【推荐1】P24是HIV病毒颗粒的主要结构蛋白（大小约为26KD），是P24基因的表达产物。P24单克隆抗体在HIV感染的诊断、治疗等方面有重要意义，P24单克隆抗体的制备主要包括三个阶段：利用基因工程生产P24蛋白；利用细胞融合技术生产单克隆抗体；单克隆抗体活性的鉴定。请回答下列问题：
(1)提取HIV的总RNA，经___________过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出P24基因的cDNA，原因是___________。
(2)在构建重组质粒时，需对质粒和P24基因的cDNA用BamHI和XhoI进行双酶切，双酶切的优点是__________研究发现，P24基因的cDNA缺乏这两种限制酶的识别序列。为此，在设计PCR引物时，需要___________。
(3)将重组质粒（含卡那霉素抗性基因）导入宿主菌体细胞后，进行的部分操作及结果如下图所示。图中①②两处的接种方法__________（填“相同”或“不同”），在固体平板培养基上能生长的菌落不一定能合成P24，其原因是__________。蛋白凝胶分析结果图中，1为蛋白Marker，2为不含物质A的菌液，3为含物质A的菌液，实验结果说明P24较高的是__________（填“2”或“3”），据此推测物质A的作用是__________。

(4)用P24蛋白对小鼠以静脉注射的方式进行加强免疫3次，其目的是__________。取免疫后小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞，用___________促融，并经HAT培养基筛选获得杂交瘤细胞。进一步筛选时，需先对含杂交瘤细胞的培养液进行稀释，然后用抗原—抗体杂交技术进行检测，筛选出具有__________特性的细胞。再将所得细胞进行克隆培养，进而获得P24单克隆抗体。克隆培养的关键是__________。
(5)T细胞被HIV感染后，会与未被感染的T细胞发生融合，从而形成多核巨细胞，多核巨细胞不久死亡又释放出大量新病毒。多核巨细胞的数量可作为P24单克隆抗体活性鉴定的指标。请完善以下鉴定P24单克隆抗体活性的实验思路：
①将未被感染的T细胞等分为三组，处理如下：
A组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+细胞培养液；
B组：HIV感染的T细胞+未被感染的T细胞+_______；
C组：未被感染的T细胞+细胞培养液；
②48小时内每隔8小时测定三组的多核巨细胞的数量，并进行统计分析。若P24单克隆抗体能有效抑制多核巨细胞的形成，请预测实验结果____（以坐标曲线图的形式画出）。

【推荐1】异丁醇具有燃值高、能量密度高等优点，其开发和利用对优化我国能源结构和保护环境有非常重要的战略意义。基于酿酒酵母的发酵途径（图甲）和图乙的质粒，研究者构建了一种表达载体pUC18，用于过表达ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以实现异丁醇的大规模生产。已知氨苄青霉素能抑制细菌细胞壁的形成。据此回答下列问题：

(1)图乙质粒上有多个限制酶切位点，作用是____________。研究人员先用pUC18转化经_________（处理方法）的大肠杆菌，以便筛选、鉴定扩增重组质粒。重组质粒上有_________，所以能在大肠杆菌中扩增。
(2)将环状载体pUC18导入酿酒酵母时，一般会将其进行酶切得到线性化载体，随后再将其导入受体细胞。根据所学的知识推测酶切得到线性化载体的目的是______________。
(3)提取成功构建的表达载体并导入不能合成组氨酸的酿酒酵母菌株，将菌株接种在培养基中以获得单菌落，该过程称为微生物的______培养。培养基中需要添加的物质有_____（用下列字母填写：a．组氨酸、b．氨苄青霉素、c琼脂）。
(4)异丁醇的大量积累会伤害细胞，研究人员给该工程菌导入一个经改造的光敏蛋白基因，使工程菌对特定的蓝光敏感。进行不同的光照处理，使其在异丁酵产生阶段和生长繁殖阶段进行切换，结果如下图丙所示。

注：5 / 10/ 20h pulse分别代表在黑暗条件下每隔5、10、20h发出15s和65s的蓝光脉冲30min
①对照组的酵母菌需要导入________________。
②以葡萄糖为碳源，利用该转基因酿酒酵母进行发酵时，若想进一步提高其异丁醇产量，综合图甲和图丙信息，分别写出进一步优化菌株和工艺的措施（各一点）___________。