1 . 转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如下图所示(①至④代表过程，A至C代表结构或细胞)：

(1)在图中①基因表达载体的构建过程中，为了使目的基因正常表达，目的基因的首端必须有___________识别和结合的部位。将目的基因导入受体细胞的方法很多，在该题中涉及的方法是__________，之所以要把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，这是利用T-DNA_______________的特点。
(2)过程②的具体操作是：先用Ca²⁺处理农杆菌，使其成为____________细胞；再将含乙肝病毒表面抗原基因的重组Ti质粒溶于缓冲液中与经处理的农杆菌混合，完成转化过程。乙肝病毒表面抗原的基因能否在   草莓植株体内维持稳定遗传的关键____________，通常采用____________的方法进行检测。
(3)基因工程中，若要培育乳腺生物反应器，应选用动物的__________细胞为受体细胞，且该受体的细胞的性染色体组成应为_________型。

2 . 如图为基因工程中利用农杆菌转化法，培育出新性状植株的过程，请据图分析回答：

（1）将携带外源基因的DNA导入植物细胞中所用到的工具酶有________________________。
（2）农杆菌在自然状态下，能感染__________植物和裸子植物，因为这些植物受到损伤时，伤口会分泌大量的_________________，吸引农杆菌移向这些细胞。利用农杆菌转化法时，作为基因工程中运载体的是_________。
（3）目的基因导入植物细胞后，能够在受体细胞中维持稳定和表达的过程，称为___________。检测目的基因是否转录出了mRNA，常用的方法是__________________________。
（4）导入目的基因的植物细胞一般需要通过______________________________的方法，才能培育成表现新性状的植株。利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是：①______________________；②_____________________________。

3 . 某种能感染人的禽流感病毒为RNA病毒，该病毒表面有多种蛋白质，其中A蛋白为主要抗原（能被宿主细胞强烈识别）。可通过制备基因疫苗或蛋白质疫苗预防该病毒的感染。请回答下列问题：
（1）要获得编码A蛋白的基因疫苗，首先要提取该抗原的RNA并将RNA__________形成DNA（基因疫苗）。要获得大量的基因疫苗可利用PCR技术完成，该技术依据的原理是____________________。
（2）以A蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是A蛋白自身没有感染力，但保留有__________。A蛋白进入人体将引起人体特异性免疫中的__________免疫。
（3）若利用基因工程技术培育能在分泌乳汁时产生A蛋白的牛，需要向牛的受精卵中导入__________。在目的基因的前端位置上有一段特殊结构的DNA片段，称为__________，它是__________识别和结合的位点。在上述研究中 要获得胚胎干细胞，则其来源于囊胚的__________或胚胎的原始性腺。

4 . 如图为培育转基因山羊生产人β﹣酪蛋白的流程图．请回答下列问题．

（1）获取过程①所用的人β﹣酪蛋白基因时，可先提取人体细胞中的_____，以其作为模板在反转录酶的作用下合成_____。
（2）重组人β﹣酪蛋白基因表达载体中必须有启动子，其是_____识别和结合的部位。
（3）过程②可选用_____阶段的胚胎进行移植，过程③可使用胚胎工程中___________技术扩大转基因山羊群体。
（4）过程④为目的基因的表达，包括____________两个阶段，β﹣酪蛋白基因在细胞内表达的场所为____________。
（5）在分子水平上，可通过_________技术检测转基因山羊中是否成功表达出β﹣酪蛋白。

5 . 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的P蛋白为主要抗原。根据下图回答问题：

（1）过程①代表的是________，该过程需要的原料是________。与③过程中的碱基配对相比，①过程特有的碱基配对方式是________。
（2）除了B淋巴细胞外，图中能特异性识别抗原的细胞还有__________，(填编号）细胞识别的物质基础是________。
（3）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________制成疫苗，该疫苗注射到人体内后，首先由________进行处理和呈递，最终激活B淋巴细胞。

6 . 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，几乎能抵抗所有病毒引起的感染。它是一种抗病毒的特效药，并对治疗某些癌症也有一定的疗效。传统的干扰素生产方法成本高、产量低，获得的干扰素在体外不易保存。用生物技术手段可以解决这些问题。
Ⅰ.利用基因工程技术生产干扰素。
（1）从健康人体外周静脉血分离出能合成干扰素的细胞，从中提取___________，经逆转录获取目的基因。
（2）基因工程技术的核心步骤是________________，此过程需使用________________酶。为使干扰素基因在受体细胞中能够表达和发挥作用，需要把目的基因插入表达载体的__________和__________之间。
（3）若选择大肠杆菌作为受体细胞，常使用______处理，使其成为__________细胞，在一定温度下完成转化。
（4）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入受体细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、_______________和________________。
（5）在培养液中培养一段时间后，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用_________________技术。
Ⅱ.利用蛋白质工程技术改造干扰素。
为解决干扰素在体外不易保存的问题，科学家通过分析干扰素中的氨基酸种类，尝试将其分子中的个别氨基酸进行替换，以延长干扰素在体外的保存期。可见，若要改变蛋白质的功能，需先设计预期______________ ，再推测_____________，找到对应的脱氧核苷酸序列。但改造干扰素最终还需通过改变________来实现。

7 . 科学家应用现代生物技术培育出了荧光转基因克隆兔，培育原理如下，据图回答有关问题：

(1)上述过程中运用的生物技术有__________（至少写出三个）。
(2)②过程的培养环境要求是__________，培养的空气中通常需含5%CO₂，目的是________。培养基除了加入一些基本的营养成分以外，通常还需要加入__________等一些天然成分，此时还应该对所需细胞进行筛选，方法是__________________________________。
(3)胚胎移植前必须对代孕母兔和供体母兔用激素进行__________处理。如果想获得核基因型相同的多个胚胎，常采取的方法是__________，处理的时期是__________。

8 . 有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，病人就会受到病毒感染而死亡，原因是其体内缺乏一种腺苷酸脱氨酶基因。其治疗方案如图所示：

(1)仿照上述方案设计一个治疗男性血友病患者的方案，请完成有关步骤：
第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；
第二步：提取目的基因；
第三步：_________________________________________________________；
第四步：将重组DNA分子导入受体细胞，让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染______________________________________________________________；
第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞中是否导入正常凝血因子基因，并检测是否产生了________________________________________________________________________；
第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，目的基因在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。
(2)取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，目的是_____________________________。
(3)人类血友病是由__________染色体上的________基因控制的遗传病。假如缺乏腺苷酸脱氨酶基因引起的疾病属于常染色体隐性遗传病，一对表现型正常的夫妇生下一个同时患有上述两种遗传病的男孩，如果他们再生一个女孩，表现型正常的概率是________。
(4)假设以大肠杆菌质粒作为载体，并用同一种限制性核酸内切酶切割载体与目的基因，将切割后的载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物中至少有____种环状DNA分子，它们分别是_______________________________________________________________________________。

9 . 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题：
（1）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有______________。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的____________，才能驱动转录过程。这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为______________。
（2）为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或_______________进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将___________________________。转基因牛是否培育成功，可以通过_______________技术从分子水平进行检测。
（3）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的_______________与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是______________，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO。
（4）利用胚胎干细胞可进行治疗性克隆。其主要过程是把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。则治疗性克隆采用的技术有_____________，_____________和干细胞培养。

10 . 浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题。

(1)获得油菜素内酯合成酶基因的方法有___________________、___________________、________________。步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指________。
(2)图中导入重组质粒的方法是________，在导入之前应用________处理受体细菌。
(3)导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用________制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入________可将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)请你为该课题命名：___________________________________________。