丙酮酸过度积累，阻碍脑的发育，造成智力低下，因此患者需要严格限制饮食中苯丙氨酸和蛋白质的含量。科研人员尝试筛选能降解苯丙氨酸的乳酸杆菌，用于生产PKU患者可安全食用的酸奶。
(1)筛选苯丙氨酸降解菌的液体培养基成分如下：葡萄糖、磷酸氢二钾、乙酸钠、硫酸镁，还需加入_____________为唯一氮源，加水定容后调节pH，用_____________法灭菌，冷却后接种不同乳酸杆菌的菌种，25℃条件下培养3天。本实验中还需设置不接菌的空白对照，目的是_____________。
(2)将筛选出的Y与F两种菌株制成菌悬液，取少量加至人工胃液中消化2小时，使用_________法测定活菌数，检测其人工胃液耐受性。再转入人工肠液中，用同样的方法检测耐受性，结果如图：据图判断，应选择Y菌株进行后续研究，依据是____________。

   
(3)为研究Y菌株能否作为辅助发酵剂用于生产PKU患者可食用的酸奶，还需将其与目前常用的酸奶发酵剂YF－L（以保加利亚乳杆菌为主）混合，进行酸奶发酵实验。请在下表中完善实验方案。

组别	实验处理	检测指标
对照组：YF－L	将菌株接种于全脂复原乳中，42°C发酵至pH4．5左右，置于4℃下冷藏24h。	____________（至少写出2个）
实验组：

3 . 在石油开采过程中，利用表面活性剂可提高采收率，但化学合成表面活性剂不易降解，带来一定的环境污染。某些微生物可代谢产生生物表面活性剂，拟从含油污水中筛选耐高温、高压的产生生物表面活性剂的菌株。
(1)分离能利用石油的耐高温菌种，流程如下图。

   
①上述过程所用的培养液应如何设计？_____
②固体培养基的制备过程包括：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，可采用____法对培养基进行灭菌。
③图中A处应采用______法进行接种。
(2)通过上述分离过程，获得16个菌株。如何从这些菌株中进一步筛选耐高压、高产生物表面活性剂的菌种？请写出基本思路：_______。
(3)为提高实验的可信度，设置了如下2个对照实验：

对照组	作用	应出现的现象
对照组1： 未接种的选择培养基	①_______	②_________
对照组2： ③________	判断选择培养基是否起到了选择作用	对照组2培养基上的菌落数④______（填“大于、小于、等于”）选择培养基上的菌落数

(4)简述产生物表面活性剂菌株在石油工业应用的生态学意义。______

4 . 某兴趣小组研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，实验过程如下图。下列相关叙述错误的是（       ）
   

A．配制培养基X后常用高压蒸汽灭菌法灭菌

B．固体培养基X对菜品中的细菌没有选择性

C．根据菌落的特征可以初步判断细菌的种类

D．用平板划线法将细菌接种在固体培养基X上

5 . 《泉州市生活垃圾分类管理办法》于2023年2月1日起施行。处理生活垃圾的有效方法之一是利用微生物对其进行降解，下图表示的是筛选高效降解淀粉菌种的过程。相关叙述正确的是（       ）
   

A．配制培养基时需添加一定量的抗生素再进行灭菌，以防止杂菌污染

B．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对本实验的培养基进行灭菌

C．菌落②比菌落①产生的透明圈直径大，主要原因是菌落②中的细菌数更多

D．使用稀释涂布平板法计数时，所得实验数据与实际数值相比可能偏小

6 . 下列有关无菌操作的叙述正确的是（　　）

A．用于微生物培养的器皿常采用煮沸消毒法

B．巴氏消毒法可以杀死牛奶中所有微生物，包括其芽孢和孢子

C．培育脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒

D．动物细胞培养时定期更换培养液的目的是营造无菌环境

7 . 从古至今，我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征，很多人养兰花。但是，兰花种子通常发育不全，在自然条件下萌发率极低；传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长，繁殖率低等问题。现用如下技术培养繁殖某种名贵兰花，下列有关叙述错误的是（       ）
   

A．取材时应优先选取该种名贵兰花的茎、叶和成熟的组织等

B．消毒时要注意消毒试剂的浓度及消毒处理的时间以保证消毒效果

C．过程Ⅰ一般不需要光照，要注意外植体的方向，不要倒插

D．过程Ⅱ的培养基中生长素的比例比过程Ⅲ的培养基中的低

8 . 某科研机构欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作正确的是（       ）

A．利用平板划线法对细菌进行计数和分离

B．以石油为唯一碳源的培养基筛选

C．土壤样品在使用前应充分灭菌

D．称取和稀释土壤样品时不必在酒精灯火焰旁

10 . 目前，常态化疫情防控已经成为我们生活的一部分，正确佩戴口罩是预防新冠肺炎的有效手段。某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。回答下列问题：
(1)从戴一段时间后的口罩上剪取总量5cm²样品，剪碎后加入灭菌生理盐水中，定容至100mL，充分混匀，得到样液A。待样液A自然沉降后，取上清液稀释10倍得到样液B。取4个经_____________灭菌法处理的培养皿，向其中3个培养皿中分别加入1mL样液B，再将冷却到45℃~50℃的培养基倒入培养皿。随即转动培养皿，使样液B与培养基充分混匀，待_____________后，将平板倒置，置培养箱内培养24h。第4个培养皿添加_____________（填“样液”、“培养基”或“样液和培养基”）作为对照。
(2)一段时间后，3个平板上长出的菌落数分别为31、42和35，可计算出1cm²口罩样品中菌体数量为______个。
(3)培养基上统计的菌落数往往比口罩上活菌的实际数目________（填“多”或“少”），原因是____________。
(4)若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行检测，将样液接种到甘露醇高盐琼脂培养基上培养，培养一段时间后，该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是__________________________。
(5)进一步研究发现口罩内层细菌数量较外层多，且随着佩戴时间的延长细菌数量增长显著。根据你的生活经验和所学知识，分析口罩内层细菌数量增长的可能原因是__________________________。（要求答出两点）