1 . 红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然 EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列有关叙述错误的是（       ）

A．构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因的启动子的上游

B．一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达

C．可用显微注射技术将含有EPO基因的表达载体导入羊的受精卵中

D．用PCR扩增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列

2 . 人血清白蛋白（）是血浆蛋白的主要成分，具有维持血浆渗透压和进行物质运输的功能。科学家利用转基因技术获得转基因的大肠杆菌，通过发酵工程，实现的大量生产，下图表示基因。下列叙述错误的（       ）

A．过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是第二步

B．扩增出基因并用于表达载体的构建，应选择引物Ⅱ和引物Ⅲ

C．在反应缓冲液中加入的作用是激活耐高温的聚合酶

D．用方法检测大肠杆菌是否导入基因，预变性过程可促进模板边解旋边复制

3 . 利用PCR将某小段含目的基因的DNA分子扩增循环n次，则（　　）

A．需要已知目的基因的全部序列以便设计引物

B．共需2n＋1－2个引物参与子代DNA分子的合成

C．应向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶、缓冲液等

D．理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段占15/16

4 . 人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素；“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题：

   

(1)由于_______，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体_______细胞中的mRNA，再由mRNA经________得到的胰岛素基因，________（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。
(2)如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_________的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_______（填“3’或5’）端。通过上述方法获得人的胰岛素基因后，需要通过PCR技术进行扩增，若计划用1个胰岛素基因为模板获得m（m大于2）个胰岛素基因，则消耗的引物总量是______个。引物序列中的的GC含量越高，对PCR过程中的_______步骤〔写出具体过程）影响最大，越_______（填“有利于”或“不利于”）目标DNA的扩增。
(3)PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有______。

A．PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在退火过程起作用

B．待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率

C．进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动

D．琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测

(4)β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经________（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆茵接种到添加了________和X-gal的培养基上筛选出_______色的菌落即为工程菌种。

5 . 下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（       ）

A．切割质粒的限制性内切核酸酶均特异性地识别6个核苷酸序列

B．PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应

C．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因

D．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达

6 . 高危型HPV持续感染人体可导致宫颈癌，常用HPV抗体检测血清中的HPV含量，进行宫颈癌的临床诊断。如图所示的是HPV单克隆抗体的制备流程示意图。回答下列问题：
   
(1)若①过程表示扩增HPV基因，则采用的技术手段是__________技术，该过程可以在__________中自动完成，常采用__________来鉴定PCR的产物。
(2)构建重组质粒时，为确保HPV基因与质粒准确连接，可采用的限制酶为__________；过程②一般先用__________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种___________的生理状态，然后再将重组质粒导入其中。
(3)诱导能产生特定抗体的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的常用方法有___________，③表示__________过程，获得的C细胞的特点是__________。

7 . 我国科学家利用苏云金杆菌中的Bt基因培育出转基因抗虫棉，下列说法错误的是（       ）

A．科学家已对Bt基因的序列信息，表达产物等有了较为深入的了解

B．筛选Bt基因后可以利用PCR技术对其进行大量的扩增

C．培育转基因抗虫棉的核心工作是将Bt基因导入棉花细胞中

D．检查转基因抗虫棉是否培育成功首先要进行分子水平的检测

8 . 下列有关基因工程的叙述正确的是（　　）

A．用PCR技术扩增目的基因的过程中，需用耐高温的Taq酶

B．构建基因表达载体时，只能用一种限制酶切割目的基因和载体

C．检测抗虫转基因植株是否具有抗虫特性时，可用病原体去侵染植株

D．利用农杆菌转化法将某基因导入植物细胞时，应将该基因插入到拟核区的DNA上

9 . PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（       ）

A．都遵循碱基互补配对原则

B．DNA聚合酶作用的最适温度不同

C．都是边解旋边复制的过程

D．复制方式都是半保留复制

10 . 细胞介素简称白介素，白介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T细胞和B细胞活化，增殖与分化及炎症反应中起重要作用。利用基因工程技术，可以让哺乳动物批量生产白介素。制备乳腺生物反应器生产白介素的过程图如图3所示。回答下列问题：

(1)可使用_____技术扩增白介素基因。已知DNA复制时，子代核苷酸链只能从引物的3'端延伸，则利用上述技术扩增白介素基因时，应选择图2中的_____（填字母）单链核苷酸序列作为引物。
(2)在构建重组质粒时，只选用BclⅠ切割白介素基因和质粒有何弊端？_____。
(3)可使用含有_____的培养基筛选导入了重组质粒的受精卵。受精卵发育到囊胚阶段时，细胞逐渐分化，将来发育成胎儿的各种组织的是_____，将来发育成胎膜和胎盘的是_____。