2 . 镰状细胞贫血是一种常染色体遗传病，由编码血红蛋白其中一条多肽链（438个碱基对）的基因发生隐性突变导致。该突变等位基因的部分DNA序列如图所示，已知突变后该多肽链的第7个氨基酸变为另一个氨基酸。回答下列问题：

(1)该多肽链的起始端由遗传密码ATG编码（图中下划线位置），图示基因的部分DNA序列中发生突变的3个编码碱基为__________。若使用图中所示引物1和引物2扩增该突变等位基因，则所产生的一个PCR终产物大小预计为__________个碱基对。
(2)已知正常等位基因有限制酶X的识别位点，但突变后的等位基因中的该识别位点已被破坏。从一名镰状细胞贫血基因携带者身上取得DNA样本，进行如图所示分析：

①限制酶X对DNA样本进行消化，破坏了DNA链中的化学键即__________。
②在凝胶电冰结果的图示条带中，电泳迁移速度最快的条带是__________。代表含有突变等位基因的DNA片段是__________。
③经过消化后的PCR产物在凝胶电冰后得到了三条DNA带，分析其原因为__________。

4 . 植物远缘杂交可能会造成核仁显性现象，即源于一个亲本的基因组沉默，而源于另一个亲本的基因组表达。现采用人工去雄授粉的方法，以萝卜（RR，2n=18）为母本、芥蓝（CC，2n=18）为父本进行杂交，并通过胚抢救（一种育种手段）得到6株F₁植株。回答下列问题：
(1)萝卜与芥蓝远缘杂交的后代一般不育，主要原因是_________。经胚抢救得到的6株F₁幼苗用_________处理，可使其成为四倍体，恢复其育性。
(2)若核仁显性使全部后代只表达萝卜或芥蓝一方的基因组，则上述6株F₁植株的表型可能有________（填“一种”“两种”“多种”或“都有可能”）。研究人员提取了亲本萝卜、芥蓝及F₁的总RNA并逆转录得到cDNA，以cDNA为模板用特定引物进行PCR，经1.5%琼脂糖凝胶电泳的结果如图所示。结合电泳图谱分析，核仁显性使F₁表达了_________一方的基因组。

(3)若对萝卜采用常规杂交育种，可培育出不同根形的品种。萝卜的根形由A、a和D、d两对常染色体上的等位基因控制，且独立遗传。现将两种稳定遗传的圆形萝卜进行杂交，F₁全为扁形；F₁自交，F₂有扁形、圆形和长形三种表型，已知同时含有A和D基因的个体表现为扁形。
①由此推测，F₂中圆形萝卜的基因型有________种，圆形萝卜自由交配，F₃中基因型为Aadd的萝卜所占比例为________。
②随机选取F₂中一个圆形萝卜，现欲鉴定其是纯合子还是杂合子，可选择表型为________的萝卜与其交配。若后代表型及比例为________，可证明其为纯合子；若后代表型及比例为________，可证明其为杂合子。

7 . 传统的木薯乙醇发酵工艺所使用的普通酿酒酵母缺乏水解淀粉的酶系，需要经过蒸煮、液化、糖化等工序将木薯中的淀粉水解成葡萄糖后才能用于酵母菌发酵。为了提高制备乙醇的效率，研究者欲通过基因工程获得能够高效表达和分泌淀粉酶的重组酿酒酵母。请回答下列问题：
(1)若要利用从细菌中获得的含淀粉酶基因（amy）的DNA片段为模板，则通过PCR技术获得大量amy时，还需要在缓冲液中添加引物、4种脱氧核苷酸、________________________、镁离子等，需要添加引物的原因是_________________；扩增____________轮后能得到含目的基因的等长的DNA双链序列。
(2)研究发现，如果amy上特定位置的GTG（位置如图1）突变为ATG，淀粉酶的活性将大大提高。为了通过PCR引入该定点突变，获得高效的淀粉酶，需要如何设计PCR引物？_____________。

   

(3)用限制酶BamHI与SpeI切割含amy的DNA片段和载体pScIKP，然后将amy与载体相连接，构建重组质粒pSc-amy。对pScIKP和目的基因采用双酶切的目的是____________________。
(4)已知淀粉遇碘变蓝，而葡萄糖遇碘无此现象。为了分离出能够高效表达淀粉酶基因的重组酵母，可使用含__________的培养基。培养3天后，用碘熏蒸染色，结果如图2所示。若你是研究者，将选择菌落__________（填数字）进行扩大培养，原因是________________________。