5 . 某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（       ）

A．培养基pH需偏碱性	B．泡菜汁需多次稀释后才能划线接种
C．需在无氧条件下培养	D．分离得到的微生物均为乳酸菌

6 . 回答下列（一）（二）小题：
（一）泡菜的主要原料是蔬菜，蔬菜中含有大量的膳食纤维，能刺激肠道蠕动，帮助排出肠道中的有害物质，泡菜中也含有一定量的亚硝酸盐。
(1)泡菜腌制过程中产有机酸的主要菌种是_____。培养微生物需配制培养基，一般步骤为：计算→称量→溶化→定容→调pH→_____，倒平板。
(2)泡菜废水中含有大量纤维素等有机物，并且盐度较高，对微生物生长起到较强抑制作用。若要获得能分解纤维素的耐盐微生物，需配制以_____为唯一碳源的培养基，并在培养基中加入_____。从功能上看，该培养基属于_____培养基。
(3)欲测定泡菜中的亚硝酸盐含量，可在酸化条件下，使亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，产物与_____反应，形成紫红色物质，再通过测量其_____，并与_____对比换算得到。
（二）土壤农杆菌介导转基因植物的培育过程中，为了便于受体细胞的筛选，常将土壤农杆菌中的Ti质粒进行改造，并加入卡那霉素抗性基因（Kan^R）和β-半乳糖苷酶基因（lacZ'），如图所示。β-半乳糖苷酶能催化特殊物质X-gal发生显色反应而使固体培养基上含该基因的菌落呈蓝色，否则呈白色。

回答下列问题：
(4)用BseYI切割质粒和含有目的基因的DNA，在DNA连接酶的作用下_____（填“能”或“否”）形成重组质粒，理由是_____。
(5)为便于筛选，需将农杆菌接种在含_____、X-gal的LB培养基，以去除未转化的细胞，再选择_____色菌落，即为所需菌落。这一过程中，切割含目的基因的DNA片段，应选择限制性核酸内切酶_____，用于导入重组质粒的农杆菌本身_____（填“含”或“不含”）lacZ'基因。
(6)为提高重组质粒导入农杆菌的效率，除考虑导入方法、筛选条件、防止污染外，还需考虑的主要因素有_____。（答出两点即可）

8 . 回答下列（一）、（二）小题
（一）某兴趣小组就“食盐浓度和发酵时间对泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的影响”开展了研究。请帮助他们完成探究实验。
(1)泡菜制作：整个腌制流程过程中没有另外加入假丝酵母和乳酸菌，这些菌种的来源是_____________。这些菌种利用养料主要是蔬菜的可溶性物质和部分泡浸液。整个发酵过程中，在泡浸液中加入适量的糖类物质使其获得足够的___________________，整个发酵过程还需要创造厌氧条件，具体做法是___________________。
(2)为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。为挑选优质的乳酸菌，取少量酸奶，用___________稀释后，再用__________蘸取少量的稀释液，在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。
(3)泡菜腌制过程中，会产生有机酸、_________________和亚硝酸盐。已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_________________环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
（二）转基因技术已经广泛地应用植物育种中，请回答下列与转基因植物相关问题。
(4)如图甲表示Ti质粒，图乙表示外源DNA，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，Ne^r表示新霉素抗性基因。图中质粒与含有目的基因的DNA用PstⅠ酶切，加入___________________后得到的质粒-目的基因连接物有部分不符合生产要求的，原因是___________。CaCl₂处理过的农杆菌与该重组质粒先在___________内进行混合等操作，实现转化实验，然后加入液体培养基，置于摇床慢速离心培养一段时间，CaCl₂处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态，通过选择培养基并以____________________抗性为依据确定是否重组质粒成功表达相关标记基因。

(5)为了实现植物的不同来源遗传物质重新组合，我们借助基因工程方法外，还可以借助___________等技术。再通过对这些转基因细胞或重组细胞进行培养，利用______________________原理，获得具有特定性状的新植株。
(6)经农杆菌侵染后，番茄组织会残留大量农杆菌。为杀死和抑制农杆菌的继续生长，以便使受体细胞正常生长发育，有必要进行_________培养。但该过程对农杆菌生长起抑制作用的同时，对植物组织生长也产生抑制作用，为减轻或消除这种毒副作用，需注意控制_________________________。