20. 研究表明, Lm - PHB2蛋白在细胞核内起调节细胞周期的作用。为研究 Lm-PHB2蛋白的生物学活性, 研究人员进行了以下实验。RT- PCR是将RNA的反转录(逆转录 , RT)和cDNA的聚合酶链扩增(PCR)相结合的技术, LacZ基因的编码产物在x - ga1和IPTG存在下, 可使大肠杆菌菌落呈现蓝色, 否则菌落呈现白色。 回答下列问题.
(1)过程①需要的酶有
________, 该过程需要在目的基因上添加适宜的酶切位点, 扩增时, 引物和酶切位点的设计依据分别是Lm-PHB2基因两侧的脱氧核苷酸序列和
_________。
(2)过程③中筛选和培养大肠杆菌的培养基中需要加入
________和碳源、氮源、水和无机盐 等物质, 挑取
_______色菌落中的微生物培养并提取质粒, 用限制酶进行酶切, 再对产物进行检测。
(3)为检测过程⑤得到的大肠杆菌是否表达Lm- PHB2基因, 研究人员以注射了
_____后获得的小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞制备单克隆抗体, 之后再用制备的单克隆抗体与大肠杆菌中蛋白质进行
______实验。