1 . 长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近几年发展起来的细胞工程技术和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图回答：

(1)克隆牛G的培育过程与试管牛E的培育过程相比特有的技术手段是_____________技术，这两种繁殖动物的方式相比，实质性的区别为前者是____________，后者是___________。
(2)进行胚胎工程操作时，首先对供、受体母牛进行选择，并用激素进行___________处理。一般还需用______________激素对供体母牛做超数排卵处理。
(3)受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及__________等物质。
(4)良种母牛B的胚胎能在受体母牛D的子宫内存活的生理原因是什么？__________
(5)培育出的克隆牛G的基因来源于_____________。
(6)为大量获得试管牛E，可于________________时期将早期胚胎进行分割后移植。

2 . 科研人员把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，将胚胎移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪，现将两种技术进行比较。回答下列问题：

(1)图中过程①②③④是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程，获得核移植克隆猪的技术流程是_____（填序号）。
(2)孤雌生殖克隆猪仍然是二倍体生物，但可能由于缺失_____方亲本基因，其生长发育中出现多种问题。
(3)体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，使用_____处理，使其超数排卵，收集并选取_____期的卵母细胞。
(4)早期胚胎移植时，必须移植到同种且_____相同的其他雌性动物子宫中，才可能获得成功。从免疫学角度分析，早期胚胎能够在受体内存活的主要生理基础是_____。

3 . 动物的某种退行性神经疾病由基因t突变为基因T导致。随着生物工程技术的发展和基因编辑（CRISPR/Cas9）技术的出现，为治疗该疾病提供了如下新思路。回答下列问题：

(1)利用CRISPR/Cas9编辑基因时，Cas9蛋白依据sgRNA片段（不同的sgRNA可以识别不同的DNA序列），能精准识别并切割动物纤维细胞中的致病基因T，并在DNA连接酶的作用下将正常基因t连接到染色体DNA的相应位置上，获得不含致病基因T的动物成纤维细胞。可见，sgRNA片段能够精准识别致病基因T的核苷酸序列的原因是_____________，CRISPR/Cas9还具有_______________________________的作用。
(2)过程①所利用的生物技术是_______________，过程②的培养条件十分苛刻，需要无菌、无毒环境，充足的营养物质、适宜的温度和pH；培养时，对气体环境的要求是_______________。过程④的培养基中需要添加__________，以促进ES细胞的增殖分化。
(3)利用上述思路治疗该退行性神经疾病，理论上不会产生免疫排斥反应，原因在于__________________。

4 . Ⅰ：美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题：

   

(1)步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射__________和_________。步骤②所用的SP2/0细胞的特点是____________。
(2)吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是___________________。
Ⅱ：科学家利用动物细胞培养和核移植技术获得克隆动物的流程如下图所示。请回答下列问题。

   

(3)从供体身上取下的器官或组织进行细胞培养时，首先要用_____________处理一段时间使细胞分散开来。细胞培养过程中需要定期更换培养液，目的是________________。
(4)采集的卵母细胞在体外培养成熟，通过显微操作除去细胞核，然后用_____________法与供体细胞构成重组胚。

5 . 生物工程技术在农牧业生产、医药卫生等领域有广泛的用途。请回答相关问题。
(1)我国体细胞克隆猴“中中”和“华华”的诞生再次说明了_____具有全能性。植物组织培养的全过程，证明了植物体细胞具有全能性。所谓全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生___或分化成其他各种细胞的_____。
(2)利用植物组织培养技术制造的人工种子具有天然种子不可比拟的特点，人工种子具有的优点：能保持优良品种的_____，生产上不受季节、气候和地域限制，方便_____等。
(3)动物细胞融合和植物原生质体融合的原理都是_____，不同的是诱导动物细胞融合时常用的方法是用_____诱导。
(4)许多重要的生物制品，如病毒疫苗、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞培养技术来大规模生产。     当细胞分裂生长到表面相互接触会发生接触抑制，此时需要用_____处理分散成单个细胞，分瓶继续培养。细胞培养液应定期更换，以防止_____对细胞自身造成危害。
(5)生物技术革命为人类带来了巨大的社会效益和经济效益，在某些方面对人们传统的观念也造成了巨大的冲击。以下做法中明显违背我国相应法律法规或伦理道德的有_____。
①转基因农产品的直接加工品，在产品外包装中标注“加工原料为转基因”标识再上市
②为了避免妊娠过程给自身带来影响，选择用“试管婴儿”技术，并找人代孕以得到孩子
③在实验室中进行冠状病毒基因改造研究，以备在发生战争时用于投放他国
④养牛场中运用胚胎性别鉴定技术，筛选雌性胚胎进行胚胎移植以扩大高产奶牛数量

6 . 现代社会压力使人类的作息时间很难严格遵循于体内的生物钟。越来越多的人面临着生物钟紊乱的困扰，导致失眠、睡眠中断、日间过度嗜睡、与人交流出现障碍等问题。为推动生物钟紊乱相关问题的研究，2019年我国科研团队获得了5只昼夜节律基因（BMAL1）敲除的克隆猴，如图1所示为克隆技术流程，图2所示为胚胎发育经历的部分时期，请据图分析回答：

(1)图1使用的生物技术有_____（请写出三种）；哺乳动物利用胚胎细胞核移植较体细胞核移植更易成功，原因是_____。
(2)体外培养重构胚时，需提供适宜的气体环境等条件，其中CO₂的主要作用是_____。
(3)为判断获得的是否是昼夜节律基因敲除克隆猴，可以通过利用分割针对图2中的_____（填写图中字母）的_____基因进行分析确定。这5只克隆猴不是对体细胞核供体进行了100%的复制，这是因为_____（请写出两点原因）。
(4)由于早期胚胎细胞具有很强的分裂能力，并保持着_____，所以可对图2中的发育良好的_____进行分割，进一步获得更多遗传性状相同的后代来进行遗传学研究。

7 . 如图为经体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程。请回答下列问题：

（1）A细胞是_______，在进行体外受精前要对精子进行_______处理。
（2）进行胚胎分割时，应选择发育到_______时期的胚胎行操作。
（3）②指的是_______。
（4）通过同一胚胎的分割移植培育出的小牛的性别_______。
（5）通过体细胞克隆技术培育的小牛，其性别取决于_______，该繁殖方式属于_______。
（6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意_______。
（7）受体母牛必须和供体牛属于_______。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_______。

8 . 细胞融合又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞融合形成单个细胞的过程。下图为细胞融合的一般过程，请据图回答：

（1）若A、B为植物细胞，在细胞融合之前已用__________（物质）处理，除去了细胞壁；A、B到C的过程中，常用的物理方法是_____________（至少写两个）。形成的D细胞还要应用_______技术把D培养成植株。
（2） 若A、B是动物细胞，一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，然后用_______酶处理使其分散开来；从A、B到C的过程中，常用的诱导剂是____。
（3）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了________；图中B为_____________________。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为克隆，这种细胞的特点是___________________________________。
（4）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有_____种（只考虑两个细胞的相互融合）；用来培养的D细胞应该是_________，获得D后，常用的培养方法在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

9 . 科学家利用基因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。基本流程是：从荧光水母中获取目的基因，与有关载体重组，将其导入猪胎儿的成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核植入去核的卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。
（1）成纤维细胞贴壁生长分裂到表面相互接触时，就会停止分裂，这种现象叫做细胞的___________________。若将成纤维细胞进行传代培养，操作时首先用______________________________处理成细胞悬液。
（2）作为核移植受体细胞的去核卵母细胞一般处在____________期。供体细胞注入去核的卵母细胞中，常通过__________（物理方法）激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）培养重组细胞时，将细胞所需的营养物质按其种类．数量严格配制而成的培养基称为___________培养基，但通常在培养基中还需要加入适量的_________________________等天然成分。细胞培养应在含5%的CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的主要作用是____________________。为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的____________。

10 . 下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答：

（1）①的名称是_________，②所示的生物技术名称是____________。
（2）重组细胞A培养过程所用的培养液与植物组织的培养基从成分上主要区别是前者必须含有____________________ 。重组细胞A培养过程中所需要的基本条件包括充足的营养、__________、_________、气体环境。并且用一定的方法激活其完成细胞分裂和发育进程，该过程通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它含有_______________的物质。
（3）图中③所示的结构名称是________ 。其在形态上，表现为体积小，细胞核______，核仁明显；在功能上具有_________。
（4）④所示的生物技术名称是_________________________。
（5）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是__________________。该种基因治疗所属类型为 ______________________ 。