组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 基因工程 > 基因工程的基本操作程序 > 基因表达载体的构建
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:6315 题号:8197686
图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒P0具有四环素抗性基因(tetr)和氨苄青霉素抗性基因(ampr)。请回答下列问题:

(1)EcoRV酶切位点为,EcoR V酶切出来的线性载体P1为___________末端。
(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为___________的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在__________酶作用下,形成重组质粒P3。
(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到A、B、C三类菌落,其生长情况如下表(“+”代表生长,“﹣”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是__________(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是_____________________
   
(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对引物是__________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段,原因是_______________
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【推荐1】【生物——选修3:现代生物科技专题】MagaininmⅡ是非洲爪蟾皮肤分泌的一种抗菌肽,能对细菌、真菌、肿瘤细胞等产生明显的抑制效果。科学工作者通过基因工程技术获得能表达该种抗菌肽的大肠杆菌。请回答下列问题:
(1)和抗体相比,抗菌肽的抗菌作用具有________________特点。
(2)依据抗菌肽氨基酸序列人工设计合成的 MagaininmⅡ基因能在大肠杆菌细胞中表达出相同抗菌效果的抗菌肽,其原因是 _______________
(3)可用PCR技术对人工合成的 MagaininmⅡ基因进行扩增。请完成下表,比较细胞内DNA复制和PCR扩增DNA的异同:
DNA复制PCR扩增DNA技术
1解旋酶解旋_________
2DNA聚合酶_________
3边解旋边复制先解旋后复制
4半保留复制半保留复制

(4)下图为某质粒的示意图,若目的基因插入b位点,则导入重组质粒的受体菌在含氨苄青霉素的培养基上能增殖,同时在____________
目的基因在受体菌中表达,还需要在目的基因首端具有________________
2017-03-16更新 | 379次组卷
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【推荐2】研究发现,利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性,可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备抗CD47抗体,研究人员先利用基因工程方式制备CD47蛋白,图为含CD47基因的外源DNA、质粒DNA的有关信息, EcoRI、BamHI、SalI、XhoI 均为限制酶,Kanr、Tcr 分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。

(1)为了形成合适的重组质粒,应该选用限制酶________切割外源DNA和质粒DNA。
A.EcoRI和XhoI       B.BamHI和XhoI
C.EcoRI和SalI       D.BamHI和SalI
(2)重组质粒导入大肠杆菌的成功率很低,需经筛选才能获得导入成功的大肠杆菌,以下菌种为所需菌种的是________
A.能在含卡那霉素的培养基上生长的菌种
B.能在含四环素的培养基上生长的菌种
C.能在含卡那霉素的培养基上生长、而不能在含四环素的培养基上生长的菌种
D.能在含四环素的培养基上生长、而不能在含卡那霉素的培养基上生长的菌种
下图为制备抗CD47单克隆抗体的过程示意图,A、B、C 表示细胞,①、②表示过程。

(3)给小鼠注射的抗原物质是________________,该物质被小鼠的免疫细胞识别,引起下列四项中的________过程,形成细胞A。
A.天然免疫       B.非特异性免疫       C.细胞免疫       D.体液免疫
(4)过程①表示________________过程,形成的细胞C称为________________。过程②表示用________________技术获得大量细胞。共同培养巨噬细胞和癌细胞,加入不同浓度的抗CD47抗体,测定巨噬细胞吞噬癌细胞的吞噬系数,得到了如图所示的结果。

(5)结合图及题干信息分析,以下描述正确的是________
A.癌细胞表面的CD47蛋白能影响巨噬细胞吞噬癌细胞
B.较高浓度的抗CD47抗体有利于巨噬细胞吞噬癌细胞
C.使用抗CD47抗体治疗癌症需要严格控制抗体的浓度
D.抗CD47抗体能有效抑制癌细胞的增殖达到治疗目的
2019-03-24更新 | 223次组卷
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【推荐3】白叶枯病是造成我国重要粮食作物——水稻严重减产的重要原因之一。某科研团队将白叶枯病抗性基因Xa21与质粒重组(图1),利用人工破损处理的水稻幼苗细胞借助根癌农杆菌转化法获得抗白叶枯病的水稻品种,其中根癌农杆菌侵染植物细胞过程如图2所示,已知不同种限制酶识别序列不同。请回答:


(1)构建图1基因表达载体时,使用BamHI、Hind III两种限制酶分别处理含Xa21基因的DNA片段和Ti质粒,可以避免处理后的白叶枯病抗性基因Xa21和Ti质粒_________ 。基因表达载体上M抗生素抗性基因的作用是_________
(2)由图2可知,水稻幼苗细胞受损后会产生某些用于激活农杆菌表达某些基因并吸引农杆菌移向受损水稻幼苗细胞的信号分子。根据所学知识判断,这些信号分子可能是_________。农杆菌细胞内形成的成熟T复合体借助细胞膜上的_________定向进入水稻幼苗细胞,最终将含有白叶枯病抗性基因Xa21的T-DNA整合到水稻细胞染色体基因组上。分析图2可知,成熟T复合体所含的遗传物质是_______________
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2021-03-04更新 | 287次组卷
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