1 . 回答下列关于微生物和酶的问题。
环境污染物多聚联苯难以降解，研究发现联苯降解菌内的联苯水解酶是催化多聚联苯降解的关键酶。
(1)下列培养基中能有效分离联苯降解菌的是____，原因是__________________。
A培养基(g/L)：某生长因子2.0，(NH₄)₂SO₄2.0，K₂HPO₄3.0，MgSO₄1.0，pH 7.4，多聚联苯50 mL
B培养基(g/L)：牛肉膏10.0，蛋白胨20.0，葡萄糖20.0，NaCl 5.0，pH 7.4
C培养基(g/L)：某生长因子2.0，淀粉20.0，NH₄NO₃2.5，MgCl₂0.5，K₂HPO₄3.0，多聚联苯50 mL，pH 7.4
进一步研究发现，不同的金属离子对联苯水解酶的活性有一定影响，结果见下表：

金属离子 (mmoL/L)	相对活性 (%)
对照组	100
Mn2＋	123
Co2＋	79
Mg2＋	74

(2)依据表中结果，金属离子________对该酶的活性有一定的促进作用。金属离子对酶的活性有促进或抑制作用，可能的原因是____________________________________________。
(3)通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。酶工程通常包括酶的生产、______________、酶的固定化和酶的应用等方面。酶固定化的好处是___________________________________________。
(4)下图实线表示联苯水解酶催化的反应速度与酶浓度的关系，虚线表示在其他条件不变的情况下，底物浓度增加一倍，反应速度与浓度的关系，能正确表示两者关系的是________。

(5)红球菌和假单孢菌都能降解多聚联苯，但研究发现以每克菌体计算，两种菌降解多聚联苯的能力有所不同，对此现象合理的假设是__________________________或__________________________。

4 . 一部手机上携带的细菌种类繁多，包括沙门氏菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等，这已成为致病细菌传播的重要途径之一。为验证该观点，A、B两地大学分别组织一组科研人员进行实验调查。如图是A组和B组的实验流程和实验结果。下表是2种可供选择的培养基配方。

   

培养基名称	配方
培养基甲	牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，琼脂20g
培养基乙	葡萄糖15g，KH₂PO₄1g，MgSO₄·7H₂O0.5g，KCl0.5g， FeSO₄·7H₂O0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂20g

(1)从物理性质上看，题述两种培养基属于____培养基，为达到实验目的，应选择上表中的培养基____，理由是____。
(2)为防止外来杂菌的入侵，对实验使用的培养基应使用湿热灭菌，下列所示的操作步骤的正确顺序是（       ）
①让压力表的压力降为零②加热灭菌锅，打开排气阀，排除锅内冷空气③打开排气阀，排除锅内热蒸汽④关闭排气阀，让锅内温度上升⑤向灭菌锅内放入待灭菌物品⑥到达所需压力时，控制热源，维持压力

A．⑤①②④⑥③

B．⑤②④⑥①③

C．⑤②④⑥③①

D．⑤②⑥①④③

(3)如图所示，A、B两地的科研人员均完成了实验，但实验结果却完全不同。科研人员推测可能A组的培养基被污染了，如何证明培养基A是否被杂菌污染?____。
(4)取样面积如图所示，由于手机上存在各种微生物，为了准确计数平板上的细菌数量，依据不同微生物具有不同的菌落特征如____（写出两点即可）等方面加以区分。科研人员将上述菌悬液进行梯度稀释，取0.1mL稀释倍数为：10²的样品接种到4个平板上，经培养计数，4个平板的细菌菌落数分别是108、10、105、102，则该取样区域细菌密度约为____个/cm²。该数值一般比实际活菌值偏____，原因是____。

6 . 某研究小组设计了一个利用作物秸秆（富含纤维素）生产燃料乙醇实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。实验流程如图所示。

   

回答下列问题，
(1)在粉碎的秸秆中接种菌T，一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是________。
(2)本实验收集的淋洗液中的____________可以作为酵母菌生产乙醇的原料。用淋洗液生产燃料乙醇的反应式是_________。
(3)实验中用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，氮是构成生物细胞中________（答出1点即可）等生物大分子的主要元素。通常采用____________法对培养基进行灭菌。筛选产纤维素酶的菌株T应配制以纤维素为唯一碳源________培养基（功能上划分），鉴别菌株T常常使用________染色。
(4)与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是_________（答出1点即可）。若要通过发酵工程生产燃料乙醇，其基本环节是：_______（用文字和箭头表示）。

7 . 黄曲霉素（C₁₇H₁₂O₆）是由黄曲霉产生的，具有极强的毒性和致癌性。研究人员利用黄曲霉素筛选出能高效降解黄曲霉素的菌株，部分实验过程如下图所示，请回答下列问题：
   
(1)研究人员常从霉变的花生、玉米中采样，原因是__________。
(2)图中1号培养基与2号培养基的物理状态不同，二者在成分上的主要区别是______。
(3)过程②为选择培养，常将1号培养基置于摇床上振荡，其目的是___________。
(4)过程③接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是_____________。2号培养基以______为唯一碳源。用2号培养基计数，实验结果一般比实际活菌数______，原因是_________。
(5)经过选择培养得到了多个菌落，设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么____________的菌落，就是能高效降解黄曲霉素的目的菌群。

8 . 稻田生物固氮作用是稻田氮素循环的关键环节，某些蓝细菌是自生固氮菌（独立生活时能够利用空气中游离的氮分子作为氮源，并将氮分子转化为氨，氨转化为铵盐后是植物良好的氮素营养）。蓝细菌中B基因表达的B蛋白是一种有助于蓝细菌高效吸收的载体蛋白，科学家利用基因工程和细胞工程等技术，尝试将蓝细菌的B基因导入水稻细胞，以期获得吸收能力较强的转基因水稻，从而增加粮食产量。下图1、2分别是农杆菌的Ti质粒和蓝细菌B基因的结构模式图。回答下列有关问题：
   
(1)为获得可用于进一步研究的固氮蓝细菌的菌株，从培养基功能的角度分析，可以使用______培养基从自然菌群中筛选，该培养基所需的营养物质有无机碳源、______（写两种），但不需要添加______营养物质，并在有光条件下培养。
(2)利用PCR技术以图2中的DNA片段为模板扩增B基因时，需要的引物有______（填写图中引物代号），理由是________________________。
(3)在构建含B基因的表达载体时，需要用限制酶______切割Ti质粒和B基因，不选用其他限制酶的原因是________________________。
(4)为检测B基因在转基因水稻细胞中是否成功表达，可采用抗原—抗体杂交法在分子水平上检测，还可以在个体水平上检测，请写出个体水平检测的实验思路：________________________。

9 . 某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在均匀地接种了大肠杆菌的培养基上培养，实验结果如下图。请分析并回答下列问题:

(1)在制备固体培养基时需加入的凝固剂，常用的是___________。
(2)图中出现透明圈的原因是________________________________________________________________。
实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为_______号（填图中序号）的麦迪霉素。
(3)该实验中，使用_____________________法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要注意进行无菌操作。
(4)实验室还有另外一种接种法，即______________法，此种方法对接种环至少需进行______次灼烧灭菌。接种后盖上皿盖，需将平板__________，再放入培养箱培养。
(5)若该研究小组欲筛选能分解尿素的细菌，应使用以_______为唯一碳源的培养基，并加入_______________，便于进一步鉴定此菌。

10 . 某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。

请分析回答下列问题。

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌，这种培养基属于________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是异养________型。(填“需氧”或“厌氧”)
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。(两空均填“增加”或“减少”)
(4)转为固体培养基时，常采用____________和稀释涂布平板的方法进行接种，在前一种方法接种过程中所用的接种工具是________，这种工具在操作时采用的灭菌方法是________。
(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理才能倒掉，这样做的目的是防止造成______________。