1 . 火龙果是广东水果种植中重要的热带水果，具有较高的营养价值、药用价值以及观赏价值。植物根际微生物（PGPR）是一种存在于植物根系的特殊微生物群体，其中约有2%～5%的微生物对植物的生长有着直接或间接的作用，这类微生物通过溶磷、固氮等功能直接或间接的促进植物的生长、提高作物的产量和品质。实验小组从火龙果根际土壤中筛选出具有相应能力的菌株A₁和B₂，利用盆栽试验测定其发酵液对火龙果的促生效应，回答下列问题：
(1)实验小组从高产呈条带状的火龙果种植样地筛选功能菌株，应选用____________（填取样方法）获得火龙果的根系和部分土壤，并制备土壤浸出液。
(2)筛选固氮菌时，固氮菌附近会出现少量的非固氮的杂菌小菌落，其原因最可能是______________。实验小组为了检测固氮菌的固氮能力，取能在固氮培养基上正常生长的菌株接种到无氮液体培养基上（LB培养基），振荡培养，对照组为________________，一段时间后离心，取上清液，并______________。
(3)PGPR中的溶磷菌能将土壤中的难溶性磷酸盐转化为易于被植物吸收的磷酸，为了筛选出根际溶磷菌，培养基中应加入____________。
(4)实验小组为了进一步检测筛选获得的具有相应能力的菌株A₁和B₂对火龙果的促生效应，进行了实验，实验的处理方式如下表所示：

	最长根长/cm	鲜重增加量/g	干重/g	根体积
对照组	12.6	66.34	10.43	7.33
A₁菌株单独处理	19.4	80.91	11.96	8.00
B₂菌株单独处理	22.7	73.21	12.66	7.31
A₁、B₂菌株1：1比例复合处理	23.6	88.29	13.84	10.67

为获得最大产量应选择的处理方式为________________。该方式下能获得最大产量的原因是______________。为了提高A₁和B₂菌株对火龙果的促生效应，可在本实验基础上______________进行进一步的探究。

2 . 生殖障碍：TUB基因突变可导致女性不育。甲家族系谱图（图1）及部分成员的TUB基因编码链（蛋白质编码区域）检测结果如图2.

(1)据图1分析，可判断甲家族女性不育病的遗传方式是______（常/X/Y）染色体上的______（显/隐）性遗传病。
(2)若用A/a表示TUB基因，则图1中Ⅱ-3号个体的基因型为______。
(3)结合图2信息分析，III-1能正常生育的概率为______。
(4)已知TUB基因仅在女性生殖细胞内表达。图1中II-3和II-4欲再生一个具备生育能力的孩子，下列建议合理的是______。（编号选填）①对Ⅱ-3进行基因检测②怀孕后对胎儿进行基因检测③怀孕后对胎儿进行性别鉴定④怀孕后对胎儿进行染色体数目检查
(5)图1中Ⅲ-1患有红绿色盲，其他家族成员色觉均正常，Ⅲ-1的红绿色盲致病基因可能来自______。（多选）

A．I-1经过II-3传递

B．I-2经过Ⅱ-3传递

C．Ⅱ-4生殖细胞发生突变

D．III-1自身细胞发生突变

(6)若III-1能正常生育但基因测序显示其携带有TUB突变基因，则其体内TUB突变基因和红绿色盲基因在细胞分裂过程中一定会______。（编号选填）①同时出现在卵细胞中②同时出现在体细胞中③分别在不同的卵细胞中④分别在不同的体细胞中
(7)据图2判断，TUB基因突变前后，突变位点对应的氨基酸由______变为______。（GGU甘氨酸；GUG缬氨酸；GCG丙氨酸；UGU半胱氨酸；CGU精氨酸）
(8)为研究TUB蛋白的作用机制，研究人员将TUB突变基因的mRNA注射到小鼠卵母细胞内表达，测定第一极体分离率，结果如图3.据图分析实验组和对照组的差异及其原因，合理的是______。（多选）

A．TUB蛋白可能影响DNA复制

B．TUB蛋白可能影响纺锤体组装

C．TUB蛋白延迟了第一极体出现的时间

D．TUB蛋白降低了生成第一极体的卵母细胞占比

(9)研究发现TUB基因存在多种形式的突变，经逐代传递，突变基因在人群中频率很低却始终存在，对上述现象的合理解释是______。

3 . 黑索金是一种危险的污染物，会渗入到土壤和饮用水中。柳枝稷是一种可修复部分土壤污染物的植物，但其吸收黑索金的能力很弱，研究者利用基因工程技术，导入XplA基因可提高柳枝稷修复黑索金污染土壤能力，据此回答相关问题：

(1)欲获得转基因柳枝稷植物，还需要将图中的农杆菌细胞感染___细胞，再经过___技术培养出植株。
(2)将XplA基因与质粒构建表达载体时，应选择___和___两种酶进行酶切，与只用一种酶切割相比，优点是___。
(3)为了筛选含有目的基因的农杆菌，应先培养在含有___的培养基A上，再培养在含有___的培养基B中。若某农杆菌在培养基A、B中都长出菌落，则___（填“是”或“不是”）含有目的基因的农杆菌。
(4)从个体水平思考，写出鉴定柳枝稷是否具有分解黑索金的实验思路___。

9 . 在一个遭受严重森林火灾后的地区，两个相邻但生态特征有所差异的森林开始自然恢复过程。森林A以前物种多样性高，包含多个层次的植物群落和复杂的食物网；森林B则相对单一，主要由同一种树种构成且物种多样性低。几年后，研究人员对比这两个森林的恢复情况。以下叙述正确的是（　　）

A．森林A表现出更高的抵抗力稳定性，在火灾后迅速恢复到原有状态，因为其物种多样性促进了快速的生态位重建

B．森林B由于物种组成简单，初期比森林A显示出更快的植被覆盖率恢复，体现了较高的恢复力稳定性，但长期抵抗力稳定性较低

C．两个森林都展现了相似的恢复速度和模式，因为火灾作为一种自然干扰，对所有生态系统的影响基本一致

D．森林A在火灾后几乎无法自我恢复，而森林B因为单一树种的顽强生命力快速复原，展示了高度的抵抗力稳定性

10 . 某课题组将盐生植物碱茅的抗盐碱基因（PuCAT）导入紫花苜蓿，培育紫花苜蓿新品种。回答下列问题。

   

注：图1中①④、②③为两对引物，PuCAT基因内部无SacI、BamHI、XbaI酶切位点：图2为构建表达载体的P3300质粒，Sac1、BamH1、Xba1为可以切出不同黏性末端的三种限制酶的识别位点，Bar为抗草铵膦基因，Kan^r为卡那霉素抗性基因、Amp^r为氨苄青霉素抗性基因。农杆菌对头孢霉素敏感。
(1)目的基因的获取和表达载体构建。依据_______设计引物，用PCR技术从碱茅的基因组中获取目的基因，然后与P3300质粒连接构建基因表达载体。为保证扩增出的PuCAT与P3300质粒正向连接且不出现自身环化，据图1和2分析，应分别在引物_______的5’端分别添加_______限制酶的识别序列。
(2)采用农杆菌转化法将目的基因导入苜蓿的子叶细胞。转化农杆菌时，应向培养液中添加_______以利于重组质粒进入农杆菌；然后利用含_______的选择培养基对完成转化的农杆菌进行筛选：农杆菌与紫花苜蓿子叶共培养时，重组P3300质粒上的_______可以携带PuCAT和Bar基因转移至植物细胞并整合至植物细胞的染色体DNA上：共培养后立即将子叶转移到含有_______的固体培养基上培养，以获得转化成功的子叶细胞。
(3)转基因植株的培育与检测。将完成转化的紫花苜蓿子叶接种到MS培养基中培养，经过_______或器官发生途径形成转基因植株。PCR检测转基因紫花苜蓿是否含目的基因，需用_______为阴性对照，水为空白对照，含目的基因的重组质粒为阳性对照。进一步检测目的基因表达，提取检测阳性的转基因紫花苜蓿总RNA，并使用逆转录酶，合成_______，进行PCR。经凝胶电泳检测结果为阳性，可以确定目的基因表达出了_______。