1 . 回答下列（一）、（二）小题：
（一）实验表明，细菌中芽孢杆菌降解率最高，真菌中毛霉降解率最高，且两者混合效率更佳。回答与固定化混合菌对土壤中苯并芘（BaP）降解效果有关的问题：
(1)高效降解菌筛选试验：土壤过2mm筛后，分装培养瓶中，每瓶30g，_____℃高压蒸汽灭菌_____，冷却后，在无菌条件下移入一定量的BaP丙酮溶液，放置过夜。再按10%量接种菌悬液，通过灭菌棉塞控制通气量，以不加菌液为对照，随时补加无菌水，使土壤水分为30%，置25℃恒温箱中避光培养，分别在每隔7d取样测定_____。
实验中BaP的降解结果都有一个共同的趋势：前28d降解转化速度快，随后则出现缓慢的反应趋势。
(2)固定化混合菌的制备：将蛭石载体处理后，再接种游离的____，随着混合菌的生长，部分微生物自然固定在载体上，培养结束后用_____洗涤固定化混合菌细胞数次，便制得固定化混合菌，以_____为对照，通过两者质量差计算蛭石对微生物的吸附量。
（二）回答与转基因雷公藤培育过程有关的问题：
(3)将含_____酶的混合液在55℃水浴锅中活化，0.22μm微孔滤膜过滤 灭菌。取雷公藤悬浮细胞，加入酶混合液，黑暗条件下 悬浮培养以分离原生质体。
(4)原生质体的活力检测采用台盼蓝染色法（台盼蓝可穿透死细胞的细胞膜，使死细胞中的DNA着色，但无法进入活细胞内），原生质体活力的计算方法为：_____占该视野下原生质体总数的百分比。
(5)由于原生质体来源于黑暗条件下培养的雷公藤悬浮细胞，因此其细胞中不含_____。将原生质体与含_____ 的植物表达载体质粒混合，在黑暗条件下完成转化后，再用激光作扫描光源的显微镜观察，统计发出绿色荧光的原生质体数占观察到的所有原生质体数的百分比，以此确认原生质体的转化效率。

3 . 下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题。

成分	蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	指示剂	琼脂
含量（g）	10	5	5	2	0．2	12
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL

(1)根据用途划分，该培养基属于______（填“选择”或“鉴别”）培养基。检测熟食中的大肠杆菌是否超标时，可以配制______琼脂培养基，通过观察和统计培养基上_______色菌落的数量作出判断。
(2)若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必须怎样更改？______。
(3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基进行________处理。
(4)图1和图2是培养大肠杆菌的结果图，其对应的接种方法分别是：______和________。
   
(5)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有______。

A．制作果酒

B．由果酒制作果醋

C．制作泡菜

D．制作腐乳

4 . 消毒和灭菌在生产、生活中有着广泛的应用。下列操作正确的是（       ）

A．扩增蘑菇菌种时，在酒精灯火焰旁进行操作以避免杂菌污染

B．对日常餐具及牛奶灭菌时，最好在沸水中煮沸5～6min

C．消毒是指用较为温和的物理、化学方法杀死物体表面的部分微生物

D．生活中，用体积分数为75%的酒精擦拭双手进行灭菌

5 . 某兴趣小组对土壤中细菌进行分离并计数，利用选择培养基筛选某种细菌，以下叙述正确的是（       ）

A．可配制以(NH4)2SO4为唯一氮源的培养基用于筛选硝化细菌

B．所有培养基的成分均需进行高压蒸汽灭菌

C．脲酶将尿素分解成氨，使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红

D．本实验可采用稀释涂布平板法或平板划线法的接种方法

6 . 精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理过的菌液接种在培养基甲上，培养至菌落不再增加时，平板上的菌落如图所示。过程②向培养基甲中添加某种物质，继续培养。下列相关叙述正确的是（       ）

   

A．实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌

B．从培养基乙中挑选菌落，用平板划线法接种在培养基上可分离出单菌落

C．培养基甲是一种选择培养基，过程②向培养基甲中添加精氨酸

D．菌落A是诱变产生的精氨酸依赖型菌种，为鸟氨酸发酵的优良菌种

7 . 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素（抗生素）的圆形滤纸，然后在无菌、适宜条件培养12~16h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈（简称抑菌圈，见下图）。下列相关叙述正确的是（       ）
   

A．图1中的培养基需冷却至50℃左右时再倒平板，该操作不需要在酒精灯旁进行

B．抑菌圈越大，说明大肠杆菌对链霉素的敏感性越强

C．接种后的平板在培养时的放置应如图2中的2所示

D．图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落，可能是大肠杆菌发生了基因突变、染色体变异

8 . 下图是研究人员从落叶地的土壤中筛选高效分解纤维素的细菌的过程示意图。下列有关叙述正确的是（       ）
   

A．在配制步骤②③的培养基时，应在培养基灭菌后再将pH调至适宜

B．步骤③筛选、纯化的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落

C．步骤③采用稀释涂布平板法进行接种，并需要加入纤维素作为唯一的碳源

D．步骤④加入的是刚果红染液，可根据菌落与透明圈的直径比来挑选优质菌落

9 . 尿素[CO（NH₂）₂]]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题：

成分	KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂
含量（g）	1．4	2．1	0．2	10．0	1．0	15．0
操作	将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升

(1)只有能合成_____的微生物才能分解尿素，利用以尿素作为_____的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
(2)本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板。前一组的平板上如果_____，可以说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果菌落数显著多于同一稀释度的选择培养基平板上的，可以说明_____。
(3)采用_____法，既能经培养观察到分离的单菌落，又能统计样品中的活菌数目。为了保证数量测定结果准确，应至少对_____个平板进行重复计数，一般选择菌落数为_____的平板进行计数。但统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，这是因为_____。

10 . 农作物光合作用的产物有一半以上存在于秸秆中，木质素是存在于植物纤维中的一种有机物，是世界上第二位丰富的有机物，其分解与陆地上碳循环密切相关。苯胺蓝是一种蓝色生物染色剂，可将木质素染成蓝色，木质素降解菌产生的过氧化酶可以使苯胺蓝褪色。下图为木质素降解菌分离筛选方案流程图，下列叙述错误的是（       ）
   

A．配制固体培养基时需加入凝固剂，用高压蒸汽灭菌法进行灭菌

B．配制的选择培养基应以木质素为唯一碳源筛选木质素降解菌

C．在普通培养基中加入苯胺蓝，可用于鉴别木质素降解菌

D．为了解土壤中木质素降解菌的活菌数量，可利用平板划线法进行计数