1 . 清洁能源（又称绿色能源）是指不排放污染物、能够直接用于生产生活的能源，它包括核能和可再生能源。酒精是一种可再生的生物质能源，具有良好的开发和利用前景；农作物秸秆是生产燃料酒精的廉价且丰富的原料，其生产流程如下图。分析回答下列问题：
   
(1)农作物秸秆要先使用__________酶进行预处理，使之转化为发酵所需的葡萄糖。某研究组以一定的酶用量梯度进行了酶催化水解农作物秸秆的实验，结果如下图所示。据此分析，该研究的目的是__________。

   
(2)工业生产上需要对酶进行固定化处理。酶的固定化用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内，且不影响酶反应特性、能提高酶的稳定性、并可再回收的一类技术。据此推断，固定化酶技术的意义有__________（答出两点）。
(3)菌种的选育过程一般包括诱变、筛选、纯化三个步骤。用X射线照射，可引起酵母菌发生可遗传变异类型，其变异类型有__________。其中筛选和纯化菌种时，常用的培养基类型是__________其中筛选和纯（根据物理性质判断）。若要在纯化菌种的同时进行计数，应采用的接种方法为__________，该方法接种时所用的菌液量为__________。

2 . 下列不是用于包埋法固定化细胞的载体的是（       ）

A．琼脂糖

B．氯化钙

C．明胶

D．海藻酸钠

3 . 请根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：
(1)在制作腐乳、果醋和泡菜的过程中需要氧气的是制作_______ 的过程。
(2)在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式_______ 。果汁发酵后是否产生酒精，可以用_______ 来检验。
(3)分离培养酵母菌通常使用_______   （填“牛肉膏蛋白胨”、“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基。在微生物培养中，如果要检测培养基灭菌是否彻底，可以采用的方法是_______ 。
(4)用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为：每克样品中的菌株数=（C÷V）×M，其中C代表_______ 。对需要长期保存的菌种，可以采用_______ 的方法。
(5)在对照实验中设置对照的主要目的是排除实验组中_______ 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
(6)固定化酶技术常用的方法是_______和_______。
(7)果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______ 、_______ 和_______ 。
(8)利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用_______ 催化。PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性、_______ 和_______ 三步。在循环之前，常要进行一次_______ ，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。

4 . 制备固定化酵母细胞的实验步骤是：酵母细胞的活化→配制CaCl₂溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞，回答下列问题：
(1)这种固定化酵母细胞的方法属于_______法，一般固定化酶时不采用这种方法，原因是_______________________________________________。
(2)活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复至________________状态。
(3)加热溶解海藻酸钠时需注意用________________加热，然后将溶化好的海藻酸钠溶液________________后，才能和酵母混合均匀。
(4)海藻酸钠的浓度对本实验结果影响较大，若浓度过高，则___________________，刚形成的凝胶珠需要在氯化钙溶液中浸泡一段时间，其目的是________________________。

5 . 下列关于利用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的说法错误的是（       ）

A．包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素等

B．包埋的酵母细胞偏多导致形成的凝胶珠颜色偏浅

C．若CaCl2溶液浓度过高，会造成凝胶珠太硬不利于发酵

D．固定化酵母细胞进行发酵需控制葡萄糖溶液的浓度

6 . 常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。请分析回答下列问题：
(1)在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是________（填序号）。       
①酒精灯   ②接种环   ③高压蒸汽灭菌锅   ④培养皿
(2)将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以______为碳源的培养基中，________（填“有氧”或“无氧”）条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
(3)将搜集到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计算每克样品中的菌株数的公式为（C÷V）×M，其中 C 代表______________________________。对于需要长期保存的菌种，可以采用___________的方法。
(4)纯化后的酶 A 可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其相对分子量_____________。
(5)生产上常将酶 A 固定化以反复利用。部分操作如下：将酶 A 固定在_______（“溶于水”或“不溶于水”）的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶 A。

7 . 酶的固定化是20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。如图甲、乙、丙为部分研究结果。下列有关叙述中，不正确的是（　　）

A．由甲图可知，固定化酶比游离酶对温度变化适应性更强

B．由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好

C．由丙图可知，固定化酶一般可重复使用3次，之后若继续使用则酶活力明显下降

D．固定化酶的酶活力较高，主要原因是增加了酶与底物的接触面积

8 . 固定化细胞对酶的影响最小，根本原因是（       ）

A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程

B．固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用

C．催化反应结束后，固定化细胞能被吸收和重复利用

D．细胞结构保证了各种酶在细胞内的化学反应中有效地发挥作用

9 . “通山慈口橘子”全市闻名，某果汁股份有限公司就是以橘子为原材料，主要生产浓缩果汁、果酒、果干、香精和果胶等产品。工厂利用橘子生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程如下图所示，请分析回答：

（1）用橘子加工成果汁的过程中，为了提高橘子的出汁率并使果汁变得澄清，在预处理时需要加入果胶酶，果胶酶可以将果胶分解成___________，同时为了使其得到充分利用，节约成本，需要控制好酶的用量，探究果胶酶的最适用量的基本思路是_____________。
（2）为了进行果酒的发酵生产，通常先分离纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵。
①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养基通常采用___________法，若采用稀释涂布平板法进行接种和计数，该法计数的值_________（填“大于”或“小于”）显微镜直接计数的值，原因是__________________________________________。
②在使用液体培养基扩大培养的过程中，需要放在摇床上进行振荡，目的是_____________________。
③制备固定化酵母细胞多采用___________法固定化。

10 . 某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定α－淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验如下表(假设：加入试管中的固定化淀粉酶量与普通α－淀粉酶量相同)：

序号	操作步骤	1号试管	2号试管
1	体积分数为5%的固定化淀粉酶	＋	－
2	体积分数为5%的α－淀粉酶溶液(2 mL)	－	＋
3	质量分数为25%的淀粉溶液(4 mL)	＋	＋
4	60 ℃水浴保温5 min	＋	＋
5	滴加碘液，观察是否变蓝色	＋	－

实验结果表明，1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是

A．实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性

B．淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶充分接触

C．水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉完全水解

D．实验顺序错误，应先向试管中加入碘液后再保温