1 . 甲型流感病毒是一种RNA病毒，包膜表面存在能与细胞膜表面受体结合的血凝素HA（蛋白质）。疫苗接种和病毒检测是流感防控工作的重要举措。请回答下列问题：

(1)可利用基因工程制备重组亚单位疫苗，其技术线路是：提取流感病毒RNA→通过RT-PCR（逆转录PCR）技术扩增筛选HA蛋白基因→构建基因表达载体→导入细胞并培养→提取并纯化HA蛋白→制成疫苗。
①利用RT-PCR技术，获取HA蛋白基因时，需加入______酶；据图甲分析，扩增HA蛋白基因时，应选择的引物为______。基因表达载体构建中为提高目的基因和运载体的正确连接效率，研究人员应在图甲中选择的限制酶是______。
②PCR的产物可通过电泳鉴定，设置如下：1号泳道为标准（Marker），2号泳道是以HA蛋白基因片段为材料做的阳性对照组，3号泳道为实验组。图丙中3号泳道出现杂带，原因一般有______（答出2点即可）。
(2)流感病毒核酸检测可用荧光定量RT-PCR技术，检测原理如图丁。当探针完整时，荧光基团（R）发出的荧光信号被淬灭基团（Q）吸收而不发荧光；当TaqDNA聚合酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q，使R发出的荧光信号并被相应仪器检测到，荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步。若每断裂一个TagMan探针，设置R发出的荧光信号的值为1.如果经n次的PCR扩增，实时荧光信号强度______（填“增强”“减弱”或“不变”），说明样液中病毒的核酸数量为0.

2 . 人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T（cTnT）、肌钙蛋白I（cTnI）和肌钙蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：

(1)细胞培养中，培养液常用___方法灭菌。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是___，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是___。
(2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是___，②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得___。
(3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示：

据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是___，可通过测定产物量来判断待测抗原量。

3 . 某种鸟类（ZW型）的羽毛中，红色（D）对灰色（d）为显性，有条纹（R）对无条纹（r）为显性，其中的1对等位基因位于Z染色体上。现有1只红色有条纹个体与1只灰色有条纹个体杂交，F₁雄鸟中约有1/8为灰色无条纹。下列叙述正确的是（       ）

A．F1出现红色有条纹雌性个体的概率为3/16

B．亲本的基因型为DdZRZr和DdZRW

C．母本产生的配子中含dZR的配子占1/4

D．F1雌性个体中，基因型为rrZdW个体的概率是1/16

4 . 巢式PCR是指先后用外内引物扩增目的基因的方法。其原理为：先以比目的基因大的DNA片段为模板，用外引物（F1，R1）进行扩增，获得大量含目的基因的中间产物，再以扩增后的中间产物为模板，用内引物（F2，R2）扩增目的基因，如图所示。下列说法错误的是（       ）   

A．两对引物的碱基序列不相同，但均应为单链DNA片段

B．第二轮PCR反应能否进行，是对第一轮PCR反应正确性的鉴定

C．由于和两套引物都互补的靶序列较少，该技术可大大提高扩增的特异性

D．如果两套引物一起加入反应体系中，外引物的复性温度应显著低于内引物

5 . 果蝇的正常眼与无眼受一对等位基因控制。研究人员发现基因可能位于常染色体，也可能只位于X染色体，Y染色体上没有等位基因(不考虑基因位于其它位置，也不考虑致死、突变)。以正常眼雌果蝇与无眼雄果蝇为亲本进行杂交，杂交的部分结果如系谱图所示。

(1)据图分析，果蝇无眼性状的遗传方式，可以排除为X染色体________(显性/隐性)遗传的可能。
(2)若控制该性状的基因确定位于X染色体上，那么Ⅲ-1与Ⅲ-2杂交的子代中正常眼雄果蝇的概率是____________。
(3)Ⅱ-2与Ⅱ-3杂交，如果产生足够多的子代，可以用来确定无眼性状的遗传方式。预期可能的结果并得出相应的结论：
①若_____________，则无眼为常染色体显性遗传；
②若_____________，则无眼为常染色体隐性遗传；
③若__________________，则无眼为伴X染色体隐性遗传。

6 . 某昆虫存在三种体色：黄色、灰色、青色。图1是某科研工作者用纯种黄色和纯种灰色昆虫所做的杂交实验结果。图 2 是与体色有关的生化反应原理。下列描述错误的是（       ）

A．F2 中黄色小鼠的基因型有 2 种

B．若F1测交，则后代表现型有 3 种

C．两纯种亲本的基因型分别是 aaBB 和 AAbb

D．控制该昆虫体色的两对基因的遗传遵循基因的自由组合定律

7 . 为探究DNA复制方式，用玉米分生区细胞（2N=20）进行如下实验：将细胞置于含放射性³H标记胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液中培养1个周期，取出细胞冲洗后转移至不含放射性物质的培养液中，继续培养2个周期时间，对每个培养周期的细胞进行取样，检测中期细胞的染色体放射性分布。图甲表示DNA可能存在的三种复制模式，图乙表示中期染色体的放射性分布情况。下列说法错误的是（       ）

A．若第1个周期的中期染色体情况为图乙中的A，则该结果不能确定复制方式为图甲中的a

B．若DNA复制符合图甲的b模式，则可推测第1个周期产生的子细胞中带有放射性的核DNA为20个

C．若DNA复制符合图甲的a模式，则可推测第2个周期产生的子细胞中含有放射性标记的染色体数目为0~20条

D．若DNA复制符合图甲的a模式，则可推测第3个周期的中期染色体情况可能为图乙中的B、C

8 . 某雌雄同株异花传粉的二倍体植物，抗除草剂与不抗除草剂受两对独立遗传的基因控制，相关基因为A、a和B、b，且A对a、B对b为完全显性，只要存在一种显性基因就表现出抗除草剂性状。基因A使雄配子生物育性降低50%，其他配子育性正常。基因B存在显性纯合致死现象。下列选项错误的是（       ）

A．该种植物抗除草剂与不抗除草剂的遗传遵循自由组合定律

B．仅考虑抗除草剂与不抗除草剂这对性状，植株中共有6种基因型

C．基因型为AaBb的植株产生的花粉AB∶Ab∶aB∶ab=1∶1∶2∶2

D．♀甲（Aabb）×♂乙（aaBb），子代抗除草剂植物中含有两种除草剂基因的个体所占比例为1/4

9 . 女性怀孕后会合成并分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG），并且该激素会出现在尿液中。HCG是一种蛋白质，包括α亚基和β亚基。用抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以诊断是否怀孕。如图表示早早孕诊断试剂盒内部试纸条的构造，其中抗体1是以HCG的β亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体2是以HCG的α亚基为抗原利用单克隆抗体技术制备，抗体3是针对抗体1的抗体，抗体2和抗体3分别固定在试纸条的检测 线（T线）和质控线（C线），抗体1进行了胶体金标记，该标记物可以在T线或C线处显色。回答下列问题：

   

(1)女性在妊娠第8天左右，尽管体内HCG含量很低，但仍可用抗人绒毛膜促性腺激素单抗制成的“早早孕诊断试剂盒”作出诊断，体现出单克隆抗体具有_____________的优点。
(2)图1中单克隆抗体2制备的过程中，需要反复向小鼠注射______作为抗原，然后从小鼠的脾脏中获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合。经选择培养后获得的杂交瘤细胞的特点是_______。为了得到能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞，需要进行克隆化培养和抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行，先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是___________。最后将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或________________，从而获取大量的单克隆抗体。
(3)图2表示三位女士的检测结果，其中表示没有怀孕的是______，检测结果无效的是______。出现甲结果的原理是________________________________________。

10 . 土壤盐碱化问题已经成为全球性难题，培育耐盐碱农作物是解决人类粮食安全和农业发展的重要途径。
(1)为研究高粱盐碱响应通路中相关基因AT1的作用，研究人员构建过表达植株（AT1-OE）。如图，为了使目的基因定向拼接到质粒中，应选用限制酶______________同时切割图中质粒和目的基因，构建重组质粒并转入农杆菌。

   

(2)将转化成功的农杆菌与高粱愈伤组织共培养，然后筛选转化细胞，其中转化是指：_____________。
(3)筛选T-DNA成功转入的愈伤组织时，使用既能杀死原核细胞，又能杀死真核细胞的潮霉素，效果优于仅能杀死原核细胞的抗生素（如卡那霉素），原因是_____________。进一步筛选获得所需愈伤组织，并再生成完整植株。同时构建AT1基因敲除植株（AT1-KO）。
(4)检测植株在高碱土壤中的幼苗长势和作物产量，结果发现：相比野生型植株，基因敲除植植株（AT1-KO）_____________，过表达植株（AT1-OE）表型相反，说明AT1在高粱碱胁迫的响应过程中起负调控作用。高碱条件下，植物细胞内H2O2含量升高，推测AT1可能与运输H₂O₂的通道蛋白PIP2有相互作用。细胞内过量的H₂O₂积累会导致氧化应激，从而导致植物细胞死亡，降低植物存活率。研究显示PIP2磷酸化能够促进H₂O₂外排。综合上述信息，解释敲除AT1基因能显著提高植株耐盐碱性的原因是_____________。