2 . 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。现为修复被该除草剂污染的土壤，选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂化学式为）

(1)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，与普通培养基相比，所配制的培养基在成分上的主要特点是______，其具体作用是______。
(2)图为采用______法分离土壤能降解该除草剂的细菌的部分操作，该方法的接种工具为______。
(3)选用、、三个稀释度的菌液各0.2mL滴加到培养基表面，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。

稀释度
平板编号	A1	A2	A3	B1	B2	B3	C1	C2	C3
菌落数	315	298	302	45	53	52	12	9	11

由表可知，最适合计数的稀释度为______，样品中活菌数目约为______个/mL；该方法所统计的菌落数往往比活菌的实际数目要______，原因是______。
(4)科研人员用射线处理该细菌，获得两个突变株甲和乙，然后对甲和乙进行实验，结果如下表：

接种的菌种	一般培养基	实验处理及结果
甲	不生长	添加营养物质A，能生长
乙	不生长	添加营养物质B，能生长
甲+乙	都能生长	无需添加营养物质A和B，能生长

将突变株甲和乙混合接种于一般培养基中，无需添加营养物质A和B，也能生长的原因可能是______。

3 . 研究人员从土壤中分离出A、B、C、D四种菌株，并通过不同成分的培养基对其进行鉴别和筛选，结果如下表所示。回答下列相关问题：

培养基	以淀粉为唯一碳源	以纤维素为唯一碳源	以酪蛋白为唯一氮源	以尿素为唯一氮源
菌株A	+++	－	－	－
菌株B	－	+++	－	－
菌株C	+++	+	－	－
菌株D	－	－	+++	－

注：+代表菌落周围产生透明圈，+数量越多表示透明圈越大，－代表无透明圈。
(1)上表中的培养基按照物理状态属于______培养基，按照功能来看属于______培养基。
(2)分离不同菌株的同时欲对其计数，应选择______法进行接种，选择菌落数为______的平板进行计数。统计的菌落数目往往比活菌数目少，因为________________________。还可利用____________在显微镜下观察、计数，此方法统计的结果通常______（填“大于”“等于”或“小于”）实际的活菌数目。
(3)由表可知，既能分解纤维素又能分解淀粉的菌株是______，以淀粉为唯一碳源的培养基能否鉴别出菌株A和菌株C？____________。

4 . 养殖家禽的饲料中富含谷物，纤维素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加于饲料中，以提高家禽养殖效率。
(1)乳酸杆菌是动物胃肠道的优势细菌之一。家禽肠道内的乳酸杆菌通过细胞______呼吸产生乳酸等代谢产物，常见的乳酸菌除了乳酸杆菌，还有______。
(2)枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶，这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙链为转录模板链，转录时mRNA自身延伸的方向为5’→3’。

①很多启动子具有物种特异性，在图1质粒中插入W基因，其上游启动子应选择______（填写字母）。
A．枯草芽孢杆菌启动子              B．乳酸杆菌启动子              C．农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

限制酶	EcoR I	BamH I	KpmI	Mfe I	Hind II
识别序列及其切割位点

根据上述信息，应使用限制酶______切割图1中质粒，使用限制酶______切割图2中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含抗生素______的培养基筛选，以得到转入W基因的乳酸杆菌。
(3)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力，研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上，另取部分菌液上清液测定酶活力，实验方案及测定结果如下表所示。

菌种	酶活性相对值
乳酸杆茵	未检出
X	未检出
导入了重组质粒的乳酸杆菌	0.96

①表中的X应为______。
②在配制固体鉴定培养基时，除加入无机盐、刚果红、维生素、氮源、水外，还需要添加______。导入了重组质粒的乳酸杆菌在此培养基上应出现______。

5 . 发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产品的过程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。
(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上的________和空气中的___________。酿酒时，会因操作不当使酒变酸，此时在酒的表面会观察到一层膜，产生膜的原因是__________________________。
(2)现代发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选，在微生物学中，将____________________________________的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用接种环在选择培养基上进行接种这种接种方法称为___________。
(3)利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是__________________。在发酵过程中，需要随时检测培养液中微生物的数量以及__________________等，以了解发酵进程。
(4)青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点，为什么？_________________。
(5)为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×10⁶个，在4个培养基上分别接种的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为________，测定的活菌数比实际活菌数_________。（填“低”“高”或“基本一致”）

6 . 发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产品的过程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。
(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上的__________和空气中的__________。酿酒时，会因操作不当使酒变酸，此时在酒的表面会观察到一层膜，产生膜的原因是__________。
(2)现代发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选，在微生物学中，将___________的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用接种环在选择培养基上进行接种，这种接种方法称为__________。
(3)利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是__________。
(4)青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点__________（是/否），为什么? __________。
(5)为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×10⁶个，在4个培养基上分别接种的土壤样液0.1mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为__________。

7 . 某研究小组为了筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，设计了两组培养基，配方如下表。从表中数据可知，Ⅰ号和Ⅱ号培养基都属于（       ）

培养基	蛋白胨	牛肉膏	氯苯	氯化钠	硝酸铵	无机盐（无碳）	蒸馏水
Ⅰ号	10g	5g	5mg	5g	——	——	1L
Ⅱ号	——	——	50mg	5g	3g	适量	1L

A．基本培养基	B．液体培养基
C．选择培养基	D．固体培养基

8 . 酸菜是经乳酸菌发酵而成的一种发酵食品，制作过程中极易积累亚硝酸盐。一些乳酸菌能合成亚硝酸盐还原酶，能够显著降低亚硝酸盐含量。请回答相关问题。
（1）为获得高产亚硝酸盐还原酶的乳酸菌，某研究组以东北传统自然发酵酸菜为材料进行分离。
①在进行乳酸菌分离纯化时，科研人员将酸菜发酵液稀释后涂布在含溴甲酚绿（遇酸变色）的__________（“选择”或“鉴别”）培养基上，___________（“需氧”或“厌氧”）培养一段时间后，挑取周围变色的_________临时保存。
②在进行高产亚硝酸盐还原酶菌株筛选时，将临时保存的各菌种分别接种到含______的液体培养基中培养一段时间，离心收集上清液，在________酸化条件下，依次加入等量对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐进行反应，筛选反应显色较_____（填“深” 或“ 浅”）的组对应的菌株。
（2）利用筛选得到高产烟硝酸盐还原酶的某菌种进行酸菜腌制，测定亚硝酸盐含量（单位：mg/kg），结果如下表所示：

据表分析，亚硝酸盐含量最高时的腌制条件是________________________。为避免细菌大量繁殖，产生大量的亚硝酸盐，除控制好表中涉及的腌制条件外，还需控制好腌制的__________。

9 . 回答下列（一）、（二）小题：
(一)嗜盐菌常分布在晒盐场、盐湖、腌制品中，某生物兴趣小组对嗜盐菌进行了如下探究和分析，请回答以下问题：
（1）获得嗜盐菌的第一步是从合适的环境中采集菌样，然后按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的培养基较普通培养基中________含量高
（2）如图是采用不同接种方法接种嗜盐菌后纯化培养的效果图，其中图___方法（填字母）不适合用于微生物的计数，出现图A结果的原因是在操作时_________。在进行计数时，最终选取菌落数在______范围内的平板进行计数。

（3）在实验过程中，无菌操作是非常重要的，对实验过程中使用的玻璃器皿通常使用_____________法进行灭菌。
（二）人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG的单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG的单克隆抗体制备流程示意图。回答与动物的克隆有关的问题：

（4）图中的抗原是____________。①过程中促进细胞融合的最常用化学药剂是_______。
（5）③过程需进行专一的_________，筛选出的X细胞具有的特点是______________。

10 . 科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶的作用下，从地沟油中提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油。请分析并回答下列问题。
(1)在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用_____培养基。
(2)培养基灭菌采用的最适方法是_____法。
(3)下图是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图。过程一的接种方法是_____法，此方法_____（填“能”或“不能”）用来计数；过程二的接种方法是_____法，此方法计数的微生物M的数目_____（填“大于”“等于”或“小于”）实际活菌数。接种后应将培养皿_____。