1 . 近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误的是（　　）。

A．向导RNA可在RNA聚合酶催化下，以核糖核苷酸为原料合成

B．Cas9蛋白的作用是破坏DNA特定位点脱氧核苷酸之间的氢键

C．向导RNA中的识别序列可与目标DNA单链特定区域进行碱基互补配对

D．该技术由于存在脱靶等风险，可能会带来一系列安全性及伦理问题

2 . 阅读下列材料，回答问题。
CRISPR/Cas9基因编辑技术可以按照人们的意愿精准剪切、改变任意靶基因的遗传信息，对该研究有突出贡献的科学家被授予2020年诺贝尔化学奖。我国科学家领衔的团队利用CRISPR/Cas9等技术，将人的亨廷顿舞蹈病致病基因（HTT基因）第1外显子（其中含150个CAG三核苷酸重复序列）“敲入”猪基因组内，获得了人-猪“镶嵌”HTT基因，利用胚胎工程技术成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型。
CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理是由一条单链向导RNA引导内切核酸酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中的识别序列，可人为选择DNA 上的目标位点进行切割（如图）。

(1)下列有关技术或工程，叙述错误的是

A．PCR技术是获得人HTT基因常用的方法，向缓冲溶液中分别加入人HTT基因模板、4种核糖核苷酸及引物、Taq酶等

B．Cas9在功能上属于限制性内切核酸酶

C．为确认实验猪细胞基因组内是否含有人-猪“镶嵌”HTT基因，常用的检测手段包括PCR技术及DNA分子杂交技术

D．成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型需要用到细胞工程和胚胎工程

(2)下列关于CRISPR/Cas9基因编辑技术的原理，相关叙述错误的是（       ）

A．向导RNA可通过转录形成	B．向导RNA中的双链区遵循碱基互补配对原则
C．Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成	D．Cas9蛋白通过破坏目标DNA的氢键实现对DNA的切割

3 . 下图1是获取用于构建基因表达载体的含人生长激素基因的DNA片段(DNA复制子链延伸方向是5′→3′，转录方向为左→右)示意图，图2是所用质粒示意图，其上的Amp^r表示青霉素抗性基因，Tet^t表示四环素抗性基因。有关限制酶的识别序列和酶切位点如下表。请据图回答：

限制酶识别序列和酶切位点表

限制酶	HindⅢ	BamHⅠ	PstⅠ	EcoRⅠ	SmaⅠ	BglⅡ
识别序列(5′→3′)	A↓AGCTT	G↓GATCC	C↓TGCAG	G↓AATTC	CCC↓GGG	A↓GATCT

(1) ①过程催化形成磷酸二酯键的酶有____________________，合成的人生长激素基因中________(选填“有”或“无”)与终止密码子相应的碱基序列。
(2) 引物1由5′→3′的碱基序列为________________________，引物2应含有限制酶________的识别序列；从图1的过程②开始进行PCR扩增，第六次循环结束时，图中用于构建基因表达载体的DNA片段所占比例是________。
(3) 在构建表达载体的过程中对图中质粒、DNA片段进行合适的完全酶切后，向两者的混合物中加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成________种环状DNA。

(4) 2018年11月基因编辑婴儿事件震惊了世界，舆论一片哗然，某科研团队利用“CRISPR/Cas9”技术将受精卵中的艾滋病病毒受体基因CCR5进行修改，拟培育出具有艾滋病免疫能力的基因编辑婴儿。下图3为向导RNA引导Cas9蛋白切割CCR5基因(目标DNA)示意图。
①向导RNA的合成需要________酶。Cas9蛋白是一种________酶。
②“GRISPR/Cas9”技术，是利用________法将Cas9蛋白和特定的引导序列导入受精卵中发挥基因编辑作用。
③基因编辑婴儿引起舆论的关注，很多科学家表示反对，请给出合理的理由______________。

4 . 基因组编辑技术是研究基因生物功能的重要手段，下图是对某生物B基因进行定点编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，相关说法不正确的是

A．靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对

B．核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键

C．被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因

D．通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能