4 . 传统的木薯乙醇发酵工艺所使用的普通酿酒酵母缺乏水解淀粉的酶系，需要经过蒸煮、液化、糖化等工序将木薯中的淀粉水解成葡萄糖后才能用于酵母菌发酵。为了提高制备乙醇的效率，研究者欲通过基因工程获得能够高效表达和分泌淀粉酶的重组酿酒酵母。请回答下列问题：
(1)若要利用从细菌中获得的含淀粉酶基因（amy）的DNA片段为模板，则通过PCR技术获得大量amy时，还需要在缓冲液中添加引物、4种脱氧核苷酸、________________________、镁离子等，需要添加引物的原因是_________________；扩增____________轮后能得到含目的基因的等长的DNA双链序列。
(2)研究发现，如果amy上特定位置的GTG（位置如图1）突变为ATG，淀粉酶的活性将大大提高。为了通过PCR引入该定点突变，获得高效的淀粉酶，需要如何设计PCR引物？_____________。

   

(3)用限制酶BamHI与SpeI切割含amy的DNA片段和载体pScIKP，然后将amy与载体相连接，构建重组质粒pSc-amy。对pScIKP和目的基因采用双酶切的目的是____________________。
(4)已知淀粉遇碘变蓝，而葡萄糖遇碘无此现象。为了分离出能够高效表达淀粉酶基因的重组酵母，可使用含__________的培养基。培养3天后，用碘熏蒸染色，结果如图2所示。若你是研究者，将选择菌落__________（填数字）进行扩大培养，原因是________________________。

   

6 . ω-3多不饱和脂肪酸在预防和治疗心脑血管疾病、癌症等多种疾病方面有着重要作用，然而人和哺乳动物因为自身缺少ω-3脂肪酸去饱和酶基因，故必须从食物中获得ω-3多不饱和脂肪酸。研究发现，ω-3脂肪酸去饱和酶可在普通猪体内将其富含的ω-6饱和脂肪酸转变成ω-3多不饱和脂肪酸，ω-3脂肪酸去饱和酶由ω-3脂肪酸去饱和酶基因（sFat-1基因）表达产生，科学家据此利用基因工程和胚胎工程技术培育了一种富含ω-3多不饱和脂肪酸的克隆猪，其培育过程如图所示。请回答下列问题：

   

(1)选择2号猪的胎儿期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是___________________。
(2)收集并选取1号猪处在________________________（填时期）的卵母细胞用于核移植，还需通过____________去核。对3号猪进行____________处理，以便后期胚胎移植成功。
(3)将体细胞注入去核卵母细胞比早期核移植中将核注入去核卵母细胞更有进步意义，原因是________________________。融合形成的重构胚还需用____________（答出一种）激活，使其完成细胞分裂和发育进程。
(4)为获得更多的转sFat-1基因猪，可在胚胎移植前进行____________。
(5)结合题干信息和所学知识分析，大规模培育转sFat-1基因克隆猪的意义是_____________（答出两点）。