【推荐1】蓝莓含有丰富的维生素、多酚等天然活性成分，被赞为浆果之王，猕猴桃含大量挥发性香气成分。研究小组成员以蓝莓和猕猴桃为原料，尝试酸制出蓝莓—猕猴桃复合型果酒、果醋。酿制流程如图1所示。回答下列问题：
   
(1)将蓝莓（包括果皮）和猕猴桃组织按一定比例混合，破碎后加入适量的水，再加入果胶酶进行酶解5小时，果胶酶处理的目的是___________。
(2)接种1是指接种酵母菌的过程，分离酵母菌应使用___________培养基。果汁为酵母菌的生长和繁殖提供的营养成分有___________。
(3)酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现酸味，其原因是___________。
(4)果酒转果醋的发酵除了要进行接种2的步骤，还需要控制的条件有___________。果酸制成功后，某同学用稀释涂布平板法测定果醋中某菌种的数量时，在同一稀释倍数下涂布了3个平板，统计的菌落数分别是36、187和195，这三个数据的平均值并不适宜作为该菌种数量，理由是___________。
(5)不同的初始糖浓度对蓝莓—猕猴桃复合型果酒的酒精度和感官评分的影响如图2所示。综合来看初始糖浓度为__________时，果酒品质最好。
   

【推荐3】β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇，广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质，而植物萃取则周期长、成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），实验过程如图所示。回答下列问题：
       
(1)初筛过程所用的接种方法是__________ 。该实验需制作多种培养基，这些培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、_______________等物质，培养基制作后需使用_______________法进行灭菌，灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知，初筛、复筛及再次复筛的培养基中，添加的β-苯乙醇的浓度应__________（填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”），理由是___________。
(2)若实验过程中平板上的菌落过于密集，应进一步__________ ，便于菌落计数与分离。计数所得结果将比实际的活菌数低，原因是_____________ 。
(3)若取稀释倍数为10⁴的0．1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定，计算得出每毫升菌悬液中含4．5×10⁶个菌体，则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是__________个。将初筛获得的菌株进行液体培养，其目的是_________。

【推荐1】回答下列与传统发酵技术有关的问题：
(1)制作果酒、果醋和泡菜需要的主要菌种分别是___________，这三种菌中的_____（填菌种）具有以核膜为界限的细胞核。
(2)家庭中用同一装置制作果酒和果醋时，要先制作果酒再制作果醋，而不能先制作果醋再制作果酒，原因是___________。发酵液宜装到发酵瓶容积的_______，目的是__________（答出两点）。
(3)泡菜腌制过程中要依据亚硝酸盐含量的变化规律，选择亚硝酸盐含量_________的时间段食用。在制作泡菜时需要创造无氧环境，请列举一种有利于创造无氧发酵环境的措施：_____________。

【推荐2】2022年“3·15”曝光的老坛酸菜给人们敲响了食品安全的警钟。老坛酸菜是一种腌菜或者叫泡菜，古称菹，《齐民要术》中详细介绍了祖先用白菜（古称菘）等原料腌渍酸菜的多种方法。
泡菜制作过程主要分三个阶段：
发酵初期：主要是大肠杆菌、酵母菌代谢活跃。
发酵中期（风味最佳）：乳酸菌活跃使乳酸不断积累。
发酵后期：乳酸继续增加，到一定程度后会使乳酸菌的生长繁殖被抑制。
回答下列问题：
(1)制作传统泡菜所利用乳酸菌的来源是___。制作时不能将煮沸的盐水直接倒进装入菜料的泡菜坛中，原因是___。
(2)发酵初期，泡菜坛中氧气含量的变化是___。为达到适宜乳酸菌发酵的气体环境，家庭使用泡菜坛制作泡菜时可采取___措施。
(3)发酵中期泡菜坛内发生的主要变化是___（用化学反应式的形式表达）。
(4)被曝光的质量不合格“土坑酸菜”生产流程为：在田地里挖出土坑铺上防水塑料膜，直接将蔬菜加上盐、水及必备辅料后在自然环境下发酵。这样生产出来的酸菜容易带有致病杂菌而导致腐败，理由是___。
(5)进行销售的泡菜食品还需要进行食品卫生微生物学检验，如对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等微生物进行培养和计数，该过程中所用到的接种方法是___。

【推荐3】如图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程。回答下列问题：

(1)家庭酿制苹果酒时，发酵所用的菌种主要来自____，发酵过程中需要将温度维持在____℃。酒精在发酵微生物的____（填细胞结构）中产生，通常情况下，即使原料充足，发酵液中的酒精含量达到15%左右就很难再继续增加，其原因可能是____。由于____，因此发酵液的pH会随发酵时间的延长逐渐下降。
(2)若果酒密封不严，果酒表面会形成一层白膜，这主要是____繁殖形成的；泡菜发酵过程中，即使密封严格，泡菜液表面也会形成一层白膜，这主要是_____繁殖形成的。真空包装的泡菜在不漏气的情况下出现涨袋现象，原因可能是____。

【推荐1】对水稻H品种诱变，获得白叶枯病突变体N（基因型aa），它在没有病原菌侵染的情况下能自发形成类似白叶枯病表型。从突变体N中克隆出位于9号染色体上的关键基因a。回答下列问题：
(1)将突变体N与野生型水稻H1（表型正常，属于H品种，基因型AA）杂交，F₁表型均为野生型，F₁的基因型为___________；F₁自交，F₂中野生型与突变体比例为___________。
(2)分析水稻N的a基因和水稻H1的A基因完整序列发现，a基因是在A基因内部插入了一段654bp（bp表示碱基对）的DNA形成的，据此推断由水稻H品种诱变为突变体N的过程中肯定发生了___________（填“基因突变”或“染色体结构变异”）。
(3)用该突变体N与另一野生型水稻H2（表型正常，属于H品种）杂交，F₁全为野生型，F₁自交，F₂野生型和突变体比例为15：1。据此推断该性状还与另一对基因有关，突变体N、野生型水稻H2的基因型依次为aabb、AABB，则野生型水稻H1的基因型为___________。
(4)比对水稻基因组发现，野生型水稻H2的3号染色体上也存在上述654bp序列。为探究突变体N产生的原因，根据野生型水稻H2的3号染色体和突变体水稻N的9号染色体上654bp序列外侧的DNA序列各设计一对引物（如图1所示），对野生型水稻H2、突变体水稻N基因组DNA进行PCR，产物的凝胶电泳结果如图2（M为标样，引物忽略不计）所示。   

据图分析突变体水稻N产生的原因是___________。
研究者据此猜测H2（AABB）诱变培育出N（aabb）的过程中，基因a与基因b同时产生且相关联，则野生型水稻H1形成的原因是______________________。用上述两对引物对野生型水稻H1基因组DNA进行PCR，若产物电泳所得两个条带分别为___________bp、___________bp，则结果支持研究者的猜测。

【推荐2】CRISPR-Cas12a系统是第二类用于编辑哺乳动物基因组的CRISPR-Cas系统，该系统主要包含crRNA和Cas12a蛋白两部分，crRNA能特异性识别并结合特定的DNA序列，从而引导Cas12a蛋白到相应位置剪切DNA。某科研团队基于CRISPR-Cas12a系统对宫颈癌细胞中的KIFC1基因进行敲除，来探讨KIFCI基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。

(1)在CRISPR-Cas12a系统中，crRNA的序列与目的基因特定碱基序列部分结合，结合区域最多含____种核苷酸；细菌细胞中的____也能起到类似Cas12a蛋白的作用。若要将KIFCI基因从目标DNA上剪切下来，需要设计____种crRNA。
(2)为保证目的基因与PX458质粒正确连接，在扩增目的基因时，应在引物端加入相应的限制酶序列，其中P1的碱基序列为5′CAGCTGCTC3′。采用PCR技术对一个DNA进行扩增时，第n次循环共需要引物____个。
(3)在目的基因与PX458质粒连接时，可用____（填“E.coliDNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）进行连接。
(4)将crRNA-Cas12a重组载体成功转染至HeLa细胞，与对照组相比，实验组中KIFCl蛋白表达量如图2所示，细胞数目的变化如图3所示，由此可得出的结论是____，判断依据是____。

【推荐1】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2 中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

限制酶	BamHI	HingIII
识别序列及切割位点	→GGATCC/CCTAGG→	→AAGCTT/TTCGAA→
限制酶	EcoRI	Sma I
识别序列及切割位点	→GGATCC/CCTAGG→	→GGATCC/CCTAGG→

(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________、_________个游离的磷酸基团。
(2)要用图1中的质粒和图2中外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是__________。
(3)与只使用 EcoRⅠ相比较，使用 BamHⅠ和 HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA 的优点在于可以防止______。
(4)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入____酶。
(5)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是_____。

【推荐2】下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因，将其“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：


(1)图1表示在上图过程①中同时利用EcorI、EcoR52切割目的基因和运载体，以形成两种不同的黏性末端，这种双酶切的优点是___________。
(2)图中过程③涉及的生物技术是___________；在含四环素的培养基中培养植物细胞，导入重组质粒的细胞能否增殖_____，依据是_________。
(3)判断基因转化是否成功，应对转基因植物进行鉴定，如果培育成功的植株能抗虫，还应进行____________水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，往往有很多植株不再具有抗虫性，原因是___________，为获得稳定遗传的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的_______。

(4)图2表示苏云金芽孢杆菌细胞中的某些生命活动过程，则①处于需要有_____酶的催化，①②两处共有的碱基配对方式是_______。

【推荐3】径柳匙叶草是一种泌盐植物。科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na^＋／K^＋逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了转基因耐盐棉花新品种。图1是获取的含有目的基因的DNA片段，Sau3A I、EcoR I、BamH I为三种限制酶，图中箭头所指为三种限制酶的切点；图2是三种限制酶的识别序列与酶切位点示意图；图3是土壤农杆菌中用于携带目的基因的Ti质粒结构示意图。回答下列问题：

(1)利用PCR技术获取目的基因的前提是____________，与细胞内DNA复制相比，PCR反应体系中加入的酶具有____________的特点。
(2)为使目的基因和质粒定向拼接，应选用________________酶切割含目的基因的DNA片段，形成的黏性末端利用____________酶进行连接，形成的重组质粒不一定能被BamH I切割，理由是_________________。
(3)从分子水平上检测棉花细胞中TaNHX2基因是否表达的方法是____________，从个体水平上检测棉花细胞中TaNHX2基因是否表达的方法是______________________________________。