1 . 镰状细胞贫血病因是由基因突变而导致的一种遗传病，构成患者的β珠蛋白分子中缬氨酸代替了谷氨酸，致使去氧血红蛋白溶解度降低并聚集形成纤维结构，压迫细胞膜致红细胞弯曲成镰刀状。临床表现为慢性溶血性贫血、堵塞毛细血管而引起慢性局部缺血，从而导致器官组织损害。近年来人类首款基于CRISPR技术的Casgevy疗法获准用于治疗镰状细胞贫血等疾病。图1为人体血红蛋白在不同生长发育时期的α、β、γ珠蛋白组成变化，图2为利用CRISPR技术作用BCL11A基因的增强子作用图解。请根据所学知识据图回答下列问题：

(1)胎儿血红蛋白主要以α₂γ₂形式存在，成人主要以α₂β₂形式存在，造成二者在不同生长发育时期血红蛋白的组成方式不同的根本原因是________。
(2)γ珠蛋白基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，BCL11A蛋白是一种转录因子，可抑制γ珠蛋白的合成。出生前半年，BCL11A蛋白的表达量________，γ珠蛋白基因的表达水平________。镰状细胞贫血患者一般在出生半年后出现明显症状，而婴儿早期通常无症状，请尝试解释原因：________。
(3)据图2判断，Cas9是一种特异性切割DNA的酶，但首先需要依赖________识别基因组DNA上的靶点序列，识别的原理是________，结合后才能使DNA分子在特定序列附近被切断。
(4)Casgevy疗法大致过程：从患者体内提取合适的造血干细胞，通过电穿孔导入特异性靶向BCL11A增强子的CRISPR-Cas9基因编辑系统，获得________细胞，恢复胎儿期γ珠蛋白的合成。利用此技术还可以通过________达到治疗镰状细胞贫血的目的。

3 . 科学家创造了“基因敲除”技术：将外源基因整合到小鼠胚胎干细胞的DNA同源序列中，使某一个基因被取代或破坏而失活，然后将“修饰后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎，形成嵌合体小鼠。科学家已经利用上述技术成功地把人类囊肿性纤维化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊肿性纤维化病的小鼠。下列有关叙述错误的是（       ）

A．通过上述“基因敲除”技术可以定向改变生物体的某一基因

B．在“基因敲除”中需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶等

C．这种嵌合体小鼠长大后，体内存在外源基因，但不会遗传给后代

D．“基因敲除”技术有利于人类对某些遗传因素引发的疾病进行研究

4 . 2019年1月24日，中科院神经科学研究所的科学家利用体细胞核移植技术、CRISPR/as9基因编辑技术，成功构建5只体细胞BMAL1基因敲除的生物节律紊乱的克隆猴，可作为研究生物节律紊乱等人类疾病的动物模型。图一为体细胞核移植技术培育食蟹猴的操作过程，图二为CRISPR/as9基因编辑技术，Cas9蛋白依据sgRNA片段切割DNA示意图（sgRNA为一段能特异性引导Cas9到靶序列处的RNA片段）。

请回答下列问题：
（1）动物细胞核移植技术分为体细胞核移植和_______________，其中前者难度更大，原因是_______________，核移植技术中目前普遍使用的去核方法是________________。此外体克隆猴的诞生还需要动物细胞培养、胚胎移植和_______________等技术的支持。
（2）Cas9-sgRNA复合体能与DNA分子上的特定序列结合，并在合适位点切断DNA双链，由此可知Cas9相当于基因工程中的_______________酶，该复合体能够精准识别某核苷酸序列的原因可能是________________。
（3）体细胞克隆猴常作为人类疾病研究的实验动物模型，与用多只普通猴做实验相比，使用遗传背景相同的克隆猴做实验的优点是______________________________。

5 . 下图是采用CRISPR技术对某生物基因进行编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的位点进行切割，下列叙述正确的是（       ）

A．根据破坏B基因后生物体的功能变化，可推测B基因的功能

B．基因定点编辑前需要设计与靶基因全部序列完全配对的sgRNA

C．图中sgRNA1的碱基序列和sgRNA2碱基序列相同或互补

D．可利用此技术编辑生殖细胞相关基因以期生育出免疫艾滋病的婴儿

6 . 近年诞生的具有划时代意义的 CRISPR/Cs9基因编辑技术可简单准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图所示）。下列相关叙述错误的是（     ）

A．Cas9蛋白可以水解磷酸二酯键

B．向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C．向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D．若α链剪切点附近序列为…TCCAGAATC…，则相应的识别序列为…UCCAGAAUC…

7 . 对基因进行编辑是生物学研究的重要手段，如图是对某生物B基因进行定点编辑的过程，该过程中用 sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，相关说法正确的是（       ）

A．通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能

B．基因定点编辑前需要设计与靶基因序列完全配对的sgRNA

C．核酸内切酶Cas9可断裂核糖核苷酸之间的化学键

D．被编辑后的B基因因不能转录而无法表达相关蛋白质

8 . CCR5是人体的正常基因，其编码的细胞膜CCR5蛋白是HIV-I(人类免疫缺陷病毒I型）感染的“入口”。有研究用“CRISPR/Cas9”技术对该基因进行定点编辑并植入胚胎

（1）将Cas9蛋白和向导RNA序列注入受精卵的方法称为____________________技术。
据图1可知，“CRISPR/Cas9”技术中，首先由具识别序列的________________引导定位至目标DNA序列，然后由Cas9蛋白将DNA切断。这两种物质的作用结果类似于基因工程中______________的作用，若识别序列为……UCCAGAAUC……则DNA对应区域α链的碱基序列为___________________。
（2）基因编辑过程中可能会产生“脱靶”（对CCR5基因以外的其他基因进行了编辑）现象，最可能的原因是__________________________________________________________________。
（3）胚胎2的两个变异CCR5基因编码的蛋白质中，氨基酸数目都减少，其原因是___________________都可能使转录出的mRNA序列改变，导致终止密码子提前出现。变异的CCR5蛋白无法装配到细胞膜上，从而实现对HIV-I的抗性。

9 . 近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见图）。下列相关叙述错误的是

A．Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

B．向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C．向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D．若α链剪切点附近序列为……TCCAGAATC……，则相应的识别序列为……UCCAGAAUC……