1 . 研究人员成功构建了高比例胚胎干细胞“嵌合体猴”。将绿色荧光蛋白（GFP）标记的胚胎干细胞（4CL 干细胞）注入食蟹猴的桑葚胚以获得嵌合囊胚，部分流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）

A．培育出的嵌合体猴，其单个细胞的遗传物质是4CL 干细胞与猴细胞的遗传物质之和

B．桑葚胚时期的细胞一般都具有全能性

C．植入胚胎前通常需要对代孕母猴注射相关的激素促使其超数排卵

D．嵌合原肠胚阶段进行胚胎分割可能会产生更多的嵌合体猴

2 . 为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体。下列有关制备过程的叙述，错误的是（　　）

A．需要用CD14多次免疫小鼠，以获得能产生特定抗体的B淋巴细胞

B．制备单克隆抗体过程体现的原理有细胞膜的流动性、细胞增殖、染色体数目变异等

C．第一次筛选后获得的杂交瘤细胞均能产生抗CD14 的单克隆抗体

D．对杂交瘤细胞进行抗体检测时可采用抗原—抗体杂交技术

3 . 青霉素是世界上最早应用于临床的抗生素，早期从青霉菌中提取的量少，价格昂贵。如今利用发酵工程技术进行工业化生产，产量大大提高。下列关于利用发酵工程生产青霉素的叙述，错误的是（　　）

A．在培养青霉菌时，可将培养基调至酸性

B．利用射线处理青霉菌，有利于提高青霉菌突变频率

C．若生产得到的青霉素产量不高，则是细菌污染造成的

D．发酵过程中，发酵条件会影响青霉菌的生长和代谢物的形成

4 . 下图1是我国科学家获得体细胞克隆食蟹猴中中和华华的具体过程。已知正常胚胎发育初期会发生染色质的重塑，即DNA去甲基化和染色质上组蛋白的乙酰化，而核移植得到的胚胎（重构胚）中来自体细胞的染色质会抵抗这种重塑，用去甲基化酶（K）处理重构胚可提高胚胎发育率。现科研人员用K和T（去乙酰化酶抑制剂）处理重构胚后，再进行胚胎移植，检测并计算出发育成囊胚的比例（囊胚率=囊胚数/重构胚），结果如图2。下列相关说法错误的是（　　）

   

A．除显微操作法外，梯度离心法也可以达到去核的目的

B．重构胚移入C猴之前需要用电刺激、Ca2+载体等激活

C．K、T分别降低了DNA甲基化与组蛋白乙酰化程度

D．在降低染色质重塑抵抗过程中，K和T可能起协同作用

5 . 2006年，英国科学家利用病毒将某些基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞中获得了iPS细胞。2022年我国科学家突破相关技术难关，将人类多能干细胞转化为8细胞阶段全能性胚胎样细胞（简称8CL细胞）。从ES细胞到iPS细胞再到8CL细胞的技术突破，不仅为早期胚胎发育的基础研究提供了一种新的体外研究系统，也使个体化器官再生最终有可能成为现实。下列相关叙述错误的是（　　）

A．ES细胞中存在基因的选择性表达过程，具有组织特异性

B．iPS细胞也可以通过直接将特定蛋白导入细胞获得

C．体外培养8CL细胞需要在合成培养基中加入动物血清等天然成分

D．以上研究说明高等动物体细胞的分化在体外特定条件下也是可逆的

6 . 科学家为了提高干扰素的抗病毒活性和储存稳定性，采用重叠延伸PCR技术，将干扰素基因中相应位点的C//G碱基对特定突变为G//C碱基对，从而使干扰素中的第17位氨基酸由半胱氨酸变成丝氨酸。该技术采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来，获得定点突变的干扰素基因，然后导入大肠杆菌生产表达新的干扰素，原理如下图。下列说法正确的是（　　）

A．通过“PCR体系2”获得由c、d链构成的完整DNA分子至少需要进行3次循环

B．可以通过a链和d链或者b链和c链获得定点突变的干扰素基因

C．“PCR体系2”中加入的引物是引物3和引物4

D．通过重叠延伸PCR技术对干扰素的改造属于蛋白质工程

7 . 基因敲除是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。科学家常借助基因敲除技术，使特定的基因功能丧失，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。来源于λ噬菌体的Red同源重组系统就可用于大肠杆菌等一系列工程菌的基因敲除。
(1)Red同源重组系统由λ噬菌体的exo、bet、gam3个基因组成，分别编码EXO、BET、GAM3种蛋白质。EXO为双链核酸外切酶，可以结合在双链DNA的末端，按照5'→3'的方向逐步降解DNA单链，进而产生___（选填“3′”或“5′”）黏性末端；BET结合在exo外切产生的末端单链上，促进其与受体细胞内正在复制的靶序列进行同源重组，替换靶基因；GAM蛋白能够抑制受体细胞内核酸外切酶活性，进而___（选填“抑制”或“促进”）受体细胞对外源DNA的降解。
(2)Red同源重组技术要用到质粒pKD46，该质粒含有温度敏感型的复制起点oriR101，在30℃培养时可以正常复制，而高于37℃时会自动丢失；还有由ParaB启动子调控的exo、bet、gam基因，需要L-阿拉伯糖诱导表达。λ-Red系统介导的基因敲除过程如图1所示。
   
①首先，要将pKD46导入处于___（某种状态）的大肠杆菌，为使pKD46在细菌内正常复制、Red重组酶正常合成，必需满足___的培养条件。过程Ⅰ是用含有青霉素的培养基筛选成功导入了pKD46的大肠杆菌，这说明___。
②然后，用PCR技术扩增卡那霉素抗性基因，PCR引物由两部分组成，靠近5'端的区域为___的序列，靠近3'端的区域与模板DNA互补，将获得的线性DNA片段导入大肠杆菌，通过同源重组将大肠杆菌基因组DNA上的特定靶基因敲除。
③为筛选出同源重组成功（即靶基因被敲除）的大肠杆菌，过程Ⅱ所用的培养基必需含有___；然后再通过___，把质粒pKD46除去。
(3)上述操作使得大肠杆菌基因组DNA上的靶基因被卡那霉素抗性基因取代，若想将卡那霉素抗性基因也清除，需要借助于FLP/FRT位点特异性重组系统。FRT是有方向性的，不同方向FRT位点经重组酶FLP作用结果不同，具体如图2所示。

   

因此在PCR扩增卡那霉素抗性基因时需在该基因___（填字母）。

A．左侧引入一个FRT位点

B．右侧引入一个FRT位点

C．两侧引入两个同向的FRT位点

D．两侧引入两个反向的FRT位点

8 . A型塞内卡病毒（SVA）会导致猪患水疱传染病，症状与猪口蹄疫等传染病非常相似。已知SVA核衣壳上的主要蛋白质VP1可作为该病毒诊断蛋白。研究人员以小鼠为对象，利用单克隆抗体技术获得了与VP1结合位点不同的两种单克隆抗体2E10和3E4。为进一步快速精确检测出该病毒，研究人员利用以上两种单克隆抗体制作出快速检测试纸条，如下图所示。结合垫处含有过量胶体金标记的2E10，可向右扩散，当胶体金颗粒聚集时才会出现可见条带，检测线、质控线处包埋固定的抗体依次是3E4和山羊抗鼠IgG（可特异性结合各种鼠源抗体）。下列相关叙述正确的是（　　）

   

A．制备单克隆抗体过程中第二次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞

B．3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点相同

C．病毒检测阴性的结果为检测线和质控线均无条带出现

D．病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带

9 . 为探究血清对正常细胞和癌细胞培养的影响，用合成培养基、添加了血清的合成培养基分别培养癌细胞、正常细胞，结果如图所示。下列叙述错误的是（　　）

A．培养细胞时，环境应该是无菌、无毒的

B．实验的自变量是培养时间和细胞类型

C．相比于正常细胞，有无血清对癌细胞增殖的影响更小

D．培养细胞时，CO2的主要作用是维持培养液的pH

10 . RT－PCR是将mRNA逆转录（过程Ⅰ）和cDNA（mRNA逆转录产生的互补DNA）聚合酶链式反应（过程Ⅱ）相结合的技术，具体过程如图所示，下列有关说法错误的是（　　）

A．过程Ⅰ和过程Ⅱ的反应体系中主要用到工具酶分别是逆转录酶和耐高温的DNA聚合酶

B．过程Ⅱ中拟对m个单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要m×2n个引物B

C．引物A和B的长度越长、G和C比例越高，则过程Ⅱ内循环步骤中的复性温度就越高

D．利用RT－PCR技术获取的真核生物的目的基因通过转基因技术可以在原核细胞中表达