2 . 乙烯受体是一类具有乙烯结合能力的蛋白，ETR1是乙烯受体家族的重要成员，它的功能是感知乙烯信号并且负调控乙烯的反应。干扰乙烯信号转导基因的表达或可以延长花期。科学家克隆了芍药乙烯受体ETR1基因，并构建了芍药P1ETR1基因表达载体，利用农杆菌介导的叶盘法用芍药PIETR1基因转化烟草，并对转化的烟草进行组织培养，在潮霉素抗性的培养基中初步筛选出成功转化的烟草。相关结果如表1和表2．
表1   不定芽或愈伤组织诱导状况

处理	6-BA浓度/	NAA浓度/	愈伤组织数量	不定芽数量
	（mg·L-1）	（mg·L-1）
1	0．1	2	-	-
2	0．1	2．5	+	-
3	0．2	2	+	-
4	0．2	2．5	+	++
5	0．3	2	+	+
6	0．3	2．5	+	+

注：“+”表示多：“-”表示少
表2   生根诱导状况

处理	培养基	NAA浓度/（mg·L-1）	生根情况
1	甲	0	多但细
2	甲	0．1	多且粗
3	甲	0．2	无
4	乙	0	少且细
5	乙	0．1	少但粗
6	乙	0．2	少但粗

注：培养基甲的质量浓度是培养基乙的2倍，其余成分均相同请回答下列问题：
(1)芍药乙烯受体ETR1基因可以导入烟草细胞中表达的原理是______。
(2)除了题干中的转化方法，芍药PIETR1基因表达载体导入烟草细胞的方法还有_______。将转化的烟草在潮霉素抗性培养基中进行筛选的原因是_______，除此以外，基因表达载体还需要_____（至少答出三点）。
(3)诱导烟草愈伤组织的6-BA和NAA的最佳组合浓度是______，生根诱导最佳处理组合是______。
(4)从分子水平鉴定是否转化成功的方法有_______，同时还需要______水平的检测。

3 . 儿童癫痫是由大脑神经元异常放电所致的神经系统疾病，遗传因素是其重要病因。
(1)研究者对某儿童癫痫患者家系进行调查，结果如图1，据图可知该病为_____遗传病。对患者和健康志愿者进行基因组测序，推测S基因为致病基因。

(2)核基因转录的前体RNA中内含子对应序列被识别并剪切，外显子对应序列拼接为成熟mRNA．对患者及父母的S基因测序后发现_____，推测S基因外显子4突变导致癫痫。为验证该推测，研究者分别设计如图2中的引物_____扩增外显子1及外显子1-内含子1交界处，并对其他外显子及外显子-内含子交界处扩增、测序（除外显子4外），发现患者及父母的测序结果相同。对外显子-内含子交界处进行测序的原因是该部位_____。

(3)研究者利用基因工程技术将人突变S基因外显子4替换小鼠正常S基因外显子4，并利用标记基因N筛选出成功替换的小鼠胚胎干细胞，进而培育出杂合转基因小鼠甲。为进一步得到去除N基因的纯合突变鼠，可利用转Flp基因小鼠（Flp酶可识别并敲除同一条DNA两个FRT序列间的序列）与甲杂交。
①从以下选项中选出正确的重组质粒以获得小鼠甲_____。
A.       B.
C.        D.
②在图中补充培育纯合突变鼠的杂交流程：_____

(4)出生两周的幼鼠乙可在尖锐嘈杂声的刺激下诱发癫痫。进一步研究表明S基因突变增强了脑内兴奋性突触的活性。S基因表达产物是一种膜蛋白，参与调节细胞内囊泡膜与细胞膜的融合。推测S基因突变导致_____，引发了癫痫。