1 . 限制酶是基因工程的基本工具之一。同尾酶指来源各异，识别的靶序列也不相同，但产生相同的黏性末端的限制酶，在基因工程中应用较为广泛。几种常见的限制酶的切割位点如表所示。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	SalⅠ	BglⅡ	XhoⅠ
识别序列及 切割位点

(1)表中两组同尾酶分别是__________和__________。表中限制酶切割出的为黏性末端，若限制酶切割出的为平末端，则可以用__________（选填“E.coliDNA连接酶”“T₄DNA连接酶”“E.coliDNA连接酶或T₄DNA连接酶”）。
(2)某限制酶的识别序列及切割位点为，某DNA分子上有4个该限制酶的识别位点，用该限制酶切割该DNA分子，会生成4个片段。若用BamHⅠ切割该DNA分子会生成2个片段，则该DNA分子为__________（填“环”或“链”）状结构。若用两种酶同时处理该DNA分子，则会生成__________个片段。
(3)限制酶的切制位点是__________（填化学键名称）。在基因工程中，与使用一种限制酶相比，同时使用2种同尾酶进行切割的优点有__________（写出1个）。

2 . 基因编辑是一种基因工程技术，CRISPR/Cas9基因编辑技术，可以实现对DNA的定点切割，其工作原理如下图所示，向导RNA引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点并剪切DNA。研究发现CRISPR-Cas9系统广泛存在于细菌细胞内，下列说法错误的是（       ）
   

A．细菌体内的Cas9能切割外源DNA保护自身，类似于限制酶

B．可通过CRISPR/Cas9技术敲除突变基因根治猫叫综合征等遗传病

C．Cas9对不同目标DNA进行编辑时，应使用不同的向导RNA

D．Cas9蛋白剪切DNA片段的精确性随着向导RNA长度的延长而增加

3 . 草莓营养价值高，被誉为是“水果皇后”，我国栽培的草莓品种很多。下图为利用现代生物技术改良草莓品系的设想示意图，相关叙述错误的是（       ）

   

A．过程1能克服远源杂交不亲和的障碍，定向改变生物的遗传性状

B．过程Ⅱ一般用聚乙二醇诱导细胞融合，得到的细胞属于愈伤组织细胞

C．凤梨味草莓植株的培育过程利用了细胞膜的流动性，体现了细胞的全能性

D．杂种细胞A再生出细胞壁的过程，主要与高尔基体的活动有关

4 . 下列哪种变异或技术可以定向地改变生物的性状（       ）

A．基因突变	B．基因工程
C．基因重组	D．染色体变异

5 . 蛋白质工程是基因工程的延伸，又称为第二代基因工程。下列关于基因工程和蛋白质工程的叙述正确的是（       ）

A．基因工程需用到工具酶，而蛋白质工程无需用到工具酶

B．基因工程用的是现有基因，而蛋白质工程用的是新基因

C．蛋白质工程的操作过程中，需要先合成mRNA，后合成基因

D．蛋白质工程的实施，充分体现了功能决定结构的科学思想

6 . 下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（　　）

A．能将不同物种优良性状集中到一起，定向的改造生物的遗传性状

B．所有生物共用一套密码子是基因工程能够最终成功的重要前提

C．重组质粒的形成是在细胞内完成的

D．作为基因的运载体需要具备的一个重要特征是能够完成自主复制

7 . 草甘膦是一种非选择性除草剂，杀死杂草的同时也能杀死农作物。它与植物体内的磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）结构相似，可与PEP竞争结合EPSP合酶，阻止PEP转化，影响细胞正常代谢。我国科学家从某微生物体内获取了草甘膦抗性（GR79）基因，将其体外扩增后构建基因表达载体，最终导入农作物的叶绿体基因组中获得了抗草甘膦的转基因农作物。下列说法错误的是（       ）

A．GR79基因的表达产物能阻止草甘膦与PEP竞争结合EPSP合酶

B．体外扩增GR79基因时每一轮循环中均需经历两次目的不同的升温处理

C．基因表达载体中的终止子是翻译停止的信号

D．将基因表达载体导入农作物的叶绿体基因组中可有效避免GR79基因通过花粉向近缘杂草扩散

8 . 葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高葡萄糖异构酶的热稳定性，科学家拟利用蛋白质工程对其进行改造。下列相关叙述正确的是（　　）

A．改造葡萄糖异构酶应从设计葡萄糖异构酶的结构出发

B．改造后的葡萄糖异构酶是自然界已存在的蛋白质

C．改造葡萄糖异构酶的过程需要以基因工程为基础

D．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异

9 . 下列有关蛋白质工程和基因工程的叙述，错误的是（       ）

A．基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质

B．基因工程产生的变异是可遗传的，蛋白质工程产生的变异是不可遗传的

C．蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子

D．通过基因工程中定点诱变技术，有目的地改造蛋白质分子中某些活性部位的一个或几个氨基酸，以改善蛋白质的性质和功能

10 . 自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞，国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、兔、猪、恒河猴以及人类都分离获得了ES细胞。ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型，而且还可以作为一种载体，将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体，更重要的是，ES细胞将会给人类移植医学带来一场革命。如图为利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）进行疾病治疗的相关研究图解。请回答下列问题：
   
(1)致癌基因通过a、c、d等过程最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程称为______________，使用PCR技术扩增致癌基因时，在PCR反应体系中需添加的物质除了缓冲液、致癌基因模板，四种脱氧核苷酸原料、ATP、过量的引物，还需要添加_______________。若对一个含致癌基因的DNA扩增n代，则需消耗____________对引物。
(2)ES细胞除可取自囊胚的内细胞团外，还可取自_______，过程b需要在培养液中加入________，可诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，再进行细胞移植以治疗相应的疾病。但要治疗人类因胰岛素B受损，胰岛素分泌不足引起的Ⅰ型糖尿病，却不能通过移植该胰岛B细胞，理由是____________。
(3)b过程体现了ES细胞在功能上具有__________的特点。图中b、c和d都属于胚胎工程的技术手段，胚胎工程是指对动物的______________所进行的多种显微操作和处理技术；基因工程能够得以实现的基础是：__________。