1 . 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷ 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。

2 . 回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO₃”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。
（2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置”或“正置”）。
（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________。
（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

3 . 回答下列与酵母菌有关的问题：
（1）分离培养酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，该培养基应采用________灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_______________。
（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进______________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养，可促进_________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是______________________。

4 . 在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
（1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________，在照射前，适量喷洒_________，可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过________（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是__________________________。

5 . 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是

A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧

C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染

D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基

6 . 大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，便菌落呈紫黑色。检测水样是否符合饮用水卫生标准时，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目，流程如图所示：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝培养基（EMB培养基）上培养一统计菌落数目。

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是_________。
(2)从功能上划分，EMB培养基属于__________培养基，为检测该培养基灭菌是否彻底，对于该培养基应采用的检测方法是_________。
(3)为检测严重污染的水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板中，应选择颜色为_________的菌落进行计数。该方法通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是__________。
(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可以测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，从中检测到两种微生物，它们在结构上的主要区别是__________。另一份来自湖泊，若要通过测量蓝藻的数目来研究“水华”，则培养基配方中必须添加__________（从“水”“无机盐”“碳源”“氮源”中选填）。

7 . 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关无菌技术的叙述，正确的是（       ）

A．操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒

B．巴氏消毒法处理的食品不含微生物，可长期保存

C．平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作

D．培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌

8 . 花药离体培养是重要的育种手段。下图是某二倍体植物花药育种过程的示意图，下列叙述正确的是

A．为了防止微生物污染，过程①所用的花药需在70%乙醇中浸泡30 min

B．过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于根的分化

C．过程③逐步分化的植株中可筛选获得纯合的二倍体

D．过程④应将炼苗后的植株移栽到含有蔗糖和多种植物激素的基质上

9 . 小明做“微生物的分离与培养”实验时得出如下结论，相关叙述正确的是（　　）

A．高压蒸汽灭菌加热结束时，立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

10 . 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（　　）
①可以用相同的培养基
②都需要使用接种针进行接种
③都需要在酒精灯火焰旁进行接种
④都可以用来计数活菌

A．①②

B．③④

C．①③

D．②④