25. 如图所示的质粒中,Tet
r为四环素抗性基因,LacZ′基因的表达产物能使白色的大肠杆菌菌落变成蓝色。现用EcoRⅠ切割目的基因及质粒载体并进行连接,将得到的重组质粒转化大肠杆菌,以对目的基因进行保存和扩增。请回答下列问题:
(1)将目的基因和质粒载体连接需使用的工具酶是
____________。为将载体导入大肠杆菌,常用Ca
2+处理使之处于
________________。
(2)LacZ′基因在基因工程中起
__________基因的作用。为筛选导入重组质粒的大肠杆菌,应在培养基中加入
___________,筛选自色菌落。
(3)若需要将这个质粒改造成基因工程表达载体,还需要插入
________和
________部分。将改造后的表达载体和目的基因经EcoRⅠ酶切连接,并成功导入受体细胞后,发现仍有部分细胞不能表达出目的蛋白,最可能的原因是
__________________________________。为了避免上述情况发生,最好用两种限制酶切割目的基因和表达载体。
(4)我国对农业转基因生物实施标识制度,比如由转基因大豆加工制成的大豆油,标注为“本产品加工原料中含有转基因大豆,但本产品已不再含有转基因成分”,其相关的生物学依据是
_______________。