1 . 下图所示为培育农作物新品种的一种方式。下列说法正确的是 (　　)。

A．②③过程分别称为细胞分裂和细胞分化

B．该育种与传统杂交育种相比，最大的优点是繁殖速度快

C．该育种过程说明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能

D．该育种方式涉及基因工程、胚胎工程和细胞工程

2 . 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作 为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图。

据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是________________。   
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_____存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________，原生质体经过_____再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和_____植株的根尖，制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的_____和___________。
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组 DNA 进行 PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．下图是用该引物对双亲及再生植株 1-4 进行 PCR 扩增的结 果。据图判断，再生植株 1-4 中一定是杂种植株的有___________。

（6）对杂种植株进行_____接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

3 . 三白草和鱼腥草是不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。

(1)图1中过程①通常采用__________酶去除细胞壁。过程②可体现细胞膜具有__________特点，该过程除了可利用聚乙二醇诱导融合外，还可采用的化学法有____________等，杂种原生质体融合完成的标志是__________。
(2)用红色、绿色荧光分别标记三白草、鱼腥草原生质体后，诱导融合（带荧光的原生质体仍能融合和再生），在荧光显微镜下会看到_____________种颜色的融合细胞（仅考虑两两融合情况）。
(3)图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是__________（填“植物组织培养”或“植物细胞培养”）。
(4)由图2可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度约为___________个/mL。
(5)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。

组别	A组	B组	C组
实验处理	三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物	三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物	蒸馏水
	每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的__________

表格中实验处理后，应检测各组小鼠的________，若实验结果为_______，则支持利用原生质体融合技术可将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。

4 . 运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中能形成愈伤组织的是
①植物组织培养 ②植物体细胞杂交 ③动物细胞培养 ④转基因植物的培育

A．①②④

B．①②③

C．①③④

D．①②③④

5 . 下列关于现代生物科学技术与应用的叙述中，错误的是（       ）

A．囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的

B．通过植物组织培养获取细胞产物的过程中，需对培养基进行灭菌处理

C．在胚胎分割移植前，可用分割针取饲养层细胞鉴定性别

D．制作人工种子时，胚乳中可以添加农药，固氮菌，抗生素，植物激素等成分

6 . 下列生物技术成果说明细胞具有全能性的是（       ）

A．用花粉培育单倍体植株

B．通过组织培养技术生产紫杉醇

C．用培养的人细胞构建人造皮肤

D．通过核移植、胚胎移植培育克隆羊

7 . 下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是（       ）

A．用人工薄膜将愈伤组织包裹可形成人工种子

B．利用植物组织培养技术可实现紫草的细胞产物工厂化生产

C．对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种

D．利用植物组织培养技术培育的脱毒苗具有不含或很少含病毒的特点

8 . 下面是“白菜—甘蓝”杂种植株培育过程示意图。下列叙述正确的是(       )

A．如将纯种的白菜和甘蓝的卵细胞分别制成原生质体，按相同的方法操作也可得到与图示相同基因型的杂种植株

B．可以通过观察在 0.3 g/mL 蔗糖溶液中是否发生质壁分离来判断白菜原生质体的死活

C．该培养过程中可能发生细胞分化、染色体变异、基因突变

D．植物组织培养和动物细胞培养的培养基、培养目的不完全相同，但诱导细胞或原生质 体融合的方法完全相同

9 . 下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是

A．利用花药离体培养得到单倍体植株

B．利用基因工程培养抗虫棉的棉花植株

C．利用细胞工程培养“番茄——马铃薯”杂种植株

D．利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株

10 . 研究人员为了制备烟草（四倍体，4n=48）的叶片细胞与紫罗兰（二倍体，2n=14）的紫色花瓣细胞的原生质体，并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株，进行了如下实验：
一、原生质体的制备：酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号                  项目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	0	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	2	1	0．5	0．5	0．5
果胶酶液（mL）	0	0	0	0．5	0	0
蜗牛酶液（mL）	0	0	0	0	0．5	0
纤维素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0．5
实验结果（绿色深浅程度）	一	一	—	++＋	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）。
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是_____________________________，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有_________等多种酶。该实验中____________是空白对照组，其设置意义是___________________。
（3）如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验，其检验的方法可以是_________________________________________________________________________。
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液：
三、原生质体融合：将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后，离心10min，将分离得到的融合成团的，原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后，凝固形成很薄的平板。．再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析：
（4）步骤三中，若所有的原生质体均两两融合，则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是____________________________。
（5）只利用显微镜观察，不借助其他手段_________（能，不能）鉴别出杂种融合的原生质体，你所依据的观察现象是____________________________。
四、制取紫罗兰烟草的人工种子：
（6）制备人工种子时，用人工薄膜包裹__________若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株，杂种植株为___________倍体。