1 . 土壤中的某些细菌能产生脲酶，脲酶能使尿素分解产生NH₃和CO₂。从土壤中分离和纯化尿素分解菌的部分操作如图所示。回答下列问题：

(1)制备培养基平板的过程中，调节pH应在____________（填“灭菌前”或“灭菌后”）。系列梯度稀释后，采用____________（填工具）将0.1mL稀释液接种到培养基平板上。
(2)为保证上述实验中统计结果更接近实际值，下列处理合理的是____________（填序号）。
①每个稀释度下至少接种3个平板，统计菌落数并求其平均值
②24h后统计菌落数，将记录的菌落数目的平均值作为结果
③选取菌落数为30～300的平板计数
若每个平板上单菌落数目均符合统计要求，且单菌落数目的平均数为n，则可估算出1g该土壤样品中尿素分解菌的数目约为____________个，用此法估算尿素分解菌数目的前提条件之一是在培养基中添加____________作唯一氮源。
(3)感染幽门螺杆菌（Hp）会引起一系列胃部疾病，在消化内科，患者常被要求做Hp检测。
①Hp能产生脲酶，基于这一原理的¹³C—尿素呼气试验是Hp检测的重要手段：口服含¹³C—尿素的胶囊，一段时间后，收集受试者呼出的气体并用红外光谱仪来检测其中¹³CO₂的情况。若呼出的气体中检测出¹³CO₂，则可判断受试者为Hp感染者。请简述¹³C—尿素生成¹³CO₂。并转运到呼出的气体中的过程：____________。
②少数患者因感染耐药性Hp，用常规方法无法进行根除治疗，此时可以采取分离培养的方法，有针对性地筛选出最有效的抗生素：取少量从患者体内分离纯化的耐药性Hp接种在培养基平板上，将用不同候选抗生素和_____________浸润的圆形滤纸片贴在细菌平板上，将培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养，观察____________。

2 . 近年来，过度依赖提高养殖密度和过量投饵的养殖方式，导致出现养殖环境生态失调、病害频发、水资源浪费和污染严重等现象。益生菌能够改善水质，抑制有害菌的生长，保持微生态平衡，是水产动物防控病害的有效手段之一。研究人员从鲫鱼肠道样品中分离出具有抑菌效果的菌株，为开发适用于水产养殖的抑菌类微生态制剂提供参考。抑菌效果用指示菌（嗜水气单胞菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等有害菌）进行检验。用到LB液体培养基：蛋白胨1%、酵母膏0.5%、氯化钠0.5%、水100mL。请回答下列问题：
(1)LB液体培养基中的蛋白胨能为微生物提供___________；用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，水沸腾后，待________________，再关闭排气阀。
(2)将样品鲫鱼肠道内容物制成稀释液，接种至LB液体培养基进行富集培养，目的是_________；将富集培养液加至LB固体培养基平板，涂布均匀，37℃恒温培养。配制LB固体培养基时，通常需向LB液体培养基中加入__________；菌落长出后，常采用__________法将其转接种到新的平板上进一步纯化，得到初筛菌株。
(3)采用打孔法测定初筛菌株的抑菌效果：吸取稀释好的________________菌液0.6mL加入平板；使用2.7mm的直径打孔器，在平板上垂直均匀打孔，标记菌株编号，每孔分别注入10μL________________菌液，培养24h。每个样品做3个平板。培养完毕，检测板上出现抑菌圈，测量________________，取平均值。
(4)经鉴定，菌株YJ4的抑菌效果最好，为进一步验证菌株YJ4的安全性，选择健康鲫鱼80尾，随机均分为4组。实验组分别采用腹腔注射法注射0.1mL浓度分别为1×10⁹、1×10⁸和1×10⁷单位/mL的YJ4菌悬液，适宜条件下饲养7d，观察并记录实验鱼游动、摄食及死亡情况，最后剖检，观察有无病变，对照组的处理为__________。