1 . 2021年3月，以色列魏茨曼科学研究所研究团队创建了人造机器子宫，并首次使用它将小鼠胚胎培养了6d（达到小鼠整个妊娠期的1/3，且胚胎发育正常。借助人造子宫，可观察到胚胎成功发育出心脏、胃、头部和四肢等，从而帮助人们解决胚胎发育研究领域的诸多问题。
（1）研究人员首先提取受精之后几天的小鼠胚胎，放到含有特殊生长培养基的培养皿中，胚胎像附着在子宫壁上一样，开始形成三胚层。这说明提取的胚胎在小鼠体内已完成由受精卵→___________的发育。其中受精卵形成经过___________、精子接触卵细胞膜、形成雄原核和雌原核并彼此靠近等阶段，当___________时，说明卵子已受精。
（2）上述胚胎培养两天后，进入下一个发育阶段，开始从每个胚层发育形成器官。此时，研究人员将胚胎放在小烧杯内的营养液中，使溶液保持运动并不断混合，帮助胚胎___________，防止胚胎附着到杯壁上导致死亡。小鼠胚胎能依靠这台人造子宫系统正常生长6天，在此期间可以明显看到胚胎不断变大，成功发育出心脏、胃、头部和四肢等重要器官。同种动物个体间进行胚胎移植前，常不需要对受体和供体进行免疫检查，原因是___________。
（3）若将第（1）问中的胚胎移植到另一雌鼠体内继续发育，则所选代孕母鼠应满足的条件是与供体鼠同种健康且______________________。为了获得更多的克隆鼠，可对第（1）问中的囊胚进行分割，但需要注意___________。

3 . 现代生物技术的发展，人们对细胞有了更多的认识，回答下列问题：
（1）胚胎干细胞在基础生物学、畜牧学和医学上具有十分重要的应用价值。囊胚期胚胎由_________________、囊胚腔和滋养层组成。前者将产生胚胎的所有组织和胚外结构，后者形成胎盘。首先用免疫外科方法去掉囊胚外围的滋养外胚层， 再将得到的细胞平铺于_________细胞上以防止分化，在高血清浓度条件下培养数天后，ES集落开始形成，大约每隔7d 进行分散和重新平铺，分散的方法可以是微吸管机械分散，也可以用_______________消化分散。目前已得到未分化状态、具正常双倍体核型及多向分化潜能的干细胞，已传三十多代并可____________保存。
（2）Weiss等用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因。他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成_________细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞。这些细胞既保持了合成_______________细胞3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠肝细胞的这3种蛋白，但是在正常的成纤维细胞中从不合成这些。由此可见，融合实验证实了小鼠成纤维细胞_______________。
（3）由于细胞体积小，要通过显微操作装置在显微镜下进行解剖手术和微量注射。显微操作技术可用于_________、_____________ 等技术。

4 . 研究发现人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，以大规模生产人溶菌酶（从乳汁中提取），过程如图所示。其中编号①～⑨表示过程；质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成而控制亮氨酸的合成（亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸），基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制性内切核酸酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题：

限制酶	BamHI	BglII	HindIII	XbaI
识别序列和切割位点	G'GATCC	A'GATCT	A'AGCTT	T'CTAGA

(1)过程②需要的限制性内切核酸酶是____________，在③中，B与切割后的质粒S用______酶连接，在两个片段相邻处形成______，获得重组质粒T。
(2)为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是____________。为达到筛选目的，培养基的营养成分中特殊之处是____________。若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中，实验组以待测的样本DNA为模板，使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增，同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组，将以____________为模板的组别作为阴性对照组。
(3)过程⑧中______（填“需要”或“不需要”）添加胚胎成纤维细胞，图中早期胚胎的______（填结构）将发育成完整转基因羊个体。

5 . 随着我国“全面二胎”政策的实施，一些高龄夫妇借助试管婴儿技术实现了自己的愿望，结合所学知识回答下列问题。
（1）哺乳动物的体外受精主要包括____________、_________和受精等几个主要步骤。
（2）受精后形成的受精卵要移入_______培养液中继续培养一段时间再移植到母体内，早期胚胎发育到_______阶段的某一时刻，会冲破____________，称之为“孵化”。
（3）为了及时检测受孕情况，科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制出了早孕试纸。要获得该抗体，需要先将_____________注射到小鼠体内，培养一段时间之后，将从小鼠脾脏中提取出的浆细胞和小鼠的___________细胞融合，通过__________筛选，从而获得阳性克隆的杂交瘤细胞，并最终获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体。

6 . 胎牛血清（FBS）是天然的培养基，能够在多种动物卵母细胞的成熟过程中提供足够的营养物质，起到非常好的促进效果。下表是后期胚胎培养液（CR2后液）中添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响情况，下列叙述正确的是（　　）

胎牛血清（FBS）的不同浓度对牛核移植胚胎发育的影响
组别	培养液	卵裂率/%	囊胚率/%
对照组	CR2后液	59．17±1．34	13．53±2．04
实验组1	10%FBS＋CR2后液	62．14±1．78	13．78±2．77
实验组2	20%FBS＋CR2后液	68．95±4．15	26．09±2．20
实验组3	30%FBS＋CR2后液	62．02±8．64	8．78±3．20

A．若统计每组实验的桑葚胚率，其数值应小于囊胚率

B．添加20%FBS是促进核移植胚胎发育的最适浓度

C．胚胎培养过程要在CO2培养箱中进行

D．添加不同浓度的FBS对卵裂率和囊胚率均有促进作用

7 . 一对表现型正常的夫妇，生了一个β地中海贫血症患儿。在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断（基因检测位点HBB），最终喜获一健康女婴。回答下列问题：
(1)体外受精主要包括____________、___________、受精等主要步骤。
(2)形成的受精卵在卵裂过程中胚胎总体积_____________（填“增大”“缩小”或“不增加或略有缩小”），原因是___________。
(3)通常采用β地中海贫血症诊断的金标准——Southern技术进行产前基因诊断，该技术用已知核苷酸片段加以标记作为探针，通过分子杂交来检测待测样品中是否存在互补的核酸序列。临床检验证明该技术是有效的，且具有稳定性强、检测率高、检测准确等优点。
①基因诊断的主要原理是___________。
②医生采用Southern技术对胎儿进行了准确的基因检测，让该夫妇最终喜获健康女婴。检测基因的思路是____________。

8 . 判断下列有关胚胎工程的相关叙述
(1)精子穿过透明带，触及卵细胞膜的瞬间发生卵细胞膜反应(      )
(2)卵子受精的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核(      )
(3)在胚胎发育过程中，细胞的分化出现在桑葚胚期(      )
(4)内细胞团将来发育成胎膜和胎盘(      )
(5)早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需要加入血清(      )
(6)在优良母畜的饲料中添加一定量的促性腺激素，可达到超数排卵的目的(      )
(7)胚胎移植技术中对供体和受体要进行完全相同的激素处理(      )
(8)小鼠胚胎干细胞可来自对囊胚内细胞团的分离培养(      )
(9)胚胎分割移植时应选取发育良好、形态正常的囊胚或原肠胚(      )

10 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

   

(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②卵细胞膜反应；③透明带反应；④穿越透明带；⑤精子入卵。其正确的顺序为___________________（填序号）。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射___________________。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有__________；图中标号3为__________细胞，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且___________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是细胞膜具有___________功能。
(5)图1中胚胎移植的犊牛的性别为___________（雌性、雄性、不能确定），克隆羊多利的性状和_____（黑面绵羊\白面绵羊）最接近。