1 . 生物工程相关题目如下：
（一）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图所示。

   

(1)为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为_____________，并不断提高其浓度，经多次传代培养以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用________方法进行菌落计数评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有_______________等。（答出两种方法即可）
(2)基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是_______________。（答出两点即可）
(3)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中_______________可能是高密度培养的限制因素。
(4)菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌_______________。
（二）35s启动子是广泛应用于转基因植物中的重要组件之一。一个35s启动子包括1个A区和2个B区。图甲表示35s启动子及其附近区域分布的限制酶识别位点，已知不同限制酶切割后得到的黏性末端各不相同。研究人员拟构建含有两个35s启动子串联的转基因苜蓿。图乙表示待转入第二个35s启动子的重组质粒的构成组件及其上的限制酶识别位点。
（注：图乙中的卡那霉素抗性基因可以在原核生物中表达）

   

(5)在构建基因表达载体时，启动子的作用是_______________。
(6)利用PCR技术扩增35s启动子过程中，每次循环中温度最低的步骤是_______________。根据限制酶识别位点，为了让第二个35s启动子准确串联在待转入的重组质粒上，应选择_______________限制酶切割甲图DNA片段。
(7)为了筛选出正确串联了两个35s启动子的新重组质粒菌落，研究人员用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到①②③三类菌落，其生长状况如下表（+代表生长，-表示不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是_______________（填①、②或③）类，另外两类菌落质粒导入情况分是_______________、_______________。若新获得的转基因苜蓿中目的基因的表达量大幅增加，可以说明串联两个35s启动子能_______________。

平板类型	①	②	③
无抗生素	+	+	+
卡那霉素	·	，	+
氨苄青霉素	．	+	+
卡那霉素+氨苄青霉素	-	-	-

3 . 某班级学生围绕加酶洗衣粉的洗涤效果进行了两项实验，实验结果如图、表所示。请分析回答：
实验一结果

实验二结果

温度/℃	20	30	40	50	60	70	80
普通洗衣粉去污力/%	15	18	20	21	21.5	22	22
加酶洗衣粉去污力/%	30	40	48	50	48	37	22

(1)实验一的自变量是_________________________________________________，因变量是_______________；50 ℃时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量约为________。
(2)根据实验二的结果可以得出的结论有①_____________；②______________。
(3)80 ℃时两种洗衣粉去污力相当，其原因可能是_____________________________。
(4)请将实验二的结果用曲线图表示。

4 . 下图是从土壤中筛选细菌的过程。请回答下列问题：
   
(1)土壤中存在能分解尿素的细菌，这些细菌中产生的_______催化尿素分解成NH₃和CO₂。某同学配置以下的培养基成分：葡萄糖10.0g、蛋白胨5.0g、KH₂PO₄1.4g、Na₂HPO₄2.1g、尿素1.0g、琼脂15.0g、H₂O（定容至1L）。分析培养基的成分可知，上述培养基_______（填“能”或“不能”）用于分离出能分解尿素的细菌，理由是_______，鉴别培养基还需添加_______作指示剂。
(2)在向培养基接种土壤稀释液中微生物时，最常用的方法是_______和_______。对培养基进行灭菌处理时，应采用_______法。
(3)若在3个细菌培养基平板上均接种稀释倍数为10⁵的土壤样品0.1mL，培养一段时间，平板上菌落数分别为35个、33个、34个，则可推测每克土壤样品中的细菌数为_______个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_______（填“偏大”或“偏小”），原因是_______。
(4)另一小组的同学为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，设计了甲乙两种培养基（成分见下表）

	酵母膏	无机盐	淀粉	纤维素粉	琼脂	刚果红	水
培养基甲	＋	＋	＋	＋	－	＋	＋
培养基乙	＋	＋	＋	－	＋	＋	＋

注：“＋”表示有，“一”表示无
据表判断，培养基甲_______（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌；培养基乙_______（填“能”或“不能”）分离和鉴别纤维素分解菌。

6 . 《周礼·天官》中描述道：“酒政举酒之改令……五齐之名：一曰泛齐，二曰醴齐，三曰盎齐，四曰醍齐，五曰沉齐。”古人把酿酒过程分为五个阶段，“泛齐”：发酵开始产生大量气体，将发酵物冲到液面；“醴齐”：糖化作用旺盛起来，醪味变甜，并有薄薄酒味；“盎齐”：发酵旺盛，气浪很多，伴有嘶嘶响声；“醍齐”：酒精成分继续增多，颜色逐渐转红；“沉齐”：发酵完成，酒糟下沉。下列叙述错误的是（       ）

A．“泛齐”和“盎齐”阶段产生的气体都是CO2，两阶段CO2产生的反应过程不同

B．“醴齐”是指酿谷物酒时，需先将淀粉水解为葡萄糖，而酿葡萄酒不经历此过程

C．“醍齐”阶段酒精继续增多，密闭的时间越长，产生的酒精量越多

D．“沉齐”后因储酒不当，酒变酸且表面有一层菌膜，可能是醋酸菌发酵的结果

7 . 根据资料回答下列问题：
资料一：瘤胃是反刍动物的第一胃，不同品种的反刍动物瘤胃内微生物的种类和数量不同，含细菌多的氮利用率高，含真菌多的碳利用率高。
资料二：经研究发现，A品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为7.30×10¹⁰、真菌数为1.36×10⁵；B品种牛瘤胃内容物每毫升细菌数为3.78×10¹⁰、真菌数为1.6×10⁵。
(1)华北地区每年6月份都会产生大量的小麦秸秆，要得到能分解秸秆的目的菌，最好选择________(填“A品种牛”或“B品种牛”)的瘤胃内容物，还需将培养基的pH调至________(填“酸性”“碱性”或“中性”)。获得该类目的菌还需要选择培养，原因是________________________________。
(2)将得到的目的菌涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上，该培养基加入的________能与纤维素形成红色复合物。科研人员分离得到了表中的4个菌株，其中最适合作为目的菌的是________号，判断依据是________最大。

菌株	透明圈直径R	菌株直径r	R/r
1号	0.4	0.3	1.3
2号	1.2	0.6	2.0
3号	2.2	0.7	3.1
4号	2.1	0.9	2.3

(3)现利用稀释涂布平板法测定该目的菌的数量，在同一稀释倍数下4个平板上均接种0.1 mL样品溶液，菌落数分别为156、178、486、191，通过计算得知原样品溶液中每毫升含有目的菌1.75×10⁸个，则稀释倍数是________。
(4)因有些微生物也能降解色素，为了确定筛选分离得到的微生物是产生纤维素酶的纤维素分解菌，还需要进一步测定，最好的方法是________。
A．对分解的纤维素进行定量测定
B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定
C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定
D．对纤维素分解菌进行定量测定

8 . 阿拉伯胶是一种多糖，也称阿拉伯树胶，是一种产于非洲撒哈拉沙漠以南的半沙漠带的天然植物胶，主要包括有树胶醛糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等。在食品、医药、化妆品及其他工业上有广泛的应用。其水溶液易被细菌、真菌或酶降解。为研究自然界中微生物对阿拉伯胶的降解作用，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的“M”菌。
请回答下列问题：
（1）某同学将初筛菌液接种在固体培养基上，其中一个平板经培养后的菌落分布如下图所示。该同学采用的接种方法是___________；从结果推测该同学接种时可能出现的失误是：_____________________。

（2）观察发现：“M菌的菌落为粉白色，菌落初期呈突起絮状。在显微镜下观察到：菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm。可断定“M”菌为___________（填“细菌”或“真菌”），判断依据是：______________________。
（3）分离该阿拉伯胶降解酶可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的___________以及分子本身的大小、形状的不同，使之在电场中的___________不同而实现分离。
（4）下表中培养液pH均为6．0，若对“M”中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的______培养液，不选用的其他培养液的原因分别是：______________________。

实验用培养液配方
培养 液	阿拉 伯胶	阿拉伯   胶酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4·7H2O	KC1	FeSO4·7H2O
A	25g/L	一	—	—	lg/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
B	25g/L	1μg/L	一	3g/L	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L
C	一	—	3 g/L	—	1g/L	lg/L	0．5g/L	0．01g/L
D	25g/L	—	3 g/L	一	1g/L	1g/L	0．5g/L	0．01g/L

9 . 为制备圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌微生物菌剂，以降解厨余垃圾废液中淀粉、蛋白质、脂肪等物质，研究人员探究了圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，将两种菌液进行了不同配比的分组处理，如下表所示。下列叙述错误的是（       ）

编号	R0	R1	R2	R3	R4
圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌	1:0	2:1	1:1	1:2	0:1

A．微生物利用其合成分泌的淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等分解废液中的相关物质

B．实验过程中需将上述菌液分别接种于相同体积的厨余垃圾废液中进行培养

C．可通过检测实验前后淀粉、蛋白质、脂肪的含量，确定适宜的配比

D．表中编号R1、R2、R3组构成相互对照，编号R0、R4组为空白对照