【推荐1】表观遗传调节异常是肿瘤发生发展的重要因素之一，N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物mRNA上最常见的一种修饰。研究发现，胃癌细胞中存在m6A去甲基化酶（ALKBH5）过表达和STC2（癌症相关基因）mRNA的m6A修饰水平降低的异常现象。科研人员利用基因工程技术实现ALKBH5基因沉默和STC2基因的过表达，以研究ALKBH5介导的m6A甲基化修饰对胃癌细胞迁移的影响。
      
注：A、B、C、D为四种引物序列；BamHⅠ、HindⅢ、SacⅠ为限制酶
(1)已知STC2基因的α链为转录的模板链，据图1分析，利用PCR扩增目的基因时，需要在引物________的5'端添加BamHI识别序列和强启动子序列，在引物________的5'端添加SacI识别序列。
(2)为确保目的基因正确插入质粒，需要选择________限制酶切割质粒。将重组质粒导入大肠杆菌体时，可利用潮霉素和卡那霉素筛选出导入重组质粒的大肠杆菌，试简要表述筛选思路：____________。
(3)研究人员分别用不同方式处理胃癌细胞，并测得胃癌细胞迁移标志蛋白含量如下：

   
根据结果推测ALKBH5基因影响胃癌迁移的机理是_______________________。

【推荐3】重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，下图为通过乳腺生物反应器产生rhTPO的相关过程。回答下列问题：

(1)乳腺生物反应器的原理是rhTPO基因与________的启动子等调控组件构建成基因表达载体，通常采用________技术将重组质粒导入受精卵，获得转基因动物。最终使rhTPO基因在转基因动物的乳腺中表达，通过分泌乳汁获得rhTPO。
(2)采用SRY—PCR方法对早期胚胎进行性别鉴定，样本细胞取自________，以Y染色体中含有的特异性SRY基因为探针，通过________方法进行胚胎的性别鉴定。
(3)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞需要在含卡那霉素的培养基上进行，原因是________。

【推荐1】胰岛素是治疗胰岛素依赖糖尿病的特效药物，但是天然胰岛素在人体内的寿命具有几个小时，通过蛋白质工程改变胰岛素的空间结构，以延长岛素的半衰期，可以得到长效胰岛素。如图是用蛋白质工程设计长效胰岛素的生产过程

（1）基因工程中限制酶切割后的运载体与目的基因能再次拼接的理由_______________。
（2）在基因工程中获取目的基因的方法除图中方法，还有利用PCR技术扩增和_______。
（3）上述基因工程中除质粒外，______也可作为运载体。
（4）构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键，图中构建新的胰岛素模型的主要依据是_____________________。
（5）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大旸杆菌作为受体细胞，原因是________________________。
（6）新的岛素为什么还要加工、修饰？____________________________。

【推荐3】将苏云金芽孢杆菌Bt毒蛋白基因导入棉花细胞中，可获得转基因抗虫棉，其过程如图所示：

（1）过程①所需要的酶是____________，卡那霉素抗性基因的作用是_______________________。
（2）过程③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让重组Ti质粒上的__________________转移进入棉花细胞，并整合到棉花细胞的___________上。
（3）若要检测转基因棉花细胞中Bt毒蛋白基因是否转录出了mRNA,采用________________________技术，用_______________做探针；若要鉴定转基因棉花是否被赋予抗虫特性，需要做____________实验。
（4）种植转基因抗虫棉可以大大减少_____________的使用，以减轻环境污染。

【推荐1】新冠病毒是一种+RNA（正链RNA）病毒，其+RNA与N蛋白结合，构成病毒的重要成分。病毒借助囊膜上的S蛋白与宿主细胞表面的ACE2受体结合入侵细胞。新冠病毒侵染、增殖的过程如右图所示。回答下列问题：

(1)进入宿主细胞的新冠病毒释放+RNA，+RNA指导合成RNA聚合酶的过程称为_____，进行该过程的场所是_____。新冠病毒无法直接复制其+RNA，原因可能是RNA复制遵循碱基互补配对原则，_____。
(2)分析上图可知，新冠病毒的+RNA的功能是作为_____、_____、_____。
(3)病毒的N、M、E、S蛋白分布在囊膜上，结合上图分析，这些蛋白质经过加工后镶嵌到宿主细胞的_____膜上，最终形成病毒的囊膜，装配形成的子代病毒经过_____方式释放到细胞外。

【推荐2】新冠病毒感染人体后，可以通过血管紧张素转化酶2（ACE2）进入细胞。

(1)尝试解释肺组织成为新型冠状病毒的主要入侵对象的原因：_____________________。
(2)发热是该病毒感染的一个重要表现，人体体温调节的中枢_______通过__________等信号分子调节体温。
(3)“细胞因子风暴”是引起许多新冠患者死亡的重要原因，其主要机理是：新型冠状病毒感染后，迅速激活病原性T细胞，产生大量淋巴因子如：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子GM-CSF和白介素6等因子。GM-CSF会进一步激活CD14+CD16+炎症性单核细胞，产生更大量的白介素6和其他炎症因子，从而形成炎症风暴，导致严重肺部和其他器官的免疫损伤。可见该过程存在________调节。
(4)对于“细胞因子风暴”的治疗可用糖皮质激素，由图分析其原理：_________，该激素与胰岛素具有拮抗作用，推测其可能的副作用：________________。
(5)抗白细胞介素6受体的单抗类药物—“托珠单抗”，可以阻断新冠肺炎炎症风暴，该药物也可用于治疗________（自身免疫病/免疫缺陷病）。
(6)针对新冠的疫苗有DNA疫苗、mRNA疫苗、蛋白质疫苗等，其机理都是通过病毒特异的抗原蛋白刺激机体产生_____细胞，在检测该疫苗有效性和安全性的的动物实验中，考虑到个体差异，为了提高实验的可重复性需要注意__________（写出两个方面）。检测有效性的最简单方法是__________________。

【推荐3】冠状病毒属于具外套膜的正链单股RNA病毒。新型冠状病毒可通过其表面的刺突状糖蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞表面的ACE2蛋白特异性结合，侵入人体，引起肺炎。患者往往出现干咳、乏力、发热，会出现缺氧低氧状态，严重时导致急性呼吸窘迫综合征。根据所学知识，回答下列问题：
（1）新型冠状病毒主要通过呼吸道侵入人体。鼻腔中的黏膜是抵御病原体入侵的第__________道防线。
（2）已知青霉素的作用是抑制原核细胞细胞壁的形成,从而达到灭菌的作用。当人体感染新型冠状病毒时，____（填“能”或“不能”）用青霉素进行治疗。少数人注射青霉素后会出现胸闷、气急和呼吸困难等症状，严重者发生休克，这种现象是人体免疫功能失调中的_______________________。
（3）对新型冠状病毒疑似患者的检查，分为病原学检查和血清学检查：采集鼻咽拭子主要用于病原学检查，检测病毒的_________________；采集血液样本主要用于血清学检查，检测_______________________________。
（4）2021年初，我国开始逐步推进新型冠状病毒疫苗免费注射工作。在疫苗接种的过程中，当兴奋传到____时人会产生痛觉。注射疫苗后，部分人出现轻度发热现象，从体温调节的角度说明发热的原因是_____。
（5）针对新冠肺炎的疫苗有DNA疫苗、mRNA疫苗、蛋白质疫苗等，其机理都是通过病毒特异的抗原蛋白刺激机体产生_____________细胞，当人体再次接触这种抗原时，此类细胞能迅速增殖分化。在检测该疫苗有效性和安全性的动物实验中，考虑到个体差异，为了提高实验的可重复性需要注意_______________________________（写出两个方面），检测有效性的最简单方法是__________________。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）科研人员从长期受到废弃油脂污染的淤泥中得43%种油脂降解菌A和B，现对2种油脂降解菌进行培养分析，请回答下列问题：
(1)科研人员配置了含有0.3%NH₄NO₃、0.05%KH₂PO₄、0.05%K₂HPO₄、0.02%MgSO₄、微量元素液和含废弃油脂等的培养基，从功能上来看，该培养基属于____________培养基，加入0.05%KH₂PO₄、0.05%K₂HPO₄的目的是____________。
(2)如图所示，科研人员称取了5g淤泥样品，将其加入45mL无菌水中，进行梯度稀释，在5个平板上分别用____________取0.1ml稀释液，涂布均匀后适当培养，5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160，则1g淤泥中活菌数约为____________个（保留小数点后两位）。用这种方法统计得到的数值往往____________（填“偏大”或“偏小”）。

（二）水母体内含有绿色荧光蛋白，拟利用转基因技术将水母的绿色荧光蛋白基因转入矮牵牛中培育绿色荧光矮牵牛。请回答下列相关问题：
(3)将水母细胞破碎后提取____________，在逆转录酶的作用下形成单链互补DNA，然后利用PCR技术扩增，再与pBIN质粒连接形成重组质粒，并导入大肠杆菌构建成____________。将文库中的大肠杆菌进行单菌落分离后，选择具有____________的菌落，进而获得目的基因。
(4)野生pBIN质粒不能将其上的DNA片段整合到植物细胞的染色体DNA上，因此需使野生pBIN质粒接入____________片段。在构建重组质粒时，选用两种不同的限制性内切核酸酶联合酶切的目的是_________。
(5)若利用农杆菌转化法进行矮牵牛的活体目的基因导入，通常需对叶片、子叶等感染部位进行损伤处理。若将农杆菌菌液加在未进行损伤处理的腋芽处，也可完成转化，原因是_____________。植物组织完成转化后常用抗生素进行除菌，选用抗生素种类时需要考虑____________。抗生素的使用也会对外植体产生一定的毒害作用。如果选用发根农杆菌介导目的基因导入的同时会引起外植体产生大量的不定根，选择不定根的____________进行继代培养2-3次就可在不使用抗生素的情况下获得无菌苗。

【推荐2】干扰素是由淋巴细胞产生的一种细胞因子，在临床上常用于治疗病毒感染性疾病，科研人员通过构建基因工程菌来生产干扰素。下图为构建工程菌的流程图，图中质粒A上的m、n分别是启动子和终止子，目的基因的b链为模板链。请回答以下问题：
   
(1)过程①需要______酶，所需RNA要从______细胞中获得。
(2)目的基因扩增常用PCR技术，该过程需要根据__________________设计特异性引物序列，此外PCR反应体系中除模板和引物外还需加入含Mg²⁺的缓冲液、________________________（答出一点即可）、H₂O等。
(3)过程②需在a链的5′端加接______的识别序列，b链的5′端加接______的识别序列，才能保证目的基因正向插入质粒。插入质粒过程中，还要注意将干扰素基因插入启动子和终止子之间，其中启动子的作用是________________________。
(4)获得重组质粒后，将其导入大肠杆菌时常用______处理受体菌。用该工程菌获得的干扰素不具有生物活性，其原因可能是________________________。