1 . 草甘膦是一种非选择性内吸传导型茎叶处理除草剂，其机理是抑制与植物多种代谢途径有关的EPSP合酶的活性。科研人员试图培育抗草甘膦作物，主要过程如图所示。请回答下列问题：
   
(1)科研人员从草甘膦严重污染的土壤中分离出一株高抗草甘膦菌株——假单胞杆菌G6，利用______技术扩增其基因组，得到具有抗草甘膦特性的G6基因，该基因的表达对EPSP合酶的活性具有______（“促进”或“抑制”）作用。
(2)通过①过程将G6基因插入Ti质粒的______，并利用农杆菌将重组DNA导入矮牵牛细胞，通过②过程可将目的基因插入矮牵牛染色体DNA的原理是_________________。
(3)③过程可通过____________技术将经过培养、筛选后的矮牵牛细胞培育得到转基因矮牵牛植株。抗草甘膦基因来自假单胞杆菌G6，但经检测它可以在水稻细胞中表达，其原因是细菌和植物共用__________________。
(4)科研人员通过④过程对转基因矮牵牛进行个体生物学水平鉴定，最为合理有效的方法是________，为了使结果更具有说服力，进行该过程时可选择_____________作为对照。

2 . 北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。下图表示将抗冻基因导入番茄细胞中以获取转基因抗冻番茄植株的过程。回答下列问题：

(1)利用PCR技术将北极比目鱼细胞中获取的抗冻基因进行大量扩增，PCR技术的原理是__________，扩增抗冻基因时需要设计引物，合成引物的前提条件是__________。
(2)农杆菌的Ti质粒上具有一段T-DNA，该DNA的特点是__________。通过基因工程技术获取抗冻番茄植株，该技术的核心步骤是__________。
(3)将导入了表达载体的农杆菌与取自番茄的细胞共同培养，通过农杆菌的__________，就可使目的基因进入番茄的叶肉细胞，再通过__________技术将细胞培养成完整的植株，与常规的种子繁殖方法相比，利用该技术培育抗冻番茄植株的特点是__________。

3 . 生物科技广泛应用于农业生产，以改善农作物品质、提高产量。植物成熟果实细胞中会表达大量的半乳糖醛酸酶（PG），导致成熟果实易于损伤。科学家利用番茄的PC基因构建反义PG基因表达载体，导入番茄细胞，培育出转基因延熟番茄。图甲是反义PG基因的作用机理，图乙是质粒结构图及相应的酶切位点。回答下列问题。

(1)从番茄细胞中提取PG基因转录的mRNA，经过___________产生cDNA，再用___________技术体外扩增。该技术需先设计合成___________，并使用___________酶来催化。
(2)构建反义PG基因表达载体时需在启动子和终止子之间反向插入PG基因。为使目的基因与质粒正确连接，并提高两者重组的成功率，需在扩增的目的基因两端分别引入____________（填“EcoRⅠ和EcoRI”“BamHⅠ和BamHI”或“BamHⅠ和EcoRI”）限制酶的识别序列。质粒上有标记基因，利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是___________。
(3)用含反义PG基因的农杆菌侵染番茄细胞，再通过___________技术培育出转基因番茄。在转基因番茄中，反义PG基因能抑制PG合成的原因是阻断了____________。

5 . 索马甜是从非洲竹芋中提取的一种天然甜味蛋白，具有甜度高、能量低等优点。研究人员利用生物技术，让索马甜基因在微生物和动植物细胞中表达来获得索马甜。回答下列问题：
(1)将索马甜基因导入大肠杆菌前，需用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞：若要从牛乳汁中获得索马甜，构建基因表达载体时，应将索马甜基因和______重组在一起，并且选用牛的______作为受体细胞。
(2)若将目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的____________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。利用农杆菌转化植物细胞时，______（填“正常”或“受损”）的植物细胞更有利于农杆菌的侵染。
(3)导入索马甜基因的植物细胞可通过脱分化形成____________，然后经过再分化形成转基因植株。为避免外源基因通过花粉传播给其他植物造成基因污染，可将外源基因导入植物细胞的______（填“细胞质”或“细胞核”）中。

6 . 下表列出了4种限制酶的识别序列及切割位点，其中↓表示切割位点；图1表示含目的基因的DNA结构与限制酶酶切图谱，其中β链为转录模板链；图2表示某质粒的结构与限制酶酶切图谱。现利用表中所列限制酶、图示目的基因和质粒构建基因表达载体，进而培育转基因植物。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	Sau3AⅠ	BclⅠ	EcoRⅠ
识别序列	-G↓GATCD-	-↓GATC-	-T↓GATCA-	-G↓AATTC-

(1)运用PCR技术扩增图1所示目的基因时，需要选用的引物是引物B和______。
(2)为利于目的基因的定向插入和减少随意连接，处理含目的基因的DNA片段时应选用______两种限制酶，图2中卡那霉素抗性基因的作用是____________。
(3)Ti质粒上的T-DNA具有可转移并整合到受体细胞______上的特性。培育转基因植物时，受体细胞可以是受精卵或分化的体细胞，而培育转基因动物只能将基因表达载体导入受精卵，原因是____________。
(4)转基因植物细胞经过______过程可培育成试管苗，运用的是______技术。

7 . 为快速培育抗除草剂的水稻（2N=24），育种工作者用下图所示方法进行育种，下列说法不正确的是（　　）

A．过程①花药离体培养的理论依据是细胞的全能性

B．过程②用γ射线照射单倍体幼苗，目的是提高幼苗的突变频率

C．过程③用除草剂喷洒单倍体幼苗，目的是筛选出抗除草剂的植株

D．通过过程④和过程⑤，培育出的抗除草剂植株属于四倍体植株

8 . 诱导性多能干细胞（iPS细胞）最初是日本科学家山中伸弥（Shinya Yamanaka）于2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4，Sox2，Klf4和c—Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞和胚胎APSC多能细胞的一种细胞类型。2007年11月，由中国科学家俞君英领衔的Thompson实验室和山中伸弥实验室几乎同时报道，利用iPS技术同样可以诱导入皮肤纤维母细胞成为几乎与胚胎干细胞完全一样的多能干细胞。下图1表示的是我国科学家获得iPS细胞，再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养的过程，图⒉表示研究人员利用小鼠（2N=40）获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，请回答下列问题：

(1)图1过程中，成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的_______________过程。
(2)研究人员将iPS细胞团注射人缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长，由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因可能是_______________。
(3)图2中，研究人员给小鼠丙注射促性腺激素，目的是_______________，再利用SrCl₂溶液处理后体外培养至_______________（填序号及名称），再筛选出_______________。
(4)研究发现，单倍体胚胎于细胞有发育全能性，该技术培育的单倍体动物可成为研究_______________（填“显性基因”或“隐性基因”）功能的理想细胞模型。为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用发育良好、形态正常的_______________胚进行分割。
(5)胚胎工程最后一道工序的实质是______________________。