1 . 回答下列问题：
I、我国绒山羊所产的羊绒因品质优秀被誉为“软黄金”而畅销全球。胸腺素β4（Tβ4）是动物体内一种分布广泛的多肽，可促进动物毛发生长。研究者利用 基因编辑技术将Tβ4基因定点整合到绒山羊基因组中，获得新型绒山羊，部分操作过程如图所示。

(1)若要通过PCR技术对Tβ4基因进行扩增，关键是设计Tβ4基因对应的_____。高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一 ，在制备高质量DNA模板时，必须除去蛋白质，方法有_____（写出两种方法）
(2)扩增后的Tβ4基因与质粒结合构建基因表达载体的目的一是使目的基因_____， 二是使目的基因_____。
(3)图 中 X 为_____细胞，获得的重构胚（重组细胞）需要继续培养至囊胚或桑椹胚阶段，再将其移植到受体母羊体内，从而获得T4基因定点整合的羔羊。在胚胎移植前需要对受体母羊用激素进行_____处理，其目的是_____。
Ⅱ、在草莓生产上，传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降 低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过
程如下图所示。请回答下列问题：

(4)微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取根尖或茎尖作为外植体，其依据是_____ 。
(5)过程①到过程②需要更换新的培养基，其原因是_____。
(6)过程②要进行照光培养，其作用是_____。
(7)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮包装得到人 工种子，这种人工种子的种皮应具有透气性，有利于_____。
(8)与常规的种子繁殖方法相比，植物微型繁殖技术的特点有_____ （答出2点即可）。

2 . 科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示，请据图回答下列问题：

(1)植物体细胞杂交依据的生物学原理有___________________________。
(2)在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，（只考虑时细胞两两融合的情况）当观察到融合的细胞表面____________________可判断该原生质体是由番茄原生质体和马铃薯原生质体融合而成的。要促进杂种细胞分裂生长，培养基中应有__________和__________两类激素。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，二倍体，马铃薯细胞内有n条染色体，四倍体，则“番茄——马铃薯”杂种植株是__________倍体，“番茄一马铃薯”杂种植株细胞在有丝分裂后期含________条染色体。
(4)如果形成的植株来源于两个番茄的原生质体融合而成的杂种细胞，那么更常用且有效地得到这样的番茄植株的处理方法是_____________________________。
(5)马铃薯、草莓等都是无性生殖的作物，它们感染的病毒容易传给后代，最终导致作物产量降低，品质变差。下图是利用草莓外植体（即离体的器官，组织或细胞）经植物组织培养技术培育脱毒草莓苗的过程。
外植体愈伤组织胚状体脱毒苗→草莓
①和②分别表示__________、__________。切取草莓的一定大小的茎尖作为外植体进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，原因是__________________________。

3 . 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。女性怀孕后尿液中含有 HCG。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。

材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群能合成并分泌_________（填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行________及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是________。选择阳性孔中的细胞继续植入小鼠腹腔内进行体内培养，可从_______中提取到单克隆抗体。
(2)人绒毛膜促性腺激素（HCG）作为抗原，定期间隔免疫小鼠，目的是_________，经选择培养筛选出的杂交瘤细胞具有__________特点。
(3)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低_________。
(4)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到_________阶段，然后从________（填细胞器）中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到__________，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中。
(5)与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点有_________。

4 . 干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。下图是利用基因工程技术生产人类干扰素的过程，请回答：

(1)利用人参愈伤组织细胞产生干扰素的技术称为_______，在这个过程中利用到了愈伤组织_______
(2)干扰素基因与质粒使用限制酶HindIII和BamHI剪切，其目的是_______。
(3)采用农杆菌转化法将干扰素基因成功导入人参细胞的原因是________。
(4)利用PCR技术扩增目的基因时，设计了如下引物：

请问这两组引物设计是否合理，并简述原因。______

5 . 下图是培养耐盐植株的实验流程，回答下列问题。

(1)用Ƴ射线处理时，选择愈伤组织作为实验材料的原因是________，处理2中添加的物质X为______。
(2)经植物组织培养得到的植株，一般可保持原品种的______，这种繁殖方式属于______繁殖。
(3)愈伤组织经______过程可获得耐盐植株，研究发现，愈伤组织的中层细胞是根或芽再生的源头干细胞，其在不同条件下，通过基因的特异性表达调控生长素、细胞分裂素的作用，表现出不同的效应（见下表）。

基因表达产物和相互作用	效应
WOX5	维持未分化状态
WOX5+PLT	诱导出根
WOX5+ARR2，抑制ARR5	诱导出芽

分析表格推测WOX5的作用是__________，WOX5+PLT可能有利于愈伤组织中______（填激素名称）的积累。ARR5的作用可能是______（增强/抑制）细胞对细胞分裂素的敏感性。

6 . 紫草是一种重要的药用植物，其根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。它们具有抗菌、消炎、活血、诱导癌细胞凋亡等功效，同时也是一种天然染料。科研人员利用紫草新生的营养芽为外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中进行悬浮培养，以获得更多的紫草宁。下图表示获得紫草宁的2种工艺路线。
   
(1)若要通过植物组培获得脱毒紫草植株，应优先选择紫草植株的_______________部位作为外植体，原因是________(答两点)。
(2)外植体需经_________处理，常用的试剂有________(答出两种即可) ， 之后再用_____多次冲洗。
(3)在设计紫草植物组培培养基时，可以目前使用最广泛的_____ 培养基为基础， 调整某些成分使之适宜紫草组培不同阶段的需求。培养基中需要加入蔗糖，蔗糖的作用是______(答出两点)。
(4)研究人员将培养的愈伤组织分别接种到含有不同比例 NAA(生长素类似物) 和 KT(细胞分裂素类似物)的培养基中培养。实验处理与结果如下表

编号	含量(mg/L)		分化情况
	NAA	KT
1	0	0	不分化
2	0	2	分化芽
3	2	0	分化根
4	0.2	2	分化芽
5	2	0.2	不分化
6	0.02	2	分化芽
7	2	0.02	分化根

依据实验结果，可以得出的结论是：植物生长调节剂(NAA和 KT) 的比例会影响愈伤组织的分化， 具体表现为________。
(5)通过高产细胞株提取细胞培养物途径中，紫草细胞的生长曲线如下图所示：
   
采用该途径时，需用______处理愈伤组织以获得单细胞，对筛选出的高产细胞株进行_______振荡培养。实验结果表明：接种后第 3 天左右，紫草宁及其衍生物开始形成； 对数生长期及直线生长期，紫草宁的量逐步上升；静止期，紫草宁形成速度加快至最高水平。这说明细胞分裂生长缓慢_____(填“有利于”或“不利于”) 目的产物的形成。与通过组培获得紫草植株再提取紫草素的途径相比， 上述途径的优点是______。

8 . 如图为科研人员利用植物细胞培养技术获取紫杉醇的流程图。

   

(1)紫杉醇是红豆杉体内的一种_______（填“初生”或“次生”）代谢物，该物质_______（填“是”或“不是”）生物生长所必需的。利用植物细胞培养技术进行细胞产物的工厂化生产_______（填“能”或“不能”）体现植物细胞全能性，理由是________。
(2)①过程为_______，在此过程中，已经分化的红豆杉细胞将失去_______，转变成未分化的细胞。
(3)②过程将愈伤组织分散成单个细胞，需使用_______酶。
(4)与从红豆杉的树皮和树叶中提取紫杉醇相比，利用植物细胞培养技术获得紫杉醇的优点是_______（答出1点即可）。

10 . 中国传统名花中的兰花是高洁典雅的象征，通常以“兰章”喻诗文之美，以“兰交”喻友谊之真。也有借兰来表达纯洁的爱情，“气如兰兮长不改，心若兰兮终不移”、“寻得幽兰报知己，一枝聊赠梦潇湘”。因此深受人们的喜爱，传统的人工繁殖兰花的方法是分株繁殖和用种子播种，随着科学技术的进步，人们开始采用“植物组织培养繁殖兰花”。回答下列相关问题：
(1)与传统的人工繁殖相比，植物组织培养技术有哪些显著优势：__________________________特性、高效快速实现种苗的大量繁殖、不受季节、气候和地域的限制等。
(2)生产实践中一般采取兰花的芽通过植物组织培养技术活动新个体，植物组织培养技术的原理是_____________，原因是细胞中含有__________________________。
(3)有研究员在植物组织培养过程中，发现愈伤组织在诱导生根的培养基上未形成根，但分化出了芽，原因可能是培养基中__________________________。
(4)有人想到利用韭菜和兰花植物通过体细胞杂交技术解决兰花生根速度慢、幼苗生存能力弱的问题，可取韭菜和兰花植株的叶片，先用_____________酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞经过_____________培养形成愈伤组织，然后经过_____________形成完整的韭菜—兰花植株体。与自然状况下的杂交育种相比，植物体细胞杂交的主要意义是__________________________。