1 . 猕猴桃溃疡病是一种严重影响猕猴桃产量的细菌性病害。为获得抗猕猴桃溃疡病的转基因猕猴桃，科研人员以猕猴桃的愈伤组织（对卡那霉素敏感）为转基因受体，通过农杆菌转化法将抗菌肽基因导入猕猴桃。图1表示抗菌肽基因和卡那霉素抗性基因（nptⅡ基因）及其上限制酶酶切位点的分布情况，图2表示Ti质粒及其上限制酶酶切位点的分布情况。回答下列问题：
   
(1)限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_______断裂。限制酶主要来源于原核生物，但不会切割原核生物自身的DNA分子，推测原因是______。目的基因可随T-DNA整合到目的细胞的染色体DNA上，这体现了_______的生物学变异原理。
(2)若只用EcoRI切割目的基因和Ti质粒，会产生多种连接产物。为筛选出含有目的基因正向连接的重组Ti质粒的菌株，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到了①②③三类菌落，其生长情况如下表，“+”表示生长，“-”表示不生长。根据表中结果判断，应选择的菌落是_____（填表中序号），菌落②的导入情况是_______。

项目	①	②	③
无抗生素	+	+	+
卡那霉素	-	-	+
氨苄青霉素	-	+	+
卡那霉素+氨苄青霉素	-	-	+

(3)若既要避免上述多种连接情况的发生，又要使目的基因最终能整合到猕猴桃愈伤组织细胞的染色体DNA上，最好选择限制酶_________对目的基因和Ti质粒进行切割。

2 . 当面对日常生活中与转基因技术有关的话题时，我们需要理性地表明观点和参与讨论。下列叙述错误的是（       ）

A．在清晰地了解转基因技术的原理和操作规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题

B．转基因食品风险评估时需要考虑目的基因和标记基因的安全性问题

C．商家不应该利用公众对转基因食品“恐惧”的心理，把“非转基因”作为推销的噱头

D．转基因技术将不同生物的DNA进行转移和重组之后，就会创造出新物种

3 . 人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。
       
(1)制造该性能优异t-PA突变蛋白的过程称为_____工程。
(2)高纯度的DNA模板是成功扩增目的基因的前提条件之一，在制备DNA模板时，可以用高温处理的方法去除蛋白质，原因是_____。

A．蛋白质空间结构容易破坏	B．氨基酸容易高温脱氨基
C．DNA氢键容易断裂和恢复	D．DNA和蛋白质可以碱基配对

(3)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链（作为模板指导RNA合成的链）序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此突变基因编码该氨基酸的模板链序列应设计为_____。
(4)若获得的t-PA突变基因如图所示，那么质粒pCLY11需用限制酶_____和_____切开，才能与t-PA突变基因高效连接，在连接时需要用到_____酶。
(5)应选择在加入新霉素的培养基中_____（能/不能）生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞，将目的基因导入受体细胞，放在含新霉素的培养基中培养，选择呈_____色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。

5 . 科学家将萤火虫的荧光素和荧光酶基因转入烟草细胞，获得高水平的表达。长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明（       ）
①萤火虫与烟草的DNA结构基本相同
②萤火虫与烟草共用一套遗传密码子
③烟草体内合成了荧光素和荧光酶
④萤火虫和烟草合成蛋白质的方式基本相同

A．①和③

B．②和③

C．①和④

D．①②③④

6 . 科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计划将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸，下列说法中，正确的是（       ）

A．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异

B．对天冬氨酸激酶的改造需要以基因工程为基础

C．蛋白质工程操作过程中，不需要酶和载体作为工具

D．经改造后的玉米赖氨酸含量提高这一性状不可遗传

7 . 1990年，科学家将牛的凝乳酶基因转入到大肠杆菌中，通过工业发酵来批量生产凝乳酶。下列说法错误的是（       ）

A．凝乳酶基因和凝乳酶的基本组成单位不同

B．大肠杆菌中的高尔基体参与凝乳酶的加工

C．合成凝乳酶时，两种生物共用一套密码子

D．双缩脲试剂检测凝乳酶基因，无紫色出现

8 . 以下关于现代生物工程说法正确的是（       ）
①基因工程的原理是基因重组
②动物细胞培养的原理是细胞增殖
③制备单克隆抗体时得到杂交瘤细胞还要克隆化培养和抗体检测才能确定是否能产生所需特异性抗体
④克隆动物的成功证明动物细胞有全能性
⑤稀释涂布平板法除了用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目
⑥接种针和接种环常用湿热灭菌
⑦在进行传代培养时，悬浮培养的细胞需要重新用胰蛋白酶处理，使之分散

A．三项	B．四项
C．五项	D．六项

9 . 下列关于基因工程的叙述，正确的是（       ）

A．基因工程产生的变异属于人工诱变

B．利用基因工程育种的优点之一是目的性强

C．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因

D．基因工程是在细胞水平上进行设计和施工的