32. 多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如下图。据图回答下列问题:
(1)若已获取PG的mRNA,可通过
_____方法获取PG基因。PCR技术扩增目的基因的前提是
_____,以便根据这一序列合成引物。
(2)该质粒含14000碱基对(14kb),若同时使用两种限制酶切割,产生的片段有5kb、7.5kb、1.5kb,则只用限制酶BamHⅠ切割时产生的片段长度分别是
_____和
_____。
(3)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有
_____的培养基进行筛选。如果想通过实验鉴别细胞壁是否再生,可将其置于质量分数为30%的蔗糖溶液中,观察细胞
_____现象进行判断。
(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与
_____互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达,使番茄果实的保质期延长。